Антрациклингликозид, способ его получения, его применение и фармацевтическая композиция

1 Область техники, к которой относится изобретение Изобретение относится к антрациклингликозидам, способу их получения и содержащим их фармацевтическим композициям и может быть использовано в химической промышленности и медицине. Сущность изобретения Изобретение относится к антрациклингликозидам, отвечающим формуле (I) где волнистая линия означает, что гидроксильная группа в положении 13 может находиться в- или -положении или в виде их смеси. Соединения формулы (I) включают производные, в которых гидроксильная группа в положении 13 имеет конфигурацию 13(S), 13(R),или смесь и 13(R) и 13(S) диастереоизомеров,которая представляет собой 4-деметокси-13(S/R)-дигидро-3'-дезамино 3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин(1 в). Более предпочтительно, настоящее изобретение относится к антрациклингликозидам вышеприведенной формулы (I), отличающимся тем, что атом углерода в положении 13 имеет конфигурацию S, то есть антрациклингликозид представляет собой 4-деметокси-13(S)-дигидро 3'-дезамино-3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин (1 б). Соединения формулы (I) могут быть получены путем восстановления антрациклина формулы (II) в присутствии восстановителя, такого как боргидрид натрия, в смеси органических растворителей, таких как дихлорметан и метанол, пред 002161 2 почтительно при температуре ниже 50 С, более предпочтительно при температуре -70 С, и, если желательно и необходимо, путем разделения полученной в результате смеси 13(R)- и 13(S)соединений на индивидуальные диастереоизомеры. Например, индивидуальные 13-дигидродиастереоизомеры могут быть получены путем разделения смеси с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). В частности, разделение с помощью ВЭЖХ можно осуществлять в колонке с обращенной фазой при использовании смеси фосфатного буфера,такого как 10 мМ К 2 НРO4, доведенного до рН = 7,0 с помощью 85 %-ной фосфорной кислоты, с органическим растворителем в качестве подвижной фазы, таким как тетрагидрофуран или ацетонитрил. Исходным материалом для получения новых антрациклингликозидов является 4 деметокси-3'-дезамино-3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин формулы (II), описанный в патенте США А-5532218. Изобретение относится, далее, к фармацевтической композиции, включающей антрациклингликозид формулы (I) в смеси с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Могут быть использованы обычные носители и разбавители. Композицию можно готовить и вводить обычным образом. Соединения согласно изобретению пригодны для лечения человеческого или животного организма консервативными методами. Они полезны в качестве противоопухолевых средств. Они пригодны для лечения лейкоза и твердых опухолей, таких как опухоли толстой кишки,толстой кишки-ректальные опухоли, овариальные опухоли, опухоли молочной железы, простаты, легких, почек, а также меланомы. Следовательно, человека можно лечить методом,включающим введение ему терапевтически эффективного количества соединения согласно изобретению. Таким образом может быть улучшено состояние пациента. Вводимая доза может быть установлена при использовании известных диапазонов доз в области антрациклинов и изменяться в соответствии с активностью, проявляемой соединениями настоящего изобретения вin vitro и in vivo противоопухолевых тестах. Пригодные дозы обычно находятся в диапазоне от 1 до 200 мг/м 2 поверхности тела, предпочтительно от 1 до 100 мг/м 2, в зависимости от природы и тяжести излечиваемого заболевания и от общего состояния пациента. Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения Соединения формулы (I) испытывали и они найдены активными in vitro против ряда мышиных и человеческих опухолевых клеточных линий и in vivo в случае распространенногоIn vitro и in vivo активность соединения формулы (1a) В случае ряда мышиных и человеческих опухолевых клеточных линий соединение формулы (Iа) обладает высокой цитотоксичностью,как видно из значений ИК 50, указанных в табл. 1. Результаты теста in vivo для соединения формулы(Iа) в случае распространенного P388/DX мышиного лейкоза представлены в табл. 2. Таблица 1. In vitro цитотоксичность соединения формулы (1 а) Соединение формулы (Iа) Клеточная линия 1) ИК 502), нг/мл; среднее значениестандартное отклонение где 1) клетки, инкубированные с соединением в течение 1 ч; 2) ингибирующая на 50% концентрация представляет собой среднее значениестандартное отклонение, рассчитанное из кривых доза-ответ, по крайней мере, для двух экспериментов; 3) подавление роста, определяемое путем подсчета выживших клеток; 4) подавление роста, определяемое путем количественного анализа с помощью SRBколориметрии. Таблица 2. In vivo противоопухолевая активность соединения формулы (Iа) против распространенного P388/DX(105/мышь) вводят путем инъекции внутривенно в день 0; 2) лечение получают внутривенно в день 1 после трансплантации опухоли (день 0); соединение формулы (1 а) солюбилизируют в [Cremophor/этанол= 6,5:3,5]/[изотонический раствор][(среднее время жизни обработанных мышей/среднее время жизни контрольных мышей) х 100] - 100; 4) число токсических смертей/число мышей; 5) оставшиеся в живых (60 дней) по окончании экспериментов. Следующий пример иллюстрирует изобретение. Пример 1. 13(R/S)-Дигидро-4-деметокси 3'-дезамино-3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин (1 а) 600 мг (1 ммоль) 4-Деметокси-3'-дезамино 3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицина (II) растворяют в 50 мл дихлорметана и охлаждают до температуры -70 С. Раствор прика 002161 4 пывают к раствору 120 мг (3,2 ммоль) боргидрида натрия в 5 мл метанола. Спустя 15 мин добавляют 10 мл ацетона, затем реакционную смесь доводят до комнатной температуры, добавляют 500 мл дихлорметана и промывают двукратно по 200 мл водой. Органическую фазу отделяют, концентрируют до небольшого объема и подвергают флэш-хроматографии на силикагеле, используя смесь толуола с ацетоном в объемном соотношении 8:2. Содержащие целевое соединение фракции объединяют, концентрируют до небольшого объема и осаждают с помощью смеси гексана с диэтиловым эфиром в объемном соотношении 85:5, получая 400 мг 13(R/S)-дигидро-4-деметокси-3'-дезамино-3'азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицинаRf = 0,3 (тонкослойная хроматография на силикагелевой пластине (Мерк) при использовании в качестве элюирующего средства смеси толуола с ацетоном в объемном соотношении 80:20). 1H-ЯМР-спектр (400 МГц, дейтерохлороформ)в м.д.: 1,14, 1,23, 1,72 (м, СН 2 СН 2 азиридина, Iа+Iб); 1,27 (д, J = 6,3 Гц , СН 3 -13, Iб); 1,32 (д, J = 6,3 Гц, СН 3 -13, Iа); 1,38 (д, J = 6,5 Гц, СН 3 - 5', Ia+Iб); 1,47 (ддд, J = 2,6, 4,5, 12,5 Гц, СН 3 - 3' , Iа+Iб); 1,78 (м, Н-2' акс., Iа+Iб; Н-8 акс., Iа); 1,87 (дд, J = 4,1, 15,0 Гц, Н - 8 акс., Iб); 2,07 (дд, J = 4,0, 13,4 Гц, Н-2' экв., Ia); 2,10 (дд, J где волнистая линия означает, что гидроксильная группа в положении 13 может находиться в 2. Соединение по п.1, представляющее собой 4-деметокси-13(S/R)-дигидро-3'-дезамино 3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин,или 4-деметокси-13(S)-дигидро-3'-дезамино-3'азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин или 4-деметокси-13(R)-дигидро-3'-дезамино-3'азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин. 3. Способ получения антрациклингликозида формулы (I) по п.1, включающий восстановление антрациклина формулы (II) 6 обходимо, разделение полученной в результате смеси 13(R)- и 13(S)-соединений на индивидуальные диастереоизомеры. 4. Способ по п.3, в котором восстановителем является боргидрид натрия. 5. Способ по п.3 или 4, в котором восстановление осуществляют при температуре ниже 50 С. 6. Способ по п.5, в котором восстановление осуществляют при температуре -70 С. 7. Фармацевтическая композиция, включающая антрациклингликозид формулы (I) по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. 8. Применение соединения по п.1 или 2 для лечения человеческого или животного организма консервативным методом. 9. Применение соединения по п.1 или 2 в качестве противоопухолевого средства. в присутствии восстановителя в смеси органических растворителей и, если желательно и не Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, ГСП-9 101999, Москва, Центр, М. Черкасский пер., 2/6