Дозированная форма иммуногенного препарата против гриппа для применения у человека и содержащая ее вакцина, способы их приготовления и их применение для лечения или предупреждения заболеваний, вызываемых вирусом гриппа у людей

ДОЗИРОВАННАЯ ФОРМА ИММУНОГЕННОГО ПРЕПАРАТА ПРОТИВ ГРИППА ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ У ЧЕЛОВЕКА И СОДЕРЖАЩАЯ Е ВАКЦИНА, СПОСОБЫ ИХ ПРИГОТОВЛЕНИЯ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ВИРУСОМ ГРИППА У ЛЮДЕЙ В изобретении предложена дозированная форма иммуногенного препарата против гриппа для применения у человека в количестве от 0,2 до 1,5 мл, включающая антиген или антигенный препарат вируса гриппа, содержащий 15 мкг или менее 15 мкг гемагглютинина (НА) на штамм вируса гриппа, в комбинации с адъювантом в виде эмульсии типа "масло в воде", где адъювант содержит (1) 5-6 мг сквалена, 2-3 мг эмульгатора и 5-7 мг токола на дозу для человека; (2) 2-3 мг сквалена, 1-1,5 мг эмульгатора и 2,5-3,5 мг токола на дозу для человека или (3) 0,5-1,5 мг сквалена, 0,25-0,75 мг эмульгатора и 0,5-1,5 мг токола на дозу для человека. Также предложена содержащая ее вакцина. Дозированная форма препарата по изобретению обеспечивает экономию антигена и снижение реактогенности. Предложены также способы приготовления дозированной формы и вакцины и их применение для лечения или предупреждения заболеваний, вызываемых вирусом гриппа у людей. Баллоу Уилльям Рипли, Ханон Эммануэль Жюль (BE) Поликарпов А.В., Борисова Е.Н. (RU) Область изобретения Настоящее изобретение относится к иммуногенным композициям против гриппа и к схемам вакцинации для иммунизации людей против гриппа, к их применению в медицине, в частности к их применению для усиления иммунных ответов на различные антигены, и к способам их приготовления. В частности, изобретение относится к вакцинам против гриппа, содержащим антиген или антигенный препарат вируса гриппа в комбинации с адъювантом в виде эмульсии типа "масло в воде", где указанный адъювант в виде эмульсии типа "масло в воде" содержит метаболизируемое масло и эмульгатор и, возможно,токол и/или стерол. Предшествующий уровень техники Вирусы гриппа представляют собой одни из самых распространенных вирусов в мире, поражающих как человека, так и домашний скот. Грипп приводит к значительным экономическим затратам, заболеваемости и даже смертности. Вирус гриппа представляет собой оболочечный РНК-вирус с размером частиц около 125 нм в диаметре. Он состоит в основном из внутреннего нуклеокапсида или ядра из рибонуклеиновой кислоты(РНК), ассоциированного с нуклеопротеином, окруженного вирусной оболочкой с липидной бислойной структурой и наружными гликопротеинами. Внутренний слой вирусной оболочки состоит преимущественно из белков матрикса, а наружный слой - главным образом из липидного материала хозяина. Вирус гриппа содержит два поверхностных антигена, гликопротеины нейраминидазу (NA) и гемагглютинин(НА), которые выступают на поверхности частиц в виде шипов длиной от 10 до 12 нм. Именно эти поверхностные белки, особенно гемагглютинин, определяют антигенную специфичность подтипов гриппа. Вирусные штаммы классифицируются по виду хозяина, из которого их выделяют, географическому месту и году выделения, порядковому номеру и, для гриппа А, по серологическим свойствам подтипов НА иNA. Для вирусов гриппа А идентифицировано 16 подтипов НА (Н 1-Н 16) и девять подтипов NA (N1-N9)RA et al. Characterization of a Novel Influenza A Virus Hemagglutinin Subtype (H16) Obtained from BlackHeaded Gulls. J. Virol. 2005;79:2814-2822)]. Вирусы всех подтипов НА и NA были выделены из водоплавающих птиц, но только три подтипа НА (Н 1, Н 2 и Н 3) и два подтипа NA (N1 и N2) имеют установленные стабильные линии в человеческой популяции с 1918 года. Для вирусов гриппа В известен только один подтип НА и один (подтип) NA. Вирусы гриппа А постоянно эволюционируют и подвергаются антигенной изменчивости [Wiley D.,Skehel J. The structure and the function of the hemagglutinin membrane glycoprotein of influenza virus. Ann.Rev. Biochem. 1987; 56:365-394]. Отсутствие эффективного исправления ошибок вирусной РНКполимеразой приводит к высокой частоте транскрипционных ошибок, что может приводить к аминокислотным заменам в поверхностных гликопротеинах. Это называется "антигенный дрейф". Сегментированный вирусный геном делает возможным второй тип антигенной изменчивости. Если два вируса гриппа одновременно инфицируют клетку хозяина, то генетическая рекомбинация, именуемая "антигенный сдвиг", может создать новый вирус с новыми поверхностными или внутренними белками. Эти антигенные изменения, как "дрейфы", так и "сдвиги", являются непредсказуемыми и могут оказывать сильное влияние с иммунологической точки зрения, поскольку они в конечном счете приводят к появлению новых штаммов гриппа и позволяют вирусу ускользнуть от иммунной системы, вызывая общеизвестные практически ежегодные эпидемии. Обе эти генетические модификации приводили к новым вариантам вируса, ответственным за пандемии у людей. Антигенный дрейф вируса гриппа В является менее частым явлением, чем в штаммах А, и антигенный сдвиг не известен. Хотя антигенно разные линии (обычно две, например B/Yamagata и B/Victoria) вируса гриппа В могут время от времени циркулировать совместно в соотношениях, варьирующих от года к году и от страны к стране, общим для вакцин против гриппа является то, что они содержат только один штамм вируса гриппа В. НА является наиболее важным антигеном в определении серологической специфичности разных штаммов вируса гриппа. Этот белок, имеющий массу 75-80 кДа, содержит многочисленные антигенные детерминанты, некоторые из которых находятся в участках, которые подвергаются изменениям последовательности в разных штаммах (штаммоспецифические детерминанты), а другие находятся в участках,которые являются общими для многих молекул НА (общие детерминанты). Вирусы гриппа вызывают эпидемии практически каждую зиму с уровнями заболеваемости для вируса типа А или В до 40% в течение шестинедельного периода. Гриппозная инфекция приводит к различным болезненным состояниям, от бессимптомной инфекции через умеренную инфекцию верхних дыхательных путей до тяжелой вирусной пневмонии. Типичные эпидемии гриппа вызывают увеличение заболеваемости пневмонией и болезнями нижних дыхательных путей, о чем свидетельствуют повышенные показатели госпитализации и смертности. Тяжесть данного заболевания в первую очередь определяется возрастом хозяина, его иммунным статусом и местом инфицирования. Пожилые люди в возрасте 65 лет и старше особенно восприимчивы - на их долю в развитых странах приходится 80-90% всех смертей, связанных с гриппом. Индивидуумы с хроническими заболеваниями или с ослабленным иммунитетом также имеют наибольшую вероятность испытывать такие осложнения. У маленьких детей заболевание также может протекать в тяжелой форме. Поэтому эти группы особенно нуждаются в защите. Помимо этих "групп риска" органы здравоохранения также рекомендуют вакцинировать медицинских работников. Вакцинация играет решающую роль в контролировании ежегодных эпидемий гриппа. Доступные в настоящее время вакцины против гриппа представляют собой либо инактивированные, либо живые аттенуированные вакцины против гриппа. Инактивированные вакцины против гриппа состоят из трех возможных форм антигенного препарата: инактивированный цельный вирус, субвирионы, где очищенные вирусные частицы расщеплены детергентами или другими реагентами для солюбилизации липидной оболочки (так называемая "сплит-вакцина"), или очищенные НА и NA (субъединичная вакцина). Эти инактивированные вакцины вводят внутримышечно (в.м.), подкожно (п.к.) или интраназально (и.н.). Вакцины против гриппа всех типов для межпандемического применения обычно представляют собой тривалентные вакцины. Они, как правило, содержат антигены, полученные из двух штаммов вируса гриппа А и одного штамма вируса гриппа В. Стандартная инъецируемая доза 0,5 мл в большинстве случаев содержит (по меньшей мере) 15 мкг антигенного компонента, представляющего собой гемагглютинин, из каждого штамма, как измерено методом одномерной радиальной иммунодиффузии (SRD) (J.M.(1977) 237-247; J.M. Wood et al., International collaborative study of single radial diffusion and immunoelectrophoresis techniques for the assay of haemagglutinin antigen of influenza virus. J. Biol. Stand. 9 (1981) 317330). Сообщалось также о квадривалентных вакцинах, содержащих в дополнение к трем классическим штаммам дополнительный штамм В (Commun. Dis. Intell. 2006, 30, 350-357) или дополнительный штаммH3N2 (Vaccine 1992, 10, 506-511). Межпандемические штаммы вируса гриппа для включения в вакцину против гриппа каждый сезон определяет Всемирная организация здравоохранения в сотрудничестве с национальными органами здравоохранения и производителями вакцин. Доступные в настоящее время межпандемические вакцины против гриппа считаются безопасными для всех возрастных групп (De Donato et al. 1999, Vaccine, 17, 30943101). Тем не менее, на эффективность вакцины влияет возраст и иммунный статус реципиентов, а также соответствие вакцины циркулирующим штаммам вируса гриппа. Имеется немного оснований считать,что современные вакцины против гриппа работают у маленьких детей в возрасте до двух лет. Кроме того, уровни эффективности вакцин, о которых сообщают, для предупреждения типичной подтвержденной заболеваемости гриппом составляют 23-72% для пожилых людей, что значительно ниже, чем уровни эффективности 60-90%, о которых сообщалось для более молодых взрослых людей (Govaert, 1994, J. Am.Med. Assoc, 21, 166-1665; Gross, 1995, Ann Intern. Med. 123, 523-527). Было показано, что эффективность вакцины против гриппа коррелирует с сывороточными титрами ингибирующих гемагглютинацию (HI) антител к вирусному штамму, и в нескольких исследованиях было обнаружено, что пожилые люди демонстрируют меньшие титры HI антител после иммунизации вирусом гриппа по сравнению с более молодыми взрослыми людьми (Murasko, 2002, Experimental gerontology, 37, 427-439). В межпандемические периоды в виде фона циркулируют вирусы гриппа, родственные вирусам из предыдущей эпидемии. Эти вирусы распространяются среди людей с варьирующими уровнями иммунитета против инфекций, перенесенных ранее в жизни. Такая циркуляция, обычно в течение периода 2-3 года, стимулирует отбор новых штаммов, которые изменились достаточно, чтобы вновь вызвать эпидемию среди всех слоев населения. Этот процесс называется "антигенный дрейф". "Дрейф-варианты" могут иметь разные последствия в различных группах населения, регионах, странах или континентах в любой год, хотя в течение нескольких лет их общее воздействие часто является сходным. Типичные эпидемии гриппа вызывают увеличение заболеваемости пневмонией и болезнями нижних дыхательных путей,о чем свидетельствуют возросшие показатели госпитализации или смертности. Пожилые люди или индивидуумы с основными хроническими заболеваниями наиболее подвержены таким осложнениям, но и у маленьких детей заболевание также может протекать в тяжелой форме. Через непредсказуемые промежутки времени появляются новые вирусы гриппа с ключевым поверхностным антигеном, гемагглютинином, совершенно другого подтипа по сравнению со штаммами,циркулирующими сезоном ранее. Здесь образующиеся антигены могут отличаться на 20-50% от соответствующего белка штаммов, которые ранее циркулировали у людей. Это явление, названное "антигенным сдвигом", может приводить к тому, что вирус ускользает от "коллективного иммунитета" и порождает пандемию. Другими словами, пандемии гриппа возникают, когда появляется новый вирус гриппа, против которого популяция людей не имеет иммунитета. Полагают, что, по меньшей мере, последние пандемии возникли, когда вирус гриппа из другого вида, такой как вирус птичьего или свиного гриппа, перешагнул видовой барьер. Если такие вирусы могут распространяться от человека к человеку, то они могут распространиться по всему миру за период времени от нескольких месяцев до года, приводя к пандемии. Например, в 1957 году (пандемия азиатского гриппа) вирусы подтипа H2N2 заменили вирусы H1N1, которые циркулировали в человеческой популяции по меньшей мере с 1918 года, когда данный вирус был впервые выделен. Между 1957 и 1968 годами НА Н 2 и NA N2 претерпевали антигенный дрейф до тех пор, пока в 1968 году (пандемия гонконгского гриппа) НА не был вытеснен появлением подтипа гриппаH3N2, после чего NA N2 продолжила дрейф наряду с НА Н 3 (Nakajima et al., 1991, Epidemiol. Infect. 106,383-395). Было проведено несколько клинических испытаний для оценки безопасности и иммуногенности в непримированных популяциях с моновалентными вакцинами-кандидатами, содержащими пандемический штамм, такой как не циркулирующие штаммы H2N2 или H9N2. В этих испытаниях исследовались препараты на основе расщепленных или цельных вирусов с разными концентрациями НА (1,9; 3,8; 3,8; 7,5 или 15 мкг НА на дозу) с адъювантом, представляющим собой квасцы, или без него. Вирусы гриппа подтипа H2N2 циркулировали с 1957 до 1968 года, когда они были вытеснены штаммами H3N2 во время"гонконгской пандемии". Сегодня индивидуумы, которые родились после 1968 года, являются иммунологически наивными по отношению к штаммам H2N2. Было показано, что эти вакцины-кандидаты являются иммуногенными и хорошо переносимыми. Результаты опубликованы в Hehme, N et al. 2002, Med.Microbiol. Immunol. 191, 203-208; в Hehme N et al. 2004, Virus Research 103, 163-171; и было опубликовано два исследования с H5N1 (Bresson J.L. et al. The Lancet. 2006:367 (9523): 1657-1664; Treanor J.J. et al. NEngl J Med. 2006; 354:1343-1351). В других публикациях сообщалось о результатах исследований с вакцинами против гриппа, содержащими адъювант MF59. В одном исследовании было показано, что две дозы вакцины, содержащей адъювант MF59, против гриппа H5N3 повышали иммунитет к гриппу H5N1 в примированной популяции (Stephenson et al., Vaccine 2003, 21, 1687-1693), а в другом исследовании сообщалось о перекрестных ответах антител на вирусы H5N1, полученных после трех доз вакцины с адъювантом MF59 против гриппа H5N3 (Stephenson et al., J. Infect. Diseases 2005, 191, 1210-1215). Что касается осложнений вследствие сезонного гриппа, лица с повышенным риском заболевания в случае пандемии гриппа могут отличаться от определенных групп риска. Согласно ВОЗ у людей 50% случаев заболевания, вызванного штаммом H5N1 птичьего гриппа, наблюдалось у людей в возрасте до 20 лет, 90% наблюдалось среди людей в возрасте до 40 лет (ВОЗ, еженедельная эпидемиологическая запись, 30 июня 2006 г.). Во время пандемии имеющихся противовирусных средств может быть не достаточно для удовлетворения потребности или они могут быть неэффективными, и количество индивидуумов с повышенным риском заболеть гриппом больше, чем в межпандемические периоды, поэтому разработка подходящей вакцины, которую можно производить в больших количествах и эффективно распределять и вводить является важной. Один из путей заключается в том, чтобы быстро запустить производственные мощности для производства вакцины против пандемического гриппа. Однако, поскольку массовая вакцинация может начаться только после начала пандемии, в любом случае будут существенные задержки, вызванные тем, что для идентификации штамма и для выработки первой партии требуется время. Более того,будет иметь место фиксированный и поэтому ограниченный еженедельный выпуск вакцин производителями. Это означает, что существующий в настоящее время подход почти однозначно оставляет значительную часть населения вообще без защиты при возникновении пандемии. Вакцина для значительной части населения может стать доступной слишком поздно, и ожидается высокая смертность, по некоторым оценкам 180-360 миллионов смертей по всему миру. Одним из путей решения этой существующей в настоящее время дилеммы является создание пандемической вакцины в преддверии пандемии и разработка моновалентной вакцины с "наилучшим кандидатом пандемического штамма" вместо тривалентных вакцин с целью уменьшения объема вакцины, в основном из-за того, что две дозы вакцины могут потребоваться для достижения защитных уровней антител у иммунологически наивных реципиентов (Wood J.M. et al. Med Mircobiol Immunol. 2002; 191:197201. Wood J.M. et al. Philos Trans R Soc Lond В Biol Sci. 2001; 356:1953-1960). Эта вакцина затем может быть использована для накопления или для примирования населения в межпандемический период. К сожалению, поскольку существующие в настоящее время производственные мощности полностью загружены в течение всего года производством сезонных тривалентных вакцин для ежегодной вакцинации в северном и южном полушариях, оба вышеупомянутых подхода нецелесообразны, поскольку отсутствуют дополнительные производственные мощности для получения этого "самого лучшего кандидата пандемического штамма". Кроме того, следует отметить, что существует крайняя необходимость в поиске решения для восполнения нехватки межпандемических вакцин против гриппа, с которой регулярно приходится сталкиваться в периоды ежегодных сезонов гриппа. Одним из решений могло бы быть строительство дополнительных производственных мощностей, но на это потребуется несколько лет, что в любом случае нецелесообразно, если вспышка пандемии произойдет в ближайшие годы. В настоящее время единственным способом быстро получить дополнительные мощности могло бы стать сокращение времени наработки ежегодной тривалентной вакцины. Периодическая нехватка вакцин против гриппа, возникающая каждый сезон в большинстве стран, препятствует оптимальному охвату населения, рассматриваемому как группа высокого риска развития тяжелого гриппозного заболевания и осложнений. Поскольку наработка антигена является фактором, ограничивающим скорость производства вакцин против гриппа, необходимо использовать альтернативные стратегии экономии антигена. Некоторые подходы основаны на использовании адъювантов с целью повышения иммуногенности вакцины, чтобы иметь возможность снизить содержание антигена (экономия антигена) и, следовательно,-3 024250 увеличить число доступных доз вакцины. Использование адъюванта также может решить проблему потенциально слабой иммуногенности антигена у "наивного" населения. Было опубликовано несколько подходов. Были представлены примеры с использованием цельного инактивированного вируса H2N2 илиH9N2 с солью алюминия в качестве адъюванта (N. Hehme et al. Virus Research 2004, 103, 163-171) или с использованием простой вакцины на основе субвириона H5N1 или с вакцины на основе расщепленного вируса H5N1 с адъювантом, представляющим собой гидроксид алюминия (Bresson J.L. et al. The Lancet. 2006:367 (9523): 1657-1664; Treanor J.J. et al. N Engl J Med. 2006; 354:1343-1351). Результаты этого последнего испытания указывают на то, что как простая, так и адъювантная вакцина на основе вирусаH5N1 являются безопасными при дозе антигена вплоть до 90 мкг (протестирована только простая субвирионная вакцина). Однако, применение такой высокой дозы антигена не совместимо со стратегией экономии антигена, которая важна в случае пандемии. Субъединичная адъювантная противогриппозная адъювантная вакцина с адъювантом MF59 в виде эмульсии "масло в воде" коммерчески доступна для пожилых людей и населения, относящегося к группе риска, и она продемонстрировала свою способность индуцировать более высокий титр антител, чем титр,полученный с использованием неадъювантной субъединичной вакцины (De Donato et al. 1999, Vaccine,17, 3094-3101). Однако, в более поздней публикации та же самая вакцина не продемонстрировала улучшенный профиль по сравнению с неадъювантной сплит-вакциной (Puig-Barbera et al., 2004, Vaccine 23,283-289). Таким образом, все еще имеется потребность в новых вакцинах, которые эффективны и решают вопрос экономии антигена. Эти новые вакцины должны обладать если не улучшенной, то приемлемой иммуногенностью, в частности против ослабленных или неиммуногенных пандемических штаммов или для индивидуумов с ослабленным иммунитетом, таких как пожилые люди. В идеале, эти новые вакцины должны обладать также потенциалом перекрестной защиты, так чтобы их можно было использовать в качестве препандемических или накапливаемых вакцин для примирования иммунологически наивной популяции против пандемического штамма до или после объявления пандемии. Сущность изобретения Авторы настоящего изобретения обнаружили, что с целью улучшения снабжения вакцинами против гриппа могут быть разработаны новые эффективные иммуногенные противогриппозные препараты, которые содержат адъювант, с возможностью использования меньшего количества антигена вируса гриппа. Таким образом, предложены новые адъювантные композиции, использование которых делает возможным приготовление препарата с экономией антигена, обеспечивающего достаточную защиту всех возрастных групп с точки зрения опосредованного клетками иммунного ответа и/или гуморального ответа. В частности, авторы изобретения установили, что такой препарат может быть основан на иммуногенных противогриппозных композициях, характеризующихся тем, что каждый или все индивидуальные компоненты адъюванта в иммуногенной композиции содержится/содержатся на более низком уровне по сравнению с уровнем, который ранее считался полезным. Это дает преимущество в том, что уровень иммуногенности против антигена сохраняется, а реактогенность в реципиенте-хозяине снижается. Соответственно в первом аспекте настоящего изобретения предложена дозированная форма иммуногенного препарата против гриппа для применения у человека в количестве от 0,2 до 1,5 мл, включающая антиген или антигенный препарат вируса гриппа, содержащий 15 мкг или менее 15 мкг гемагглютинина (НА) на штамм вируса гриппа, в комбинации с адъювантом в виде эмульсии типа "масло в воде",где адъювант содержит (1) 5-6 мг сквалена, 2-3 мг эмульгатора и 5-7 мг токола на дозу для человека; (2) 2-3 мг сквалена, 1-1,5 мг эмульгатора и 2,5-3,5 мг токола на дозу для человека или (3) 0,5-1,5 мг сквалена,0,25-0,75 мг эмульгатора и 0,5-1,5 мг токола на дозу для человека. Предпочтительно, когда указанный эмульгатор представляет собой неионное поверхностноактивное вещество, более предпочтительно полиоксиэтилен-сорбитана моноолеат или сорбитана триолеат или их смесь. Наиболее предпочтительно указанный полиоксиэтилен-сорбитана моноолеат выбран из группы,включающей в себя Polysorbat 80 или Tween 80, и сорбитана триолеат представляет собой Span85. Предпочтительной является дозированная форма, как она определена выше, где указанный токол представляет собой альфа-токоферол. Еще более предпочтительной является дозированная форма по изобретению, где адъювант дополнительно содержит лиганд Toll-подобного рецептора (TLR), выбранного из TLR-1, TLR-2, TLR-3, TLR-4,TLR-7, TLR-8, TLR-9 или их комбинации. Предпочтительно, когда указанный лиганд TLR-4 выбран из производного липида А, которое представляет собой 3D-MPL (3-О-деацилированный монофосфориллипид А), ОМ 174 (2-дезокси-6-о-[2 дезокси-2-[(R)-3-додеканоилокситетра-деканоиламино]-4-о-фосфоно-(-D-глюкопиранозил]-2-[(R)-3 гидрокситетрадеканоиламино]D-глюкопиранозилдигидрофосфат), ОМ 294 (DP (3S,9R)-3-[(R)додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9(R)-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10 диол, 1,10-бис(дигидрофосфат или ОМ 197 (МР-Ас DP (3S,9R)-3-[(R)-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол, 1-дигидрофосфат 10-(6-аминогексаноат, алкилглюкозаминидфосфатов (AGP) и химического соединения, выбранного из группы, включающей ER 803022, ER 803058, ER 803732, ER 804053, ER 804057, ER 804058, ER 804059,ER 804442, ER 804680 и ER 804764, раскрытые в описании. Конкретными воплощениями дозированной формы согласно изобретению являются следующие: дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее 10 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее 8 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее 4 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее 2 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее 1 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее 0,5 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит 0,1 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит 2-7,5 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит 1 -5 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее или точно 5 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее или точно 2,5 мкг НА на штамм вируса гриппа; дозированная форма, где указанный вирусный антиген или антигенный препарат содержит менее или точно 1 мкг НА на штамм вируса гриппа. Одним из воплощений заявленного изобретения является дозированная форма, как она определена выше, в которой иммуногенный препарат является моновалентным, содержащим вирусный антиген или антигенный препарат из пандемического штамма. Другим воплощением заявленной дозированной формы является дозированная форма, как она определена выше, в которой иммуногенный препарат является поливалентным, содержащим вирусный антиген или антигенный препарат, по меньшей мере, из двух штаммов вируса гриппа. Еще одним воплощением заявленной дозированной формы является дозированная форма, как она определена выше, в которой иммуногенный препарат является поливалентным, содержащим вирусный антиген или антигенный препарат, по меньшей мере, из трех штаммов вируса гриппа. Еще одним воплощением заявленной дозированной формы является дозированная форма, как она определена выше, в которой иммуногенный препарат является поливалентным, содержащим вирусный антиген или антигенный препарат, по меньшей мере, из четырех штаммов вируса гриппа. Еще одним воплощением заявленной дозированной формы является дозированная форма, как она определена выше, в которой иммуногенный препарат является поливалентным, содержащим вирусный антиген или антигенный препарат, по меньшей мере, из пяти штаммов вируса гриппа. Предпочтительно, когда в вышеуказанных воплощениях дозированной формы поливалентный иммуногенный препарат содержит вирусный антиген или антигенный препарат, по меньшей мере, из трех сезонных штаммов вируса гриппа (межпандемических). Наиболее предпочтительно, когда такой иммуногенный препарат содержит вирусный антиген или антигенный препарат, по меньшей мере, из одного пандемического штамма вируса гриппа. Предпочтительно в вышеуказанных воплощениях вирус гриппа выбран из группы, состоящей из (1) двух штаммов А, выбранных из H1N1 и H3N2, и двух штаммов В, выбранных из B/yamagata и B/Victoria;B/Victoria; (3) двух штаммов А, выбранных из H1N1 и H3N2, одного штамма A H5N1 и одного штамма В, выбранного из B/yamagata и B/Victoria. Пандемический штамм вируса гриппа предпочтительно выбран из группы, состоящей из H5N1,H9N2, H5N8, H5N9, H7N4, H7N7, H2N2, H10N7, H5N2, H7N2, H7N1 и H7N3. В предпочтительном воплощении дозированной формы по настоящему изобретению антиген вируса гриппа или его антигенный препарат получен из вируса гриппа, выращенного на яйцах или на клеточной культуре. Также предпочтительной является дозированная форма по изобретению, в которой антиген вируса гриппа или его антигенный препарат представлен цельным вирусом, расщепленным вирусом, виросомой или одним или более чем одним очищенным антигеном, выбранным из НА, NA, М 1, М 2. Более предпочтительно, когда указанный(е) очищенный(е) антиген(ы) получен(ы) из вируса гриппа, выращенного в клетках млекопитающего, птицы или насекомого. Конкретными предпочтительными воплощениями дозированной формы согласно изобретению являются следующие: дозированная форма, как она определена выше, в которой указанная доза составляет от 0,5 до 1,5 мл; дозированная форма, как она определена выше, в которой указанная доза для человека составляет от 0,2 до 1,2 мл; дозированная форма, как она определена выше, в которой указанная доза для человека составляет от от 0,2 до 0,7 мл; дозированная форма, как она определена выше, в которой указанная доза для человека составляет менее или точно 0,25 мл; дозированная форма, как она определена выше, в которой указанная доза для человека составляет менее или точно 0,5 мл; дозированная форма, как она определена выше, в которой указанная доза для человека составляет менее или точно 0,7 мл; дозированная форма, как она определена выше, в которой указанная доза для человека составляет менее или точно 1 мл. Согласно изобретению также предложен способ приготовления дозированной формы иммуногенного препарата против гриппа, как она определена выше, включающий стадию смешивания, по существу, равных объемов эмульсии типа "масло в воде" и водной суспензии, содержащей антиген вируса гриппа или его антигенный препарат. Согласно изобретению также предложен способ приготовления дозированной формы иммуногенного препарата против гриппа, как она определена выше, включающий стадию смешивания эмульсии типа "масло в воде" и водной суспензии, содержащей антиген вируса гриппа или его антигенный препарат, где объем водной суспензии больше, чем объем эмульсии. В одном из воплощений предложенные способы включают стадию разведения эмульсии типа "масло в воде" водным носителем и затем смешивание полученной разведенной эмульсии с указанной водной суспензией антигена вируса гриппа. Также в настоящем изобретении предложена вакцина, содержащая дозированную форму иммуногенного препарата по изобретению и фармацевтически приемлемый эксципиент. Соответственно предложен также способ изготовления вакцины по изобретению, включающий стадию смешивания дозированной формы иммуногенного препарата, как она определена выше, с фармацевтически приемлемым эксципиентом. Еще один аспект настоящего изобретения составляет применение дозированной формы иммуногенного препарата, как она определена выше, для лечения или предупреждения заболевания, вызываемого вирусом гриппа у людей. Еще один аспект настоящего изобретения составляет применение дозированной формы иммуногенного препарата, как она определена выше, для лечения или предупреждения заболевания, вызываемого вирусом гриппа у людей, который представляет собой вариант вируса, из которого получен антиген,входящий в состав данного иммуногенного препарата. Еще один аспект настоящего изобретения составляет применение дозированной формы иммуногенного препарата против гриппа, как она определена выше, для ревакцинации индивидуумов, ранее вакцинированных указанным иммуногенным препаратом или вакциной по настоящему изобретению. В конкретных воплощениях вышеуказанных аспектов индивидуумы выбраны из группы, состоящей из пожилых людей в возрасте 65 лет или старше, взрослых людей в возрасте 18-65 лет, детей в возрасте до 18 лет. Более предпочтительно, когда индивидуумы представляют собой взрослых людей в возрасте 18-50 лет. Еще один аспект настоящего изобретения составляет применение вакцины по изобретению для лечения или предупреждения заболевания, вызываемого вирусом гриппа. Еще один аспект настоящего изобретения составляет применение вакцины по изобретению для лечения или предупреждения заболевания, вызываемого вирусом гриппа, который представляет собой вариантвируса гриппа, из которого получен антиген, входящий в состав данной вакцины. Краткое описание графических материалов Фиг. 1. Клиническое испытание - средние геометрические титров (GMT) для антитела против НА в разные моменты времени (АТР когорта в отношении иммуногенности). Фиг. 2. Клиническое испытание - уровень серозащиты (SPR) для титра HI антител с 95%-ным доверительным интервалом в день 0 и день 21 (АТР когорта в отношении иммуногенности). Фиг. 3. Клиническое исследование - уровень сероконверсии (SCR) для титра HI антител с 95%-ным доверительным интервалом в день 21 (АТР когорта в отношении иммуногенности). Фиг. 4. Клиническое испытание - фактор сероконверсии (SCF) для титра HI антител с 95% доверительным интервалом в день 21 (АТР когорта в отношении иммуногенности). Фиг. 5. Исследование на мышах - тест на ингибирование гемагглютинина (GMT +/-IC95) у мышейBALB/c, примированных гетеросубтипическими штаммами (диапазон доз AS03). Фиг. 5 А - титры HI антител против A/New Caledonia/20/99. Фиг. 5 В - титры HI антител против A/Panama/2007/99 HI. Фиг. 5 С - титры HI антител против B/Shandong/7/97. Фиг. 6. Исследование на мышах - тест на ингибирование гемагглютинина (GMT +/-IC95) у мышейC57BI/6, примированных гетеросубтипическими штаммами (диапазон доз AS03). Фиг. 7. Исследование на мышах - клеточный иммунный ответ (CD4+ Т-клетки) в РВМС (мононуклеарные клетки периферической крови) мышей C57BI/6, примированных гетеросубтипическими штаммами (диапазон доз AS03). Фиг. 8. Исследование на мышах - клеточный иммунный ответ (CD4+ Т-клетки) в РВМС мышейC57BI/6, примированных гетеросубтипическими штаммами и подвергнутых иммунизации низкой дозой антигена (0,5 мкг) с адъювантом в диапазоне доз AS03. Фиг. 9. Исследование на мышах - титры H5N1-специфических сывороточных Ig в ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ) (А и В) и IgG1 (С и D) и IgG2b (E и F) изотипичекие ответы противH5N1 в день 14 после иммунизации (GMT +/-IC95) для двух разных доз антигена: 1,5 мкг (А, С и Е) или 0,38 мкг (В, D и F). Фиг. 10. Исследование на мышах - тест на ингибирование гемагглютинации (GMT +/-IC95) в день 21 после иммунизации (GMT +/-IC95) для двух разных доз антигена: 1,5 мкг (А) или 0,38 мкг (В). Фиг. 11. Исследование на мышах - клеточный иммунный ответ (CD4+ Т-клетки) у "наивных" мышей C57BI/6, подвергнутых иммунизации разными дозами H5N1 вакцины (1,5 или 0,38 мкг) с адъювантом в диапазоне доз AS03: (А) 1,5 мкг НА Ag (антиген) или (В) 0,38 мкг НА Ag (антиген). Фиг. 12. Исследование на свиньях - тест на ингибирование гемагглютинина (GMT +/-IC95) у свиней, примированных гомологичными штаммами (диапазон доз AS03). Фиг. 13. - тест на ингибирование гемагглютинина (GMT +/-IC95) у "наивных" мышей C57BI/6, подвергнутых иммунизации TIV или QIV, простыми или с адъювантом AS03 или AS03/2. Фиг. 14 - тест на ингибирование гемагглютинина (GMT +/-IC95) у мышей C57BI/6, примированныхAS03 или AS03/2. Фиг. 15. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта): GMT для титра HI антител в день 0 и день 21. Фиг. 16. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у взрослых) - уровень серозащиты (SPR) для титра HI антител в день 0 и день 21. Фиг. 17. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у взрослых): фиг. 17 А - уровень сероконверсии (SCR) для титра HI антител в день 21 после иммунизации (PI(DAY21; фиг. 17 В для возрастной категории. Фиг. 18. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у взрослых): фиг. 18 А - фактор сероконверсии (SCF) для титра HI антител в день 21 после иммунизации (PI(DAY21; фиг. 18 В - для возрастной категории. Фиг. 19. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у пожилых): GMT для титра HI антител в день 0 и день 21. Фиг. 20. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у пожилых) - уровень серозащиты (SPR) для титра HI антител с 95% доверительным интервалом день 0 и день 21. Фиг. 21. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у пожилых) - уровень сероконверсии (SCR) для титра HI антител в день 21 после иммунизации (PI(DAY21. Фиг. 22. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у пожилых) - SCF для титра HI антител с 95%-ным доверительным интервалом (CI) в день 21 (АТР когорта в отношении HI иммуногенности). Фиг. 23. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у пожилых) - цитокинпозитивные CD4 Т-клетки для объединенных штаммов в день 0 и день 21 (АТР когорта для CMI (клеточноопосредованный иммунитет. Фиг. 24. Клиническое испытание на людях (диапазон доз адъюванта у пожилых) - процент субъектов, сообщивших о связанных обычных и необычных симптомах (все степени/степень 3) в течение 7 дневного (дни 0-6) периода после вакцинации (вся вакцинированная когорта). Подробное описание изобретения Авторы настоящего изобретения обнаружили, что адъювантная композиция, содержащая метаболизируемое масло, такое как сквален, эмульгатор и токол, где каждый компонент присутствует на более низком уровне на дозу вакцины для человека, чем использовали ранее, может улучшать иммунные ответы на противогриппозный препарат и в то же время иметь меньшую реактогенность по сравнению с некоторыми препаратами предшествующего уровня техники, в которых адъювантные компоненты присутствовали на более высоких уровнях (предпочтительно в 2 раза выше или более чем в 2 раза выше) на дозу для человека. Авторы настоящего изобретения также обнаружили, что противогриппозный препарат, содержащий вирус гриппа или его антигенный препарат вместе с адъювантом, как определено здесь, и возможно дополнительно с иммуностимуляторами, такими как производное липида А, например 3D-MPL (3-Одеацилированный монофосфориллипид А), способен 1) улучшать CD4-Т-клеточный иммунный ответ и/или гуморальный иммунный ответ на указанный антиген или антигенную композицию по сравнению с указанными ответами, достигаемыми с использованием вируса или его антигенного препарата без адъюванта, и/или 2) формировать CD4-Т-клеточный иммунный ответ и/или гуморальный иммунный ответ на указанный антиген или антигенную композицию, сравнимый с указанными ответами, достигаемыми с использованием композиции с адъювантом, в которой каждый компонент присутствует на более высоком (предпочтительно в 2 раза выше или более чем в 2 раза выше) уровне. Препараты с адъювантом преимущественно применяют для индуцирования CD4-Т-клеточных ответов на вирус гриппа, способных обнаруживать эпитопы вируса гриппа, презентируемые молекулами МНС класса II (молекулами главного комплекса гистосовместимости класса II). Авторами настоящего изобретения было обнаружено, что для того чтобы увеличить реактивность против гомологичных и дрейфующих штаммов вируса гриппа(после вакцинации и инфицирования), эффективным является направленное воздействие на клеточноопосредованную иммунную систему. Дозированные формы иммуногенного препарата против гриппа для применения по настоящему изобретению способны обеспечивать у людей любое одно или оба из: (1) лучшая серозащита против вируса гриппа после ревакцинации по сравнению с композицией без адъюванта и (2) сравнимая серозащита против вируса гриппа после ревакцинации по сравнению с адъювантной композицией, где каждый компонент присутствует на более высоком уровне, оцениваемом по количеству субъектов-людей, удовлетворяющих любому, нескольким или всем коррелятам защиты от вируса гриппа (т.е. уровню сероконверсии, фактору конверсии, уровню защиты). Кроме того, в еще одном конкретном воплощении композиция для применения по настоящему изобретению также способна индуцировать любое одно или оба из: (1) более высокий ответ В-клеток памяти после первой вакцинации субъекта-человека и более высокий гуморальный ответ после ревакцинации по сравнению с композицией без адъюванта и (2) сравнимый ответ В-клеток памяти после первой вакцинации субъекта-человека и сравнимый гуморальный ответ после ревакцинации по сравнению с адъювантной композицией, где каждый компонент присутствует на более высоком (предпочтительно в 2 раза выше или более чем в 2 раза выше) уровне. Адъювантные композиции против гриппа по изобретению имеют несколько преимуществ. Эти преимущества можно оценить путем сравнения с эквивалентными композициями без адъюванта или путем сравнения с адъювантной композицией, в которой каждый компонент адъюванта присутствует на более высоком уровне: 1) улучшенная иммуногенность по сравнению с композицией без адъюванта, обеспечивающая любое или все из следующих: 1) усиление слабого иммунного ответа на менее иммуногенные штаммы вируса гриппа до уровня, который выше, чем уровень, достигаемый с использованием препаратов без адъюванта; 2) восстановление слабого иммунного ответа у специфического населения, например у пожилых людей (в возрасте старше 50 лет, типично в возрасте старше 65 лет), до уровней, наблюдаемых у молодых людей (антительные и/или Т-клеточные ответы); 2) использование адъювантов может победить потенциально слабую иммуногенность антигена у"наивного" населения или у маленьких детей (от 6 месяцев до 4 лет, особенно у детей в возрасте до 1 года) и индуцировать примирование и защиту; 3) в дополнение, по меньшей мере, к эквивалентной защите от вакцинных штаммов по сравнению с классической вакциной (например коммерчески доступной расщепленной вакциной) они могут придавать дополнительный уровень защиты против дрейфующих штаммов, приводя к улучшенному профилю перекрестной защиты: повышенная перекрестная реактивность, перекрестная защита против варианта(дрейфующего) штаммов вируса гриппа, что дает возможность выстраивать стратегию перекрестного примирования; и особый интерес представляет их применение в качестве препандемических вакцин дополнительно, что позволяет использовать только одну дозу пандемической вакцины для усиления защиты от (циркулирующего) пандемического штамма; и это также представляет интерес, поскольку может решить проблему дрейфов H3N2, которые имеют тенденцию появляться чаще, чем при другом межпандемическом штамме А Н 1N1; 4) пониженный профиль реактогенности адъювантной композиции по сравнению с профилем, получаемым с использованием композиции, где каждый компонент присутствует на более высоком (предпочтительно в 2 раза выше или более чем в 2 раза выше) уровне с сохранением удовлетворительного иммуногенного потенциала. Благодаря также достижению любого или всех этих преимуществ при уменьшенной дозировке антигена (обычно ниже 15 мкг/штамм/дозу) и уменьшенной дозировке адъюванта они обеспечивают увеличение способности в случае внезапной пандемической ситуации или пандемической ситуации, к которой готовы (экономия антигена при пандемии), и дает возможность обеспечить население в сезон межпандемической вакцинации большим количеством доз вакцины. Комбинация уменьшенной дозы антигена и/или уменьшенной дозы адъюванта делает возможной разработку более сложных противогриппозных композиций, таких как квадривалентная вакцина, содержащая четвертый штамм, который может представлять собой второй штамм вируса гриппа В или штамм пандемического вируса гриппа, добавленный в стандартную тривалентную вакцину. В еще одном аспекте изобретения адъювантная иммуногенная композиция, как она определена здесь, демонстрирует результаты иммуногенности в отношении продуцирования антител и частоты встречаемости после вакцинации специфических по отношению к вирусу гриппа (возможно перекрестно реактивных) CD4, которые больше чем или эквивалентны достигаемым с использованием вакцины без адъюванта или с использованием вакцины с адъювантом, в которой компоненты адъюванта присутствуют предпочтительно на более высоком уровне. Этот эффект особенно ценен у детского населения или пожилых людей, поскольку обеспечивает более высокую эффективность по сравнению с современными коммерческими вакцинами и одновременно показывают меньшие или более редкие симптомы реактогенности по сравнению с группой, получающей адъювантную вакцину, в которой компоненты адъюванта присутствуют в более высоком (предпочтительно в 2 раза более высоком) количестве. Адъювант в виде эмульсии типа "масло в воде". Адъювант по настоящему изобретению представляет собой эмульсию, в частности эмульсию типа"масло в воде", и возможно может содержать другие иммуностимуляторы. В частности, масляная фаза эмульсионной системы содержит метаболизируемое масло, такое как сквален. Значение термина "метаболизируемое масло" известно в данной области техники. "Метаболизируемое" может быть определено как "способное трансформироваться в результате метаболизма" (Dorland's Illustrated Medical Dictionary,W.B. Sanders Company, 25th edition (1974. Масло может представлять собой любое растительное масло,рыбий жир, животное масло или синтетическое масло, не токсичное для реципиента и способное трансформироваться в результате метаболизма. Обычно источниками растительных масел являются орехи,семена и зерно. Синтетические масла могут включать коммерчески доступные масла, такие как NEOBEE и другие. Сквален (2,6,10,15,19,23-гексаметил-2,6,10,14,18,22-тетракозагексаен) представляет собой ненасыщенное масло, которое в больших количествах обнаружено в масле печени акулы и в меньших количествах в оливковом масле, масле зародышей пшеницы, масле рисовых отрубей и в дрожжах и является маслом для использования в этом изобретении. Сквален представляет собой метаболизируемое масло, так как является промежуточным соединением в биосинтезе холестерина (Merck index, 10th Edition, entry no. 8619). Эмульсии типа "масло в воде" сами по себе общеизвестны в данной области и были предложены для использования в адъювантных композициях (ЕР 399843 В). Комбинации эмульсий типа "масло в воде" и другие активные агенты также были описаны как адъюванты для вакцин в WO 95/17210, WO 98/56414, WO 99/12565, WO 99/11241, WO 2006/100109, WO 2006/100110, WO 2006/100111, в которых раскрыты эмульсионные адъюванты на основе сквалена, -токоферола и TWEEN 80, возможно в составе с иммуностимуляторами QS21 и/или 3D-MPL). Были описаны и другие адъюванты в виде эмульсии типа"масло в воде", например адъюванты, раскрытые в WO 90/14837, WO 00/50006, WO 2007/080308, WO 2007/006939, которые все образуют масляные эмульсионные системы (в частности на основе сквалена) для образования альтернативных адъювантов и композиций по настоящему изобретению. Эмульсия типа "масло в воде" по изобретению содержит метаболизируемое нетоксичное масло, такое как сквален, и токол, например токоферол, в частности -токоферол, и эмульгатор (или поверхностно-активное вещество, например неионное поверхностно-активное вещество TWEEN 80 или Polysorbate 80). Токолы (например витамин Е) также часто используются в адъювантах в виде масляных эмульсий(ЕР 0382271 В 1, US 5667784, WO 95/17210). Токолы, используемые в масляных эмульсиях (возможно эмульсиях типа "масло в воде"), по изобретению могут быть приготовлены как описано в ЕР 0382271 В 1,причем токолы могут представлять собой дисперсии капель токола, возможно содержащие эмульгатор,возможно диаметром менее 1 мкм. Альтернативно, токолы можно использовать в комбинации с другим маслом для образования масляной фазы масляной эмульсии. Здесь описаны примеры масляных эмульсий, которые могут быть использованы в комбинации с токолом, например метаболизируемые масла,указанные выше. Способ получения эмульсий типа "масло в воде" известен специалисту в данной области техники. Обычно этот способ включает смешивание масляной фазы с поверхностно-активным веществом, таким как раствор PBS/TWEEN80, и последующую гомогенизацию с использованием гомогенизатора, и специалисту в данной области техники ясно, что для гомогенизации небольших объемов жидкости может быть подходящим способ, включающий двукратное пропускание смеси через иглу шприца. Равным образом, способ эмульгирования в микрофлюидизаторе (аппарат M110S Microfluidics, максимум 50 пропусканий, в течение периода времени 2 мин при максимальном давлении на входе 6 бар (600 кПа) (давление на выходе приблизительно 850 бар (85000 кПа может быть адаптирован специалистом в данной области техники для получения меньших или больших объемов эмульсии. Адаптация может быть достигнута рутинным экспериментированием, включающим проведение измерений образующейся эмульсии до тех пор, пока капли масла в препарате не достигнут требуемого диаметра. В эмульсии типа "масло в воде" масло и эмульгатор должны находиться в водном носителе. Водный носитель может представлять собой, например, забуференный фосфатом физиологический раствор(PBS). Размер капель масла, находящихся в стабильной эмульсии типа "масло в воде", возможно составляет менее 1 мкм, может составлять, по существу, 30-600 нм, возможно, по существу, приблизительно 30500 нм в диаметре и возможно, по существу, 150-500 нм в диаметре, и в частности приблизительно 150 нм в диаметре, измеренном методом фотонкорреляционной спектроскопии. В этом отношении 80% капель масла по количеству должны иметь размер в пределах определенного диапазона возможно более 90% и возможно более 95% капель масла по количеству имеют размер в определенном диапазоне. Предпочтительно указанная эмульсия имеет капли масла по меньшей мере 70% которых, предпочтительно по меньшей мере 80% по интенсивности имеют диаметр менее 1 мкм. Изобретение характеризуется тем, что каждый или все индивидуальные компоненты адъюванта в дозированной форме иммуногенного препарата против гриппа присутствует(ют) на меньшем уровне по сравнению с уровнем, который ранее считался полезным, и типично является таким, как указано выше. Конкретные подходящие дозированные формы содержат указанные ниже компоненты адъюванта в виде эмульсии м/в (масло в воде) в указанных количествах в конечном объеме дозы для человека (предпочтительно приблизительно 0,5 мл или приблизительно 0,7 мл) (табл. 1): Таблица 1 А Конкретные адъюванты в виде эмульсии типа "масло в воде" по изобретению подходящие объемы эмульсии м/в приведены для иллюстрации, а не для ограничения объема изобретения, в скобках указаны подходящие диапазоны (+/- 5%) около вышеуказанного значения. Таблица 1 В Конкретные адъюванты на основе эмульсии типа "масло в воде" по изобретению в скобках указаны подходящие диапазоны (+/- 5%) около вышеуказанного значения. Следует иметь в виду, что все приведенные (например в % или в мг) численные значения, включая значения, приведенные в табл. 1, допускают вариацию 5%, т.е. 4,88 мг сквалена означает 4,64-5,12 мг. Для получения адъювантной вакцины, которая доставляет требуемое количество НА и требуемое количество компонента, представляющего собой адъювант, может быть выполнено предварительное разведение каждого компонента (эмульсия м/в и антиген). В одном из аспектов по изобретению эмульсия м/в адъювантной вакцины по изобретению (независимо от того, разведена она предварительно или нет) может быть добавлена в объеме, не превышающем или предпочтительно менее половины от общего объема дозы. Для иллюстрации подходящие объемы(например в пределах от 125 мкл до 25 мкл) приведены для эмульсионного компонента препаратов А-Н,проиллюстрированных в табл. 1 А. Дозированная форма иммуногенного препарата против гриппа согласно изобретению может быть получена способом, включающим стадию смешивания эмульсии типа "масло в воде" и водной суспензии, содержащей вирус гриппа или его антигенный препарат, где объем водной суспензии больше, чем объем эмульсии. Предпочтительно объем эмульсии м/в получают после разведения концентрированной эмульсии. Альтернативно, для получения дозированной формы иммуногенного препарата против гриппа по изобретению смешивают, по существу, равные объемы (после предварительного разведения или без предварительного разведения) эмульсии м/в и суспензии антигена. Соответственный объем каждого компонента в типичном случае тогда будет в максимальном избытке 10% по сравнению с другим компонентом (т.е. соотношение адъювант в виде эмульсии:суспензия антигена составляет от 1:1,1 до 1,1:1),предпочтительно в максимальном избытке 5% (т.е. соотношение эмульсия м/в:суспензия антигена составляет от 1:1,05 до 1,05:1), предпочтительно в максимальном избытке 2,5% (т.е. соотношение адъювант в виде эмульсии:суспензия антигена составляет от 1:1,025 до 1,025:1). Предпочтительно объем эмульсии м/в получают после разведения концентрированной эмульсии. Во всех способах количества компонентов эмульсии и возможно НА в конечном объеме дозы для человека меньше, чем количества, которые ранее считались полезными, и представляют собой заявленные здесь количества. Предпочтительно они находятся в пределах заявленных здесь конкретных количеств. Количество каждого индивидуального компонента в вакцине может быть выражено в процентах от общей вакцинной композиции, т.е. в % (об./об.) или в % (мас./об.). Следующие переводные численные значения известны специалисту в данной области и могут быть применены: сквален 0,855 г/мл, токоферол 0,949 г/мл, Polysorbat 80 1,080 г/мл и Span 85 0,94 г/мл. В некоторых случаях может быть предпочтительным, чтобы иммуногенные препараты и вакцины по настоящему изобретению дополнительно содержали стабилизатор, например другие эмульгаторы/поверхностно-активные вещества, включая каприловую кислоту (Merck Index 10th Edition, entry no. 1739), например Tricaprylin. При объединении адъюванта в жидкой форме с жидкой формой антигенного препарата адъювантная композиция находится в подходящем объеме дозы для человека, который представляет собой долю предполагаемого конечного объема дозированной формы для применения у человека, например приблизительно половину предполагаемого конечного объема дозированной формы для человека, например объема 360 мкл для предполагаемой дозированной формы для человека 0,7 мл или объема 250 мкл для предполагаемой дозированной формы для человека 0,5 мл. Если доза вакцины для человека увеличивается, то предполагается, что количество (в мг) компонентов адъюванта остается неизменным в результате этого увеличения объема дозы, просто становится более разбавленным. Адъювантная композиция разбавляется, если необходимо, при объединении с антигенной композицией с получением конечной дозы вакцины для людей. Разумеется, конечный объем такой дозы будет варьировать в зависимости от исходного объема адъювантной композиции и объема антигенного препарата, добавляемого к адъювантной композиции. В альтернативном воплощении жидкий адъювант используют для разведения лиофилизированного антигенного препарата. В этом воплощении подходящий объем дозы для человека адъювантной композиции приблизительно равен конечному объему дозированной формы для человека. Жидкую адъювантную композицию добавляют во флакон, содержащий лиофилизированный антигенный препарат. Конечная дозированная форма для человека может варьировать в пределах от 0,5 до 1,5 мл. В конкретном воплощении дозированная форма для человека приблизительно составляет 0,5 мл или приблизительно 0,7 мл. Возможно, соотношение масло (например, сквален):токол (например, -токоферол) равно или меньше 1, поскольку это обеспечивает более стабильную эмульсию. В некоторых случаях может быть предпочтительным, чтобы вакцины по настоящему изобретению дополнительно содержали стабилизатор. Доза компонентов, в которой адъювант функционирует в дозированной форме иммуногенного препарата, предпочтительно способна усиливать иммунный ответ на антиген у человека. В частности, подходящим количеством сквалена, токола и полиоксиэтиленсорбитана моноолеата является такое количество, которое повышает иммунологический потенциал препарата по сравнению с препаратом без адъюванта, или такое количество, которое дает иммунологический потенциал, сходный с потенциалом, дости- 11024250 гаемым при использовании препарата с адъювантом, содержащим иное, более высокое количество указанных компонентов, в целевой популяции людей, и в то же время является приемлемым исходя из профиля реактогенности. Возможные иммуностимуляторы. В конкретном воплощении изобретения адъювант представляет собой адъювант в виде эмульсии типа "масло в воде", содержащий метаболизируемое масло, такое как сквален, токол, такой как токоферол, и поверхностно-активное вещество, такое как Polysorbat 80, в указанных выше количествах,но не содержащий никакого(их) дополнительного(ых) иммуностимулятора(ов), в частности не содержащий нетоксичное производное липида А (такое как 3D-MPL) или сапонин (такой как QS21). В еще одном воплощении изобретения предложена дозированная форма иммуногенного препарата,содержащая антиген или антигенную композицию и адъювантную композицию, представляющую собой эмульсию типа "масло в воде" и возможно содержащую один или более дополнительных иммуностимуляторов. В конкретном воплощении адъювант в виде эмульсии типа "масло в воде" возможно содержит один или более чем один дополнительный адъювант или иммуностимулятор, отличающийся от QS21 и/илиMPL. В еще одном конкретном воплощении адъювант в виде эмульсии типа "масло в воде" и иммуногенный препарат дополнительно содержат дополнительный иммуностимулятор, который представляет собой липополисахарид, предпочтительно нетоксичное производное липида А, в частности монофосфориллипид А или, еще более конкретно, 3-деацилированный монофосфориллипид A (3D-MPL). 3D-MPL продается под названием MPL компанией GlaxoSmithKline Biologicals N.A. и упоминается в этом документе как MPL или 3D-MPL (см., например, патенты США 4436727, 4877611, 4866034 и 4912094). 3D-MPL прежде всего промотирует CD4+ Т-клеточные ответы с фенотипом IFN- (интерферон гамма)(Th1). 3D-MPL может быть получен способами, раскрытыми в GB 2220211 А. Химически он представляет собой смесь 3-деацилированного монофосфориллипида А с 3, 4, 5 или 6 ацилированными цепями. В композициях по настоящему изобретению может быть использован 3D-MPL с небольшим размером частиц. 3D-MPL с небольшим размером частиц имеет такой размер частиц, что он может быть подвергнут стерильной фильтрации через 0,22 мкм фильтр. Такие препараты описаны в WO 94/21292. Указанный липополисахарид, такой как 3D-MPL, может быть использован в количествах от 1 до 50 мкг на дозированную форму иммуногенного препарата для человека. Такой 3D-MPL может быть использован в количестве приблизительно 25 мкг, например 20-30 мкг, предпочтительно 21-29 мкг, или от 22 до 28 мкг, или от 23 до 27 мкг, или от 24 до 26 мкг, или 25 мкг. В еще одном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека содержит 3D-MPL в количестве приблизительно 10 мкг,например от 5 до 15 мкг, предпочтительно от 6 до 14 мкг, например от 7 до 13 мкг, или от 8 до 12 мкг,или от 9 до 11 мкг, или 10 мкг. В еще одном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека содержит 3D-MPL в количестве приблизительно 5 мкг, например от 1 до 9 мкг, или от 2 до 8 мкг, или предпочтительно от 3 до 7 мкг, или 4 и 6 мкг, или 5 мкг. В еще одном воплощении в качестве возможного дополнительного иммуностимулятора используют синтетические производные липида А, некоторые из которых известны как агонисты TLR-4 (Tollподобного рецептора), и они включают ОМ 174 (2-дезокси-6-о-[2-дезокси-2-[(R)-3-додеканоилокситетра-деканоиламино]-4-о-фосфоно-(D-глюкопиранозил]-2-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]D-глюкопиранозилдигидрофосфат) (WO 95/14026),ОМ 294(3S,9R)-3-[(R)-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9(R)-[(R)-3 гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол, 1,10-бис(дигидрофосфат) (WO 99/64301 и WO 00/0462),ОМ 197 МР-Ас DP (3S,9R)-3-[(R)-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3 гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол, 1 -дигидрофосфат 10-(6-аминогексаноат) (WO 01/46127),но ими не ограничиваются. Другие лиганды TLR4, которые могут быть использованы, представляют собой алкилглюкозаминидфосфаты (AGP), например раскрытые в WO 9850399 или US 6303347 (также раскрыты способы получения AGP), предпочтительно RC527 или RC529 или фармацевтически приемлемые соли AGP, раскрытые в US 6764840. Некоторые AGP являются агонистами TLR4, а некоторые являются антагонистамиTLR4. Полагают, что оба полезны в качестве адъювантов. Другими подходящими лигандами TLR-4, способными вызывать сигнальный ответ через TLR-4(Sabroe et al, JI 2003, p. 1630-5), являются, например, липополисахарид грамотрицательных бактерий и его производные или его фрагменты, в частности нетоксичное производное липополисахарида (LPS) (такое как 3D-MPL). Другими подходящими агонистами TLR являются: белок теплового шока (HSP) 10, 60,65, 70, 75 или 90, поверхностно-активный белок А, гиалуронановые олигосахариды, фрагменты гепарансульфата, фрагменты фибронектина, фибриногеновые пептиды и b-дефенсин-2, мурамилдипептид (MDP) или белок F респираторно-синцитиального вируса. В одном из воплощений агонист TLR представляет собой HSP 60, 70 или 90. Другие подходящие лиганды TLR-4 описаны в WO 2003/011223 и в WO 2003/099195, такие как соединения I, II и III, раскрытые на страницах 4 и 5 WO 2003/011223 или на страницах 3 и 4 WO 2003/099195, и в частности те соединения, которые раскрыты в WO 2003/011223 как ER 803022, ER 803058, ER 803732, ER 804053, ER 804057, ER 804058, ER 804059, ER 804442, ER 804680 иER 804764. Предпочтительно указанный лиганд TLR-4 представляет собой ER 804057.Toll-подобные рецепторы (TLR) представляют собой трансмембранные рецепторы типа I, эволюционно консервативные между насекомыми и людьми. До настоящего времени установлены десять TLR(TLR 1-10) (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). Члены семейства TLR обладают схожими внеклеточными и внутриклеточными доменами. Было показано, что их внеклеточные домены имеют богатые лейцином повторяющиеся последовательности, а их внутриклеточные домены подобны внутриклеточной области интерлейкинового рецептора 1 (IL-1R). TLR-клетки экспрессируются дифференциально среди иммунных клеток и других клеток (включая клетки сосудистого эпителия, адипоциты, сердечные миоциты и клетки кишечного эпителия). Внутриклеточный домен TLR может взаимодействовать с адаптерным белкомMyd88, который также имеет домен IL-1R в своей цитоплазматической области, приводя к NF- В активации цитокинов. Этот Myd88-путь представляет собой один из путей, по которому на высвобождение цитокинов влияет активация TLR. Основная экспрессия TLR осуществляется в типах клеток, таких как антигенпрезентирующие клетки (например, дендритные клетки, макрофаги и т.д.). Активация дендритных клеток путем стимуляции через TLR приводит к созреванию дендритных клеток и продуцированию воспалительных цитокинов, таких как IL-12. Проведенные до настоящего времени исследования выявили, что TLR распознает разные типы агонистов, хотя некоторые агонисты являются общими для нескольких TLR. Агонисты TLR преимущественно имеют происхождение из бактерий или вирусов и включают молекулы, такие как флагеллин или бактериальный липополисахарид(LPS). Под "агонистом TLR" подразумевается компонент, который способен вызывать сигнальный ответ через TLR сигнальный путь либо как прямой лиганд, либо опосредованно через образование эндогенного или экзогенного лиганда (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). В еще одном воплощении другие природные или синтетические агонисты молекул TLR используются в качестве возможных дополнительных иммуностимуляторов. Они могут включать агонисты TLR2,TLR3, TLR7, TLR8 и TLR9, но не ограничиваются ими. Соответственно в одном из воплощений адъювант и иммуногенный препарат дополнительно содержат дополнительный иммуностимулятор, который выбран из группы, состоящей из агониста TLR-1,агониста TLR-2, агониста TLR-3, агониста TLR-4, агониста TLR-5, агониста TLR-6, агониста TLR-7, агониста TLR-8, агониста TLR-9 или их комбинации. В одном из воплощений настоящего изобретения используют агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-1 (Sabroe et al., JI 2003 р 1630-5). Предпочтительно агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-1, выбран из три-ацилированных липопептидов (LP), растворимого в феноле модулина, Mycobacterium tuberculosis LP, S-(2,3-бис(пальмитоилокси)-(2-RS)-пропил)-Nпальмитоил-(R)-Cys-(S)-Ser-(S)-Lys(4)-OH, тригидрохлорида (Pam3Cys) LP, который имитирует ацетилированный аминоконец бактериального липопротеина и OspA LP из Borrelia burgdorfei. В альтернативном воплощении используют агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-2 (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). Предпочтительно агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-2, представляет собой один или более чем один из следующих: липопротеин,петидогликан, бактериальный липопептид М tuberculosis, В burgdorferi, T pallidum; пептидогликаны видов, включающих Staphylococcus aureus; липотейхоевые кислоты, маннуроновые кислоты, порины Neisseria, бактериальные пилусы, факторы вирулентности иерсинии, вирионы CMV (цитомегаловируса), коревой гемагглютинин и зимозан из дрожжей. В альтернативном воплощении используют агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-3 (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). Предпочтительно агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-3, представляет собой двухцепочечную РНК (dsRNA) или полиинозиновуюполицитидиловую кислоту (Poly IC), молекулярный паттерн нуклеиновой кислоты, ассоциирующийся с вирусной инфекцией. В альтернативном воплощении используют агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-5 (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). Предпочтительно агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-5, представляет собой бактериальный флагеллин. В альтернативном воплощении используют агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-6 (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). Предпочтительно агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-6, представляет собой микобактериальный липопротеин, ди-ацилированный LP и растворимый в феноле модулин. Агонисты TLR6 описаны также в WO 2003043572. В альтернативном воплощении используют агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-7 (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). Предпочтительно агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-7, представляет собой одноцепочечную RNA (ssRNA), локсорибин, гуанозиновый аналог в позициях N7 и С 8, или имидазохинолиновое соединение, или его производное. В одном из воплощений агонист TLR представляет собой имиквимод. Агонисты TLR7 описаны также в WO 02085905. В альтернативном воплощении используют агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-8 (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). Предпочтительно агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-8, представляет собой одноцепочечную RNA (ssRNA), имидазохинолиновую молекулу, обладающую противовирусной активностью, например резиквимод (R848); резиквимод также способен распознаваться TLR-7. Другие агонисты TLR-8, которые могут быть использованы, описаны вWO 2004071459. В альтернативном воплощении используют агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-9 (Sabroe et al., JI 2003, p. 1630-5). В одном из воплощений агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-9, представляет собой HSP90. Альтернативно, агонист TLR, способный вызывать сигнальный ответ через TLR-9, представляет собой бактериальную или вирусную ДНК, ДНК,содержащую неметилированные CpG нуклеотиды, в частности контексты последовательности, известные как мотивы CpG. CpG-содержащие олигонуклеотиды вызывают преимущественно Th1 ответ. Такие олигонуклеотиды общеизвестны и описаны, например, в WO 96/02555, WO 99/33488 и в патентах США 6008200 и 5856462. Предпочтительно CpG нуклеотиды представляют собой CpG олигонуклеотиды. Подходящие олигонуклеотиды для использования в иммуногенных композициях по настоящему изобретению представляют собой CpG-содержащие олигонуклеотиды, возможно содержащие два или более динуклеотидных мотивов CpG, разделенных по меньшей мере тремя, предпочтительно по меньшей мере шестью или более нуклеотидами. Мотив CpG представляет собой нуклеотид цитозин, за которым следует нуклеотид гуанин. CpG олигонуклеотиды по настоящему изобретению типично представляют собой дезоксинуклеотиды. В конкретном воплощении промежуточный нуклеотид в олигонуклеотиде представляет собой фосфородитиоат или предпочтительно фосфоротиоатную связь, хотя фосфодиэфирные и другие межнуклеотидные связи входят в объем изобретения. Также в объем изобретения входят олигонуклеотиды со смешанными межнуклеотидными связями. Способы продуцирования фосфоротиоатных олигонуклеотидов или фосфородитиоата описаны в US 5666153, US 5278302 и WO 95/26204. Примеры предпочтительных олигонуклеотидов имеют приведенные ниже последовательности, и эти последовательности могут содержать фосфоротиоатные модифицированные межнуклеотидные связи Предпочтительно используют фосфоротиоатный скелет CpG7909 (SEQ ID NO:4). АльтернативныеCpG олигонуклеотиды могут содержать последовательности, указанные выше, при том, что они имеют несущественные делеции или добавления. CpG Олигонуклеотиды, используемые в настоящем изобретении, могут быть синтезированы любым способом, известным в данной области (см., например, ЕР 468520). Такие олигонуклеотиды удобно синтезировать с использованием автоматического синтезатора. В изобретении раскрыты также адъювант и иммуногенный препарат, которые дополнительно содержат адъювант сапонин. Особенно подходящим сапонином для использования в настоящем изобретении является Quil A, a также его производные. Quil А представляет собой препарат сапонина, выделенного из южно-американского дерева Quillaja saponaria molina, и впервые он был описан Dalsgaard et al. в 1974 г. ("Saponin adjuvants", Archiv. fur die gesamte Virusforschung, Vol. 44, Springer Verlag, Berlin, p. 243254) как обладающий адъювантной активностью. Очищенные фрагменты Quil А были выделены методом HPLC (высокоэффективная жидкостная хроматография), позволяющим сохранять адъювантную активность без токсичности, ассоциированной с Quil А (ЕР 0362278), например QS7 и QS21 (также известные как QA7 и QA21). QS-21 является природным сапонином, получаемым из коры Quillaja saponarialgG2a-антительный ответ, и является предпочтительным сапонином в контексте настоящего изобретения. В подходящей форме настоящего изобретения сапониновый адъювант в иммуногенном препарате представляет собой производное Saponaria molina quil А, такое как иммунологически активная фракция Quil А, например QS-17 или QS-21, предпочтительно QS-21. В одном из воплощений дозированная форма по изобретению содержат иммунологически активную фракцию сапонина, по существу, в чистой форме. В одном из воплощений композиции по изобретению содержат QS21, по существу, в чистой форме, то естьQS21 с чистотой по меньшей мере 90%, например по меньшей мере 95% или по меньшей мере 98%. Другие полезные сапонины получают из растений Aesculus hippocastanum или Gyophilla struthium. Другие сапонины, которые описаны в литературе, включают эсцин, который описан в Merck Index (12thed: entry 3737), в виде смеси сапонинов, присутствующей в семени конского каштана, Lat: Aesculus hippocastanum. Описано его выделение хроматографией и очисткой (Fiedler, Arzneimittel-Forsch. 4, 213(1953 и с использованием ионообменных смол (Erbring et al., US 3238190). Фракции эсцина были очищены, и было показано, что они являются биологически активными (Yoshikawa M, et al. (Chem PharmPharm.Belg., 42, 213-226) также представляет собой один из вариантов. Указанный иммунологически активный сапонин, такой как QS21, может быть использован в количествах от 1 до 50 мкг на дозированную форму иммуногенного препарата для человека. Предпочтительно QS21 используют в количестве приблизительно 25 мкг, например 20-30 мкг, предпочтительно 21-29 мкг, или 22-28 мкг, или 23-27 мкг, или 24-26 мкг, или 25 мкг. В еще одном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека содержит QS21 в количестве приблизительно 10 мкг, например от 5 до 15 мкг, предпочтительно 6-14 мкг, например 7-13 мкг, или 8-12 мкг, или 9-11 мкг, или 10 мкг. В дополнительном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека содержит QS21 в количестве приблизительно 5 мкг, например 1 -9 мкг, или 2-8 мкг, или предпочтительно 3-7 мкг, или 4-6 мкг, или 5 мкг. Доза 3D-MPL и/или QS21 предпочтительно способна усиливать иммунный ответ у человека на антиген. В частности, подходящее количество 3D-MPL и/или QS21 представляет собой такое количество,которое повышает иммунологический потенциал препарата по сравнению с препаратом без адъюванта или по сравнению с препаратом, адъювантированным другим количеством 3D-MPL или QS21, и в то же время остается приемлемым исходя из профиля реактогенности. Обычно для введения человеку сапонин(например QS21) и/или производное LPS (например 3D-MPL) присутствует в дозированной форме иммуногенного препарата человека в пределах от 1 до 200 мкг, например от 10 до 50 мкг или от 1 до 25 мкг на дозу. В изобретении раскрыт адъювант и иммуногенные препараты, которые содержат сапонин (например, QS21) и/или производное LPS (например, 3D-MPL) в описанной выше масляной эмульсии вместе со стеролом (например, холестерином). Эти стеролы общеизвестны в данной области. Например, холестерин раскрыт в Merck Index, 11th Edn., page 341 как природный стерол, содержащийся в животном жире. Дополнительно, масляная эмульсия (в частности эмульсия типа "масло в воде") может содержать Span 85, и/или лецитин, и/или трикаприлин. Адъюванты, содержащие эмульсию типа "масло в воде", стерол и сапонин, описаны в WO 99/12565. Примеры дополнительных иммуностимуляторов описаны здесь и вPowell, M.F., and Newman, M.J., Plenum Press, New York and London, ISBN 0-306-44867-X. Если в состав препарата включены сквален и сапонин (возможно QS21), то лучше также включать в состав препарата стерол (возможно холестерин), поскольку это дает возможность снизить общий уровень масла в эмульсии. Это приводит к снижению стоимости производства, улучшению общего комфорта вакцинации, а также к качественному и количественному улучшению результирующих иммунных ответов, таких как повышенное продуцирование IFN-. Соответственно адъювантная система по настоящему изобретению обычно содержит метаболизируемое масло и сапонин в соотношении метаболизируемое масло:сапонин (мас./мас.) в диапазоне от 200:1 до 300:1, и настоящее изобретение также можно использовать в форме с "низким содержанием масла", возможный диапазон в которой составляет от 1:1 до 200:1, возможно от 20:1 до 100:1 или, по существу, 48:1, и эта вакцина сохраняет полезные адъювантные свойства всех компонентов при значительно уменьшенном профиле реактогенности. Соответственно некоторые воплощения имеют соотношение сквален:QS21 (мас./мас.) в диапазоне от 1:1 до 250:1, или от 20:1 до 200:1, или от 20:1 до 100:1, или, по существу, 48:1. Возможно, стерол (например, холестерин) также присутствует в соотношении сапонин:стерол, как описано здесь. Адъюванты, в которые возможно включен дополнительный иммуностимулятор, являются особенно подходящими для вакцинных препаратов, предназначенных для детей и/или пожилых людей. Таким образом, в настоящем изобретении раскрыт адъювант в виде эмульсии типа "масло в воде",который возможно может дополнительно содержать 5-60, 10-50 или 20-30 мкг (например, 5-15, 40-50, 10,20, 30, 40 или 50 мкг) производного липида А (например, 3D-MPL). Адъювант в виде эмульсии типа"масло в воде" возможно может содержать 0,025-2,5, 0,05-1,5, 0,075-0,75, 0,1-0,3 или 0,125-0,25 мг (например, 0,2-0,3, 0,1-0,15, 0,25 или 0,125 мг) стерола (например, холестерина), 1-60, 10-50 или 20-30 мкг(например, 1-10, 5-15, 40-50, 10, 20, 30, 40 или 50 мкг) производного липида А (например, 3D-MPL или любого синтетического производного липида А) и 1-60, 10-50 или 20-30 мкг (например, 1-10, 5-15, 40-50,10, 20, 30, 40 или 50 мкг) сапонина (например, QS21). Штаммы вируса гриппа и антигены вируса гриппа, режимы вакцинации, введение доз и критерии эффективности. Указанный вирус гриппа или его антигенный препарат может быть продуцирован на яйце или на культуре клеток. Например, антиген вируса гриппа или антигенные препараты по изобретению могут быть получены стандартным способом с использованием оплодотворенных яиц путем выращивания вируса гриппа в яйцах и очистки собранной аллантоисной жидкости. Яйца могут быть аккумулированы в больших количествах за короткий срок. Альтернативно, они могут быть получены любым из способов нового поколения с использованием клетки или клеточной культуры для выращивания вируса или для экспрессии рекомбинантных поверхностных антигенов вируса гриппа. Подходящие клеточные субстраты для выращивания данного вируса включают, например, клетки почки собаки, такие как MDCK, или клетки из клона MDCK, MDCK-подобные клетки, клетки почки обезьяны, такие как клетки AGMK,включая клетки Vero, подходящие клеточные линии свиньи или любой другой тип клеток млекопитаю- 15024250 щих, подходящий для продуцирования вируса гриппа с целью получения вакцины. Подходящие клеточные субстраты также включают человеческие клетки, например клетки MRC-5, или клеточную линиюPer.C6. Подходящие клеточные субстраты не ограничиваются линиями клеток. Например, они также включают первичные клетки, такие как фибробласты куриного эмбриона, или линии клеток птиц, такие как линии клеток цыпленка или утки (например, линию клеток ЕВх, такую как ЕВ 14 или ЕВ 24, из эмбриональных стволовых клеток цыпленка или утки соответственно). Подходящими клетками насекомых являются клетки Sf9 или Hi5. В одном воплощении вирус гриппа или его антигенный препарат для применения по настоящему изобретению может представлять собой расщепленный вирус гриппа или антигенный препарат расщепленного вируса. В альтернативном воплощении противогриппозный препарат может содержать антиген инактивированного вируса гриппа другого типа, например инактивированный цельный вирус или очищенные НА и NA (субъединичная вакцина) или виросому гриппа. В еще одном дополнительном воплощении вирус гриппа может представлять собой живой аттенуированный противогриппозный препарат. Расщепленный вирус гриппа или антигенный препарат расщепленного вируса для применения по настоящему изобретению предпочтительно представляет собой препарат инактивированного вируса, где вирусные частицы расщеплены детергентами или другими реагентами для солюбилизации липидной оболочки. Расщепленный вирус или антигенные препараты расщепленного вируса предпочтительно получают путем фрагментации цельного вируса гриппа, либо инфекционного, либо инактивированного,органическими растворителями или детергентами в солюбилизирующих концентрациях и последующим удалением всего или большей части солюбилизирующего агента и некоторой или большей части вирусного липидного вещества. Под антигенным препаратом расщепленного вируса подразумевается препарат расщепленного вируса, который возможно был подвергнут очистке до некоторой степени по сравнению с расщепленным вирусом с сохранением большей части антигенных свойств компонентов расщепленного вируса. Например, при продуцировании в яйцах расщепленный вирус может быть очищен от загрязняющих белков яйца или при продуцировании в культуре клеток расщепленный вирус может быть очищен от загрязняющих веществ клеток-хозяев. Антигенный препарат расщепленного вируса может содержать антигенные компоненты расщепленного вируса из более чем одного вирусного штамма. Вакцины, содержащие расщепленный вирус (называемые "сплит-вакциной против гриппа"), или антигенные препараты расщепленного вируса обычно содержат остаточный матриксный белок и нуклеопротеин и иногда липид, а также мембранные оболочечные белки. Такие сплит-вирусные вакцины обычно будут содержать большую часть или все структурные белки вируса, хотя не обязательно в таких же соотношениях, в которых они присутствуют в цельном вирусе. Примерами коммерчески доступных расщепленных вакцин являются, например, FLUARIX, FIUSHIELD или FLUZONE. Альтернативно, вирус гриппа может быть в форме цельновирусной вакцины. Эта вакцина может иметь преимущество по сравнению со сплит-вирусной вакциной в пандемической ситуации, так как это исключает неопределенность относительно того, можно ли успешно получить сплит-вирусую вакцину для нового штамма вируса гриппа. Для некоторых штаммов традиционные детергенты, используемые для продуцирования расщепленного вируса, могут повреждать вирус и делать его непригодным для применения. Несмотря на то что всегда существует возможность использования других детергентов и/или разработки другого способа получения сплит-вакцины, это потребовало бы времени, которого может не быть в пандемической ситуации. Помимо большей степени определенности при цельновирусном подходе имеет место также более высокая мощность производства вакцины, чем для расщепленного вируса,поскольку во время дополнительных стадий очистки, необходимых для получения подходящей сплитвакцины, теряются значительные количества антигена. В другом воплощении препарат вируса гриппа находится в форме очищенной субъединичной вакцины против гриппа. Субъединичные вакцины против гриппа обычно содержат два главных оболочечных белка, НА и NA, и могут иметь дополнительное преимущество над цельновирионными вакцинами,так как они обычно являются менее реактогенными, особенно у молодых вакцинируемых субъектов. Субъединичные вакцины могут быть получены либо рекомбинантно, либо могут быть очищены из расщепленных вирусных частиц. Примерами коммерчески доступных субъединичных вакцин являются,например, AGRIPPAL или FLUVIRIN. В конкретном воплощении субъединичные вакциныполучают по меньшей мере из одного основного оболочечного компонента, например из гемагглютинина (НА),нейраминидазы (NA) или М 2, предпочтительно из НА. Предпочтительно они содержат комбинации двух или более антигенов, например комбинацию по меньшей мере двух структурных белков вируса гриппа НА, NA, Matrix 1 (М 1) и М 2, предпочтительно комбинацию НА и NA, возможно содержащую М 1. Предпочтительно компоненты вакцины против гриппа получают методом рекомбинантных ДНК, т.е. в результате манипуляций с рекомбинантной ДНК, или экспрессируются из нуклеиновой кислоты, являющейся результатом манипуляций с рекомбинантной ДНК, включая живой рекомбинантный вектор (коровья оспа) или рекомбинантный субъединичный белок (бакуловирус/клетки насекомых, клетки млекопитающих, клетки птиц, дрожжи, растения или бактерии). Подходящими клетками насекомых являются клетки Spodoptera frugiperda (Sf9) или клетки насекомых High Five (Hi5), созданные из Trichoplusia ni(Invitrogen), и подходящим бакуловирусом является вирус ядерного полиэдроза Autographa californica(AcNPV) (Baculogold, Becton Dickinson, PharMingen) или так называемая система Bacmid. В одном из воплощений препарат вируса гриппа находится в форме виросомы. Виросомы представляют собой сферические однослойные везикулы, которые сохраняют функциональные гликопротеины НА и NA вирусной оболочки в аутентичной конформации, включенные в двухслойную фосфолипидную мембрану виросом. Примерами коммерчески доступных виросомальных вакцин являются, например, INFLEXALV или INVAVAC В еще одном воплощении субъединичные компоненты вируса гриппа экспрессируются в форме вирусоподобных частиц (VLP) или капсомеров, предпочтительно VLP, получаемых из растений или клеток насекомых. VLP презентируют антигены в их нативной форме. Технология субъединичных VLP может быть полностью основана на белках вируса гриппа или может быть основана на другом вирусе, таком как вирус мышиной лейкемии (MLV), и поэтому может содержать антиген, не являющийся антигеном вируса гриппа, такой как белок MLV gag. Подходящий VLP содержит по меньшей мере один, предпочтительно по меньшей мере два белка вируса гриппа возможно с другими белками вируса гриппа или белками, не являющимися белками вируса гриппа, например М 1 и НА, НА и NA, НА, NA и М 1 или НА, NA и MLV gag. Он может продуцироваться либо в клетках растений, либо в клетках насекомых. VLP также могут нести антигены из более чем одного штамма вируса гриппа, например VLP, полученные к примеру из двух сезонных штаммов (например H1N1 и H3N2) или из одного сезонного и одного пандемического штамма (например H3N2 и H5N1). Соответственно в одном из воплощений иммуногенный препарат по изобретению содержит антиген вируса гриппа или его антигенный препарат из вируса гриппа, выращенного на яйцах или на клеточной культуре. В еще одном воплощении указанный антиген вируса гриппа или его антигенный препарат содержит цельный вирус, расщепленный вирус, виросому или один или более чем один очищенный антиген, выбранный из НА, NA, М 1, М 2. В еще одном воплощении указанный(е) очищенный(е) антиген(ы) получают из вируса гриппа, выращенного в клетках млекопитающих, птиц или насекомых. Конкретно,указанный(е) очищенный(е) антиген(ы) продуцируют рекомбинантно. Они могут находиться в форме вирусоподобной частицы. Антиген вируса гриппа или его антигенный препарат могут быть получены любым из множества промышленных способов, например способом с использованием расщепленного вируса гриппа, описанного в патентах DD 300833 и DD 211444, которые включены в данное описание посредством ссылки. Традиционно расщепленный вирус гриппа получают, используя обработку растворителем/детергентом,таким как три-н-бутилфосфат или диэтиловый эфир в комбинации с Tween (известную как "Tweenэфирное" расщепление), и этот способ до сих пор используется на некоторых промышленных предприятиях. Другие используемые в настоящее время расщепляющие агенты включают детергенты, или протеолитические ферменты, или соли желчной кислоты, например дезоксихолат натрия, как описано в патенте DD 155875, который включен в данное описание посредством ссылки. Детергенты, которые могут быть использованы в качестве расщепляющих агентов, включают катионные детергенты,например цетилтриметиламмония бромид (СТАВ), другие ионные детергенты, например лаурилсульфат,тауродезоксихолат, или неионные детергенты, такие как детергенты, описанные выше, включая Triton X100 (например, в способе, описанном в Una et at., 2000, Biologicals 28, 95-103) и Triton N-101, или комбинации любых двух или более детергентов. Способ изготовления сплит-вакцины может включать целый ряд различных стадий фильтрации и/или других стадий разделения, например стадии ультрацентрифугирования, ультрафильтрации, зонального центрифугирования и хроматографии (например, ионообменной) в различных комбинациях и возможно стадию инактивирования, например, нагреванием, формальдегидом или р-пропиолактоном или УФ (ультрафиолетом), которые можно проводить до или после расщепления. Способ расщепления может быть осуществлен как периодический, непрерывный или полунепрерывный процесс. Подходящий способ расщепления и очистки для сплит-иммуногенной композиции описан в WO 02/097072. Подходящие антигенные препараты сплит-вакцины против гриппа по изобретению содержат остаточное количество Tween 80 и/или Triton X-100, оставшихся после осуществления процесса получения,хотя их можно добавлять, или их концентрации можно довести до нужного значения после получения расщепленного антигена. В одном воплощении присутствуют и Tween 80, и Triton X-100. Предпочтительными диапазонами конечных концентраций этих неионных поверхностно-активных веществ в дозе вакцины, обусловленной антигенным препаратом, являются:Tween 80 от 0,01 до 1% или приблизительно 0,1% (об./об.),Triton X-100 от 0,001 до 0,1% (мас./об.) или от 0,005 до 0,02% (мас./об.). В конкретном воплощении конечная концентрация Tween 80, обусловленная антигенным препаратом, варьирует в пределах от 0,025 до 0,09% (мас./об.). В другом конкретном воплощении предусмотрен антиген в виде 2-кратной концентрированной смеси, в которой концентрация Tween 80 составляет от 0,025 до 0,2% (мас./об.), и которая нужно разбавлять в два раза при окончательном приготовлении препарата с адъювантом (или буфером в контрольном препарате). В другом конкретном воплощении конечная концентрация Triton X-100 варьирует в пределах от 0,005 до 0,017% (мас./об.). В другом конкретном воплощении антиген присутствует в виде 2-кратной концентрированной смеси, которая имеет концентрацию Triton X-100, варьирующую в пределах от 0,005 до 0,034% (мас./об.), и которая должна быть разбавлена в два раза при приготовлении конечного препарата с адъювантом (или с буфером в контрольном препарате). В одном из воплощений получают препарат вируса гриппа, в котором тиомерсал присутствует на низком уровне или в котором тиомерсал отсутствует. В другом воплощении полученный препарат вируса гриппа является стабильным в отсутствие ртутьорганических консервантов. В частности, данный препарат не содержит остаточный тиомерсал. В частности, препарат вируса гриппа содержит антиген гемагглютинин, стабилизированный в отсутствие тиомерсала или при низких уровнях тиомерсала (обычно 5 мкг/мл или менее). Конкретно, стабилизацию штамма гриппа В осуществляют производным токоферола, таким как сукцинат -токоферола (также известный как сукцинат витамина Е, т.е. VES). Такие препараты и способы их получения раскрыты в WO 02/097072. Предпочтительный препарат содержит три инактивированных антигена расщепленного вириона,полученных из штаммов гриппа соответствующего сезона, рекомендованных Всемирной организацией здравоохранения (WHO). В одном из воплощений вирус гриппа или его антигенный препарат и адъювант по изобретению содержатся в одном и том же контейнере. Это называется "в одном флаконе". В еще одном воплощении флакон представляет собой предварительно заполненный шприц. В альтернативном воплощении вирус гриппа или его антигенный препарат и адъювант по изобретению содержатся в отдельных контейнерах или флаконах и смешиваются непосредственно перед или при введении субъекту. Это называется "в двух флаконах". Предпочтительно 2-компонентная вакцина состоит из 0,5 мл концентрированных антигенов инактивированного расщепленного вириона, находящегося в стеклянном флаконе типа I (контейнер с антигеном), и предварительно заполненного стеклянного шприца типа I, содержащего 0,5 мл адъюванта(контейнер с адъювантом). Альтернативно, вакцина представляет собой двухкомпонентную вакцину,находящуюся в 2 флаконах (один для антигена, один для адъюванта, по 10 доз в каждом) для смешивания перед введением первому пациенту в течение 24 ч при комнатной температуре и последующего хранения при 4 С в течение короткого периода времени (например до одной недели) для последующего введения. В момент инъекции содержимое многодозового флакона или шприца, содержащего адъювант,впрыскивают во флакон, содержащий концентрированный антиген расщепленного вириона. После смешивания содержимое отбирают в шприц и иглу меняют на внутримышечную иглу. Одна доза разведенной адъювантной вакцины-кандидата против гриппа соответствует 0,5 мл. В одном из воплощений каждая доза иммуногенного препарата для человека содержит 15 мкг НА на штамм вируса гриппа на дозу, как определено методом SRID (одномерная радиальная иммунодиффузия). Это особенно подходит для пожилого населения. Важным аспектом настоящего изобретения является то, что антиген(ы) вируса гриппа может(гут) быть использован(ы) в меньших количествах по сравнению с количествами, которые ранее считались полезными, предпочтительно на уровне менее 15 мкг НА на штамм вируса, например от 1 до 10 мкг НА на штамм на дозу иммуногенного препарата для человека. Соответственно в одном из воплощений каждая доза иммуногенного препарата для человека содержит небольшую дозу гемагглютинина (НА), определяемую как количество менее 15 мкг НА на дозу,предпочтительно менее 10 мкг по результатам измерения методом одномерной радиальной иммунодиффузии (SRD) (J.M. Wood et al.: J. Biol. Stand. 5 (1977) 237-247; J. M. Wood et al., J. Biol. Stand. 9 (1981) 317-330). В конкретном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека содержит дозу гемагглютинина (НА) на штамм на уровне приблизительно 10 мкг, например от 5 до 15 мкг,предпочтительно от 6 до 14 мкг, например от 7 до 13 мкг ,или от 8 до 12 мкг, или от 9 до 11 мкг, или 10 мкг. В дополнительном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека содержит дозу гемагглютинина (НА) на штамм на уровне приблизительно 5 мкг, например от 1 до 9 мкг, или от 2 до 8 мкг, или предпочтительно от 3 до 7 мкг, или 4 и 6 мкг, или 5 мкг. Подходящие количества составляют 1,9, 2,5, 3,8, 5,0, 7,5, или 10 мкг НА, или любое подходящее количество НА, менее 15 мкг, которое определяется исходя из условия, что вакцинная композиция удовлетворяет критериям эффективности, которые сформулированы здесь. Предпочтительно может быть использована доза НА 1 мкг или еще меньшая, такая как 0,5 мкг НА, которая соответствует нормативным критериям, указанным в табл. 2. Подходящим количеством НА являются, например 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 мкг (мас./об.) на штамм вируса гриппа на дозу иммуногенной композиции для человека. Указанное небольшое количество НА может быть настолько малым, насколько оно может быть практически осуществимым при условии, что дает возможность изготавливать вакцину, которая удовлетворяет международным критериям эффективности, например критериям эффективности Европейского союза (EU) или Управление по контролю за качеством пищевых продуктов, медикаментов и косметических средств США (FDA), которые подробно изложены ниже (см. табл. 2 и указанные конкретные параметры). Предпочтительно использовать дозу вакцины 0,5 мл. Подходящей также является доза вакцины 1 мл (препарат, содержащий 0,5 мл адъюванта плюс 0,5 мл антигена). Предпочтительно доза вакцины по изобретению, в частности вакцина с низким содержанием НА, может быть предоставлена в меньшем объеме по сравнению с традиционными инъецируемыми вакцинами на основе расщепленного вируса гриппа, которые, как правило, составляют приблизительно 0,5, 0,7 или 1 мл на дозу. Малообъемные дозы согласно изобретению соответственно составляют менее 500 мкл, типично меньше 300 мкл и предпочтительно не более чем приблизительно 200 мкл или менее на дозу. Небольшую корректировку объема дозы на практике осуществляют в зависимости от концентрации НА в исходном образце или в зависимости от пути доставки, причем меньшие дозы вводят интраназальным или интрадермальным путем, или в зависимости от целевого населения (например дети могут получать половину дозы для взрослого человека). Предпочтительно штамм или штаммы вируса гриппа, включаемые иммуногенную композицию или вакцинную композицию, представляет(ют) собой межпандемический(ие) (сезонный(ые штамм(ы) или штамм(ы), ассоцированный(ые) с вспышкой пандемии или ассоциированный со вспышкой пандемии или предрасположенный(ые) к тому, чтобы ассоциироваться совспышкой пандемии, или предпочтительно в поливалентной композиции смесь этих штаммов. Межпандемические штаммы представляют собой, например, штаммы, которые глобально циркулируют на протяжении межпандемических периодов, такие как H1N1, H1N2, H3N2 или В, но не ограничиваются ими. Коммерчески доступные вакцины против гриппа представляют собой тривалентную комбинацию, включающую один штамм вируса гриппа В и два штамма вируса гриппа A (H1N1, H3N2). Особенностями штамма вируса гриппа, которые дают ему возможность вызывать пандемию или вспышку заболеваемости вирусом гриппа, связанную с пандемическими штаммами вируса гриппа, являются следующие: штамм содержит новый гемагглютинин по сравнению с гемагглютинином в циркулирующих на данный момент штаммах, и поэтому почти все люди являются иммунологически наивными; он способен передаваться в популяции людей от человека к человеку; и он является патогенным для людей. Новый гемагглютинин представляет собой гемагглютинин, который не проявлялся в популяции людей в течение длительного периода времени, вероятно в течение нескольких десятилетий, такой как Н 2. Или он может представлять собой гемагглютинин, который ранее не циркулировал в популяции людей,например Н 5, Н 9, Н 7 или Н 6, которые обнаружены у птичьих видов (у птиц). В любом случае, большинство, или, по меньшей мере, значительная доля, или даже вся популяция ранее не сталкивалась с данным антигеном и является иммунологически наивной в отношении его. В настоящее время вирус гриппа А,который идентифицирован WHO как вирус, который потенциально может вызвать у людей пандемию,представляет собой высокопатогенный вирус птичьего гриппа H5N1. Таким образом, пандемическая вакцина по изобретению предпочтительно должна содержать вирус H5N1. Два других штамма, подходящих для включения в заявленную композицию, представляют собой H9N2 или H7N1. Некоторые группы людей обычно имеют повышенный риск инфицирования вирусом гриппа в случае пандемии. Особенно восприимчивы пожилые люди, люди, страдающие хроническими болезнями, и маленькие дети, но риск также имеют многие молодые и явно здоровые люди. Для вируса гриппа Н 2 часть населения, родившаяся после 1968 года, имеет повышенный риск. Важно, чтобы эти группы были эффективно защищены по возможности быстро и простым путем. Другая группа людей, которая имеет повышенный риск, это путешественники. В настоящее время люди путешествуют больше, чем раньше, и области, где возникают самые новые вирусы, а именно Китай и юго-восточная Азия в течение последних лет превратились в популярные места для путешествий. Это изменение картины путешествий дает новым вирусам возможность распространяться по всему миру за недели, а не за месяцы или года. Таким образом, для этих групп людей существует особая необходимость в вакцинации для защиты от вируса гриппа в случае пандемии или потенциальной пандемии. Подходящими штаммами, без ограничений, являются H5N1, H5N8, H5N9, H7N4, H9N2, H7N7, H7N3, H2N2 и H7N1. Другие пандемические штаммы у людей: H7N3 (2 случая в Канаде), H10N7 (2 случая в Египте) и H5N2 (1 случай в Японии) иH7N2. Штамм вируса гриппа, который представляет собой пандемический штамм или штамм, ассоциированный с пандемией, для краткости в этом документе называется "пандемическим штаммом". Соответственно лекарственное средство против гриппа по изобретению удовлетворяет определенным международным критериям для вакцин. Для измерения эффективности вакцин против гриппа применяются международные стандарты. Серологические переменные оценивают согласно критериям Европейского агентства по оценке медицинских продуктов для людей (CHMP/BWP/214/96, Комитет по патентованным медицинским продуктам (СРМР). Note for harmonization of requirements for influenza vaccines, 1997, CHMP/BWP/214/96 circular 96-0666:1-22) для клинических испытаний, относящихся к ежегодным процедурам лицензирования вакцин против гриппа (табл. 2). Эти требования разные для взрослого населения (18-60 лет) и пожилого населения (старше 60 лет) (табл. 2). Для межпандемических вакцин против гриппа по меньшей мере одна из оценок (фактор сероконверсии, уровень сероконверсии,уровень серозащиты) должна удовлетворять европейским требованиям для всех штаммов гриппа, включенных в вакцину. Доля титров, равных или больше 1:40, рассматривается как наиболее релевантная,поскольку ожидается, что эти титры представляют собой наилучший коррелят защиты [Beyer Wet al. 1998, Clin Drug Invest., 15:1-12].EMEA/CHMP/VWP/263499/2006 от 24 января 2007 года под названием "Guidelines on flu vaccines prepared from viruses with a potential to cause a pandemic", доступному на сайте www.emea.eu.int), в отсутствие конкретных критериев для вакцин против гриппа, получаемых из не циркулирующих штаммов,предполагается, что пандемическая вакцина-кандидат (по меньшей мере) должна быть способна вызывать иммунологические ответы, достаточные для удовлетворения всем трем действующим стандартам,установленным для существующих вакцин, у непримированных взрослых или пожилых субъектов после двух доз вакцины. В ЕМЕА Guideline описана ситуация, когда в случае пандемии население является иммунологически наивным, и поэтому предполагается, что пандемические вакцины-кандидаты должны удовлетворять всем трем критериям СНМР для сезонных вакцин. Никакого определенного требования доказывать это у превакцинированных серонегативных субъектов нет. Вакцины по настоящему изобретению предпочтительно удовлетворяют по меньшей мере одному такому критерию для пандемического штамма, включенного в данную композицию (одного критерия достаточно, чтобы получить разрешение), предпочтительно по меньшей мере двум или типично по меньшей мере всем трем критериям защиты, которые указаны в табл. 2 А. Таблица 2 А Критерии СНМР- уровень сероконверсии определяют как долю субъектов в каждой группе, имеющих защитный титр после вакцинации не менее 1:40. Уровень сероконверсии просто выражают в % субъектов,которые имеют титр HI менее 1:10 до вакцинации и не менее 1:40 после вакцинации. Однако, если исходный титр больше или равен 1:10, то должно быть по меньшей мере четырехкратное увеличение количества антитела после вакцинации.- фактор конверсии определяют как кратное увеличение средних геометрических значений титров (GMT) сывороточных HI антител после вакцинации для каждого вакцинного штамма.- уровень защиты определяют как долю субъектов, которые были либо серонегативными до вакцинации и имеющими (защитный) титр HI после вакцинации не менее 1:40, либо серопозитивными до вакцинации и имеющими значимое 4-кратное увеличение титра после вакцинации; это общепризнанный показатель защиты. Уровень серозащиты 70% определяется Европейским регулирующим органом здравоохранения(СНМР - Committee for Medicinal Products for Human Use (Комитет по медицинским продуктам для применения у человека) как один из трех критериев, которым обычно удовлетворяет ежегодная сезонная вакцина против гриппа и которым, как ожидает СНМР, также удовлетворяет пандемическая вакцинакандидат. Однако, математическое моделирование показало, что вакцина, которая на уровне популяции является только на 30% эффективной против некоторых дрейф-вариантов штаммов, также может быть полезной для снижения масштаба пандемии, и что кампания по вакцинации в ситуации пандемии с использованием (препандемической) вакцины с 30% эффективностью против пандемического штамма (перекрестная защита на 30%) может эффективно снижать уровень клинической атаки на 75% и, следовательно, заболеваемость/смертность среди населения (Ferguson et al., Nature 2006).FDA опубликовало проект руководства (проектные критерии CBER (Центр биологической оценки и исследований (доступен из Office of Communication, Training and Manufacturers Assistance (HFM-40),1401 Rockville Pike, Suite 200N, Rockville, MD 20852-1448, или при звонке на номер 1-800-835-4709 или 301-827-1800, или в Интернете на сайте http.7/www.fda.qov/cber/quidelines.htm) по клиническим данным,необходимым для подтверждения лицензирования пандемических вакцин против гриппа, и предлагаемые критерии также основаны на критериях СНМР. FDA использует несколько иные возрастные точки отсечки. Соответствующие конечные показатели аналогичным образом включают 1) процент субъектов,у которых достигается титр HI антител не менее 1:40 и 2) уровни сероконверсии, определяемые как четырехкратное увеличение титра HI антител после вакцинации. Среднее геометрическое титра (GMT) должно быть включено в результаты, но данные должны включать не только точечную оценку, но и нижнюю границу 95%-ного доверительного интервала инцидентного уровня сероконверсии, и в день 42 уровень инцидентности титров HI не менее 1:40 должен превышать целевое значение. Таким образом,должны быть приведены эти данные и 95%-ные доверительные интервалы (Cl) точечных оценок. Проект руководства, опубликованный FDA, требует того, чтобы достигались обе цели. Это суммировано в табл. 2 В. Таблица 2 В Проектные критерии CBER- уровень сероконверсии определяется а) для субъектов с исходным титром не менее 1:10 как 4-кратное или более увеличение или б) для субъектов с исходным титром менее 1:10 как увеличение до 1:40 или более. Эти критерии должны соблюдаться на нижней границе 95% Cl для истинного значения. Соответственно в одном аспекте данного изобретения предложена вакцина, способ или применение, как они здесь заявлены, где указанный иммунный ответ или защита, индуцированные введением рассматриваемой композиции против гриппа, удовлетворяют всем трем регулирующим критериям EU по эффективности вакцины против гриппа. Предпочтительно штамм или каждый штамм вакцины удовлетворяет по меньшей мере одному, предпочтительно двум или трем из следующих критериев: уровень сероконверсии более 50%, более 60%, более 70%, предпочтительно более 80% или более 90% у взрослого населения (в возрасте 18-60 лет) и/или предпочтительно также у пожилого населения (в возрасте старше 60 лет); уровень защиты более 75%, более 80%, более 85%, предпочтительно более 90% у взрослого населения (в возрасте 18-60 лет) и/или предпочтительно также у пожилого населения (в возрасте старше 60 лет); фактор конверсии более 4,0; более 5,0; более 6,0; более 7,0; более 8,0; более 9,0; или 10 или более 10 у взрослого населения (в возрасте 18-60 лет) и/или предпочтительно также у пожилого населения (в возрасте старше 60 лет). В конкретном воплощении вакцина по изобретению удовлетворяет как требованию по уровню сероконверсии более 60%, или более 70%, или предпочтительно более 80%, так и требованию по уровню защиты более 75%, предпочтительно более 80% у взрослого населения. В другом конкретном воплощении композиция по данному изобретению удовлетворяет как требованию фактора конверсии более 5,0,или более 7,0, или предпочтительно более 10,0, так и требованию уровня сероконверсии более 60%, или более 70%, или предпочтительно более 80% у взрослого населения. В другом конкретном воплощении композиция по изобретению удовлетворяет требованиям и фактора конверсии 10,0 или более, и уровня сероконверсии 80% или более, и уровня защиты 80% или более. В другом воплощении заявленная вакцина, предпочтительно препандемическая вакцина, содержащая пандемический штамм или штамм, ассоциированный с пандемией, имеет 30%-ную эффективность против циркулирующего пандемического штамма (перекрестная защита на 30%). В частности, заявленная вакцина будет удовлетворять требованию уровня серозащиты по меньшей мере 30% против дрейфвариантов штаммов, предпочтительно по меньшей мере 40%, или более 50%, или более 60% против дрейф-вариантов штаммов. Предпочтительно уровень серозащиты будет составлять более 70% или предпочтительно более 80% против дрейф-вариантов штаммов. Указанная препандемическая вакцина,способная обеспечивать перекрестную защиту, способна значительно снижать общий уровень атаки инфекции по меньшей мере на 50% или предпочтительно по меньшей мере на 75% и, следовательно, заболеваемость/смертность среди населения. В еще одном воплощении заявленная адъювантная вакцина способна индуцировать выработку нейтрализующих антител по меньшей мере у 50% субъектов, по меньшей мере у 60%, предпочтительно по меньшей мере у 70% или предпочтительно у более чем 75% субъектов против дрейфующего штамма или штамма из другой монофилетической группы. Предпочтительно этот эффект достигается с использованием низкой дозы антигена, например 7,5 мкг НА, или еще меньшей дозы антигена, такой как 3,8 мкг или 1,9 мкг НА. Предпочтительно любой или все такие критерии также удовлетворяются в других группах населения, таких как дети, и в любых группах населения с ослабленным иммунитетом. В одном из аспектов изобретения доза иммуногенной композиции для человека содержит гемагглютинин (НА) единственного штамма вируса гриппа и упоминается как "моновалентная" композиция против гриппа. В еще одном аспекте изобретения доза иммуногенной композиции для человека содержит гемагглютинин (НА) из более чем одного штамма вируса гриппа и упоминается как "поливалентная" композиция против гриппа. Подходящая поливалентная композиция по изобретению представляет собой бивалентную композицию (содержащую гемагглютинин (НА) из двух штаммов вируса гриппа, таких как,но не исключительно, два штамма, ассоциированных с пандемиями или предрасположенных к тому, чтобы ассоциироваться с пандемией, например Н 5=Н 2), тривалентную композицию (содержащую гемагглютинин (НА) из трех штаммов вируса гриппа, возможно двух штаммов А и одного штамма В, например, без ограничений, B/yamagata или B/Victoria), квадривалентную композицию (содержащую гемагглютинин (НА) из четырех штаммов вируса гриппа) или пентавалентную композицию (содержащую гемагглютинин (НА) из пяти штаммов вируса гриппа). Подходящая квадривалентная композиция содержит гемагглютинин из двух штаммов А и двух штаммов В из различных линий (таких как B/yamagata илиB/Victoria). Альтернативно, квадривалентная композиция содержит гемагглютинин из трех штаммов А(возможно H1N1, H3N2 и один штамм А, ассоциированных с пандемий или предрасположенный к тому,чтобы ассоциироваться с пандемией) и одного штамма В (такого как B/yamagata или B/Victoria). Еще одна альтернативная квадривалентная композиция содержит гемагглютинин из четырех штаммов А, ассоциированных с пандемией или предрасположенных к тому, чтобы ассоциироваться с пандемией, таких как штаммы птичьего гриппа, например Н 5+Н 2+Н 7+Н 9. Конкретно, поливалентная адъювантная пандемическая композиция, например пандемическая бивалентная (например, Н 5+Н 2), или тривалентная, или квадривалентная (например, Н 5+Н 2+Н 7+Н 9) обеспечивает преимущество превентивной иммунизации против опасных подтипов пандемического вируса гриппа А и длительного примирования против опасных подтипов. Обычно две дозы вводят с возраста 6 недель с использованием обычной схемы (например,с интервалом 6-12 месяцев) и возможно предусмотренную периодическую ревакцинирующую дозу (например 10 лет). Возможно, такая пандемическая вакцина может быть объединена с сезонной вакциной. Поливалентная композиция также может содержать более 5 штаммов вируса гриппа, например 6, 7,8, 9 или 10 штаммов вируса гриппа. Когда в поливалентной сезонной композиции используются два штамма В, это могут быть штаммы из двух разных линий (возможно, из B/Victoria и B/Yamagata). По меньшей мере один из указанных штаммов В, предпочтительно оба штамма В являются штаммами из циркулирующей линии. Такая композиция особенно подходит для детей. Предпочтительно, когда поливалентная композиция для применения у детей включает в себя два штамма В, тогда количество антигена, обычно приходящееся на штамм В, распределяется между двумя штаммами В. Конкретно, квадривалентная (Н 1+Н 3+обе линии В) вакцина против гриппа с адъювантом дает преимущество, заключающееся в улучшении профилактики наивных детей, благодаря ее превосходной эффективности по сравнению с вакцинами без адъюванта (с точки зрения защиты от гомологичного и дрейфующего штамма и ее эффективности против двух циркулирующих линий В) и возможной круглогодичной иммунизации с учетом возраста. Одну дозу или две дозы предпочтительно вводят в возрасте 6 недель или в возрасте от 6 до 35 месяцев. В конкретном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека представляет собой тривалентный иммуногенный или вакцинный препарат, содержащий гемагглютинин (НА) из двух штаммов А (возможно H1N1, H3N2) и один штамм В. Предпочтительно количество НА на штамм представляет собой небольшое количество НА (возможно 10 мкг НА на штамм или меньше) и является таким, как определено выше. Предпочтительно количество НА на штамм составляет приблизительно 5 мкг или меньше, приблизительно 2,5 мкг или меньше. Адъювант является таким, как определено в данном описании и, в частности, как определено в табл. 1. Предпочтительно адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 5-6, 5-6 и 2-3 мг на дозу соответственно. Альтернативно, адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 2,5-3,5, 2-3 и 1-2 мг на дозу соответственно. Эти адъювантные иммуногенные препараты или вакцины особенно подходят для взрослого населения (18-60 лет) или старших детей (3-17 лет) и могут обеспечивать перекрестную защиту от дрейфующих вариантов H3N2 и от штамма В из другой линии. В еще одном конкретном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека представляет собой квадривалентную иммуногенную или вакцинную композицию, содержащую гемагглютинин (НА) из двух штаммов А (возможно H1N1, H3N2) и двух штаммов В (возможно из разных линий, например B/Victoria и B/Yamagata). Предпочтительно количество НА на штамм на дозу составляет приблизительно 15 мкг. Предпочтительно количество НА на штамм представляет собой небольшое количество НА (возможно приблизительно 10 мкг НА на штамм на дозу или меньше, чтобы достигалось максимум 40-45 мкг НА на дозу) и является таким, как определено выше. Предпочтительно количество НА на штамм составляет приблизительно 5 мкг или меньше, приблизительно 2,5 мкг или меньше. Адъювант является таким, как определено в данном описании и, в частности, как определено в табл. 1. Предпочтительно адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 5-6, 5-6 и 2-3 мг на дозу соответственно. Альтернативно, адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 2,5-3,5, 2-3 и 1-2 мг на дозу соответственно. Такая композиция, содержащая второй штамм В, особенно подходит для совсем маленьких детей, особенно когда важно заблаговременное воздействие или примирование. Адъювант обеспечивает преимущество повышенной защиты для этой группы населения. Доза иммуногенной композиции для детей предпочтительно составляет половину дозы для взрослых людей и предпочтительно составляет 2,5 мкг НА на штамм, при этом эмульсия типа "масло в воде" содержит сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 2,5-3,5,2-3 и 1-2 мг на дозу соответственно. Альтернативно, указанный дополнительный штамм В предпочтительно с характеристиками и в количестве, которые определены выше в отношении квадривалентного препарата, может быть добавлен в форме моновалентного препарата в тривалентный препарат, как описано выше. Использование небольшого количества НА, такого как 10 мкг или меньше или 5 мкг или меньше, или, возможно, для младших детей 2,5 мкг или меньше, может обеспечить преимущество ограниченного влияния добавленного штамма вируса гриппа на глобальные поставки вакцины. Предпочтительно, когда два штамма В включены в вакцинную композицию, тогда количество антигена, обычно предусмотренное для штамма В, распределяется между двумя штаммами В. В еще одном конкретном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека представляет собой квадривалентную иммуногенную или вакцинную композицию, содержащую гемагглютинин (НА) из двух межпандемических штаммов А (возможно H1N1, H3N2), одного штамма В и одного штамма А, ассоциированного с пандемий или предрасположенного к тому, чтобы ассоциироваться с пандемией (возможно H5N1, H9N2, H7N7, H5N8, H5N9, H7N4, H7N3, H2N2, H10N7, H5N2, H7N2 иH7N1). Предпочтительно количество НА на штамм представляет собой небольшое количество НА (возможно 10 мкг НА на штамм или меньше) и является таким, как определено выше. Предпочтительно количество НА на штамм составляет приблизительно 5 мкг или меньше, приблизительно 2,5 мкг или меньше. Адъювант является таким, как определено в данном описании и, в частности, как определено в табл. 1. Предпочтительно адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде",содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 5-6, 5-6 и 2-3 мг на дозу соответственно. Альтернативно, адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 2,5-3,5, 2-3 и 1-2 мг на дозу соответственно. В еще одном конкретном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека представляет собой квадривалентную иммуногенную или вакцинную композицию, содержащую гемагглютинин (НА) из трех межпандемических штаммов А (возможно H1N1 и два штамма H3N2) и одного штамма В. Предпочтительно количество НА на штамм представляет собой небольшое количество НА(возможно 10 мкг НА на штамм или меньше) и является таким, как определено выше. Предпочтительно количество НА на штамм составляет приблизительно 5 мкг или меньше, приблизительно 2,5 мкг или меньше. Адъювант является таким, как определено в данном описании и, в частности, как определено в табл. 1. Предпочтительно адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде",содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 5-6, 5-6 и 2-3 мг на дозу соответственно. Альтернативно, адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 2,5-3,5, 2-3 и 1-2 мг на дозу соответственно. Такая композиция, содержащая третий сезонный штамм А, особенно подходит для самых маленьких детей. Предпочтительно два из трех межпандемических штаммов представляют собой штамм H3N2, причем второй штамм H3N2 является штаммом ближайшей или отдаленной монофилетической группы относительно первого штамма H3N2. Преимущество этого адъюванта заключается в обеспечении этой группы населения повышенной защитой. Подходящая доза иммуногенного препарата для детей составляет половину дозы для взрослых и предпочтительно содержит 2,5 мкг НА на штамм, при этом эмульсия типа"масло в воде" содержит сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 2,5-3,5, 2-3 и 1-2 мг на дозу соответственно. В еще одном конкретном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека представляет собой пентавалентную иммуногенную или вакцинную композицию, содержащую гемагглютинин (НА) из двух межпандемических штаммов А (возможно H1N1, H3N2), двух штаммов В (возможно из разных линий, таких как B/Victoria и B/Yamagata) и одного штамма А, ассоциирующегося с пандемией или предрасположенного к тому, чтобы ассоциироваться с пандемией (возможно H5N1,H9N2, H5N8, H5N9, H7N4, H7N7, H7N3, H2N2, H10N7, H5N2 и H7N1). Предпочтительно количество НА на штамм на дозу составляет приблизительно 15 мкг. Предпочтительно количество НА на штамм представляет собой небольшое количество НА (возможно приблизительно 10 мкг НА на штамм на дозу или меньше, чтобы достигался максимум 40-45 мкг НА на дозу), и является таким, как определено выше. Предпочтительно количество НА на штамм составляет приблизительно 5 мкг или меньше, приблизительно 2,5 мкг или меньше. Адъювант является таким, как определено в данном описании и, в частности,как определено в табл. 1. Предпочтительно адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа"масло в воде", содержащую сквален, альфа-токоферол и Polysorbat 80 в количестве 5-6, 5-6 и 2-3 мг на дозу соответственно. Альтернативно, адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 2,5-3,5, 2-3 и 1-2 мг на дозу соответственно. В еще одном конкретном воплощении дозированная форма иммуногенного препарата для человека представляет собой пентавалентную иммуногенную или вакцинную композицию, содержащую гемагглютинин (НА) из трех межпандемических штаммов А (возможно H1N1 и два штамма H3N2) и двух штаммов В (возможно из разных линий, таких как B/Victoria и B/Yamagata). Предпочтительно количество НА на штамм представляет собой небольшое количество НА (возможно 10 мкг НА на штамм или меньше) и является таким, как определено выше. Предпочтительно количество НА на штамм составляет приблизительно 5 мкг или меньше, приблизительно 2,5 мкг или меньше. Адъювант является таким, как определено в данном описании и, в частности, как определено в табл. 1. Предпочтительно адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол иPolysorbat 80 в количестве 5-6, 5-6 и 2-3 мг на дозу соответственно. Альтернативно, адъювантная композиция представляет собой эмульсию типа "масло в воде", содержащую сквален, -токоферол и Polysorbat 80 в количестве 2,5-3,5, 2-3 и 1-2 мг на дозу соответственно. Соответственно в изобретении предложен иммуногенный препарат против гриппа, содержащий сквален и НА, где массовое соотношение сквален:общее количество НА (с учетом всех штаммов вируса гриппа) находится в диапазоне приблизительно 50-150 или приблизительно 150-400 (например, приблизительно 200-300). Такие препараты подходят, но не исключительно, для применения у пожилого населения и обеспечивают наилучший баланс реактогенности и иммуногенности. В изобретении также предложен иммуногенный препарат против вируса гриппа, содержащий сквален и НА, где массовое соотношение сквален:общее количество НА (с учетом всех штаммов вируса гриппа) составляет приблизительно 50-400, например приблизительно 50-100, 75-150, 75-200, 75-400, 100-200, 100-250 или 200-400. Предпочтительно это соотношение является таким, что по меньшей мере два, предпочтительно все три критерия (табл. 2) защиты удовлетворяются для конкретной группы населения. Может быть включен агонистCpG7909). Подходящие массовые соотношения сквален:TLR-4 составляют приблизительно 100-450, например 50-250, 50-150, 100-250, 200-250, 350-450. Подходящие массовые соотношения сквален:TLR-9 составляют приблизительно 50-1000, например 50-500, 100-1000, 100-400, 400-600. НА может быть получен из сезонного штамма вируса гриппа. Такие препараты подходят, но не исключительно, для применения у взрослого или детского населения и обеспечивают наилучший баланс реактогенности и иммуногенности. Предпочтительно НА представляет собой НА из по меньшей мере трех, по меньшей мере четырех штаммов вируса гриппа. Предпочтительно присутствуют три сезонных штамма (например, H1N1,H3N2, В). Предпочтительно, когда присутствуют четыре штамма, тогда они представляют собой группу штаммов из четырех сезонных штаммов (например, H1N1, H3N2, два штамма В; или H1N1, В, два штамма H3N2) или группу штаммов из одного пандемического (например, птичьего) штамма плюс три сезонных штамма (например, H1N1, H3N2, В). Все заявленные иммуногенные препараты или вакцина с адъювантом преимущественно могут быть основаны на адъюванте для обеспечения устойчивого иммунного ответа в течение периода времени, превышающего 6 месяцев, предпочтительно 12 месяцев после вакцинации. Предпочтительно вышеуказанный(ые) ответ(ы) достигается(ются) после одной дозы или, как правило, после двух доз, введенных во время одного и того же текущего первичного иммунного ответа. Особое преимущество заявленной дозированной формы иммуногенного препарата заключается в том,что иммунный ответ вызывается всего лишь после одной дозы препарата или вакцины. Подходящим также является ведение двух доз во время одного и того же текущего первичного иммунного ответа,предпочтительно для наивных групп населения или индивидуумов или для групп населения или индивидуумов с ослабленным иммунитетом. Предпочтительно для детей, которых прежде не вакцинировали, в частности детей в возрасте до 6 лет или 9-10 лет, могут потребоваться две дозы. Соответственно в одном из аспектов изобретения предложено применение антигенного препарата инактивированного пандемического вируса гриппа, в частности расщепленного вируса гриппа или его антигенного препарата, в изготовлении вакцинной композиции для однодозовой или двухдозовой вакцинации против вируса гриппа, где однодозовая или двухдозовая вакцинация формирует иммунный ответ,который удовлетворяет по меньшей мере одному, предпочтительно двум или трем международным регулирующим требованиям для вакцин против гриппа. В еще одном конкретном воплощении указанная однодозовая вакцинация также или дополнительно формирует иммунный CD4 Т-клеточный ответ и/или ответ В-клеток памяти, который сильнее, чем ответ, вызываемый вакциной без адъюванта. В конкретном воплощении указанный иммунный ответ представляет собой перекрестно-реактивный антительный ответ или перекрестно-реактивный CD4 Т-клеточный ответ, или их оба. В конкретном воплощении пациентчеловек является иммунологически наивным (т.е. без ранее существовавшего иммунитета) по отношению к вакцинирующему штамму. В частности, вакцинная композиция содержит небольшое количество антигена НА и адъюванта в виде эмульсии типа "масло в воде" с компонентами, присутствующими в меньших количествах по сравнению с количествами, которые ранее считались полезными, и где количества являются такими, как определено в данном описании. В частности, вакцинная композиция является такой, как определено в данном описании. В частности, иммуногенные свойства вакцинной композиции являются такими, как определено в данном описании. Предпочтительно данную вакцину вводят внутримышечно. Иммуногенные свойства иммуногенного препарата, используемого для вакцинации (возможно первой вакцинации) по настоящему изобретению. В настоящем изобретении адъювантный иммуногенный препарат способен вызывать улучшенныйCD4+ Т-клеточный иммунный ответ по меньшей мере на компонент-антиген(ы) или антигенную композицию по сравнению с CD4+ Т-клеточным иммунным ответом, достигаемым при использовании соответствующей композиции без адъюванта, т.е. композиции, которая не содержит никакого экзогенного адъюванта (называемой здесь также "простой композицией"). В конкретном воплощении, когда иммуногенный препарат против гриппа состоит из нескольких штаммов вируса гриппа, один из которых представляет собой второй штамм В, или третий межпандемический штамм А, или пандемический штамм,тогда указанный улучшенный CD4+ Т-клеточный иммунный ответ направлен против по меньшей мере одного из этих штаммов. В другом воплощении адъювантный иммуногенный препарат, в котором адъювантный(ые) компонент(ы) присутствует(ют) в меньшем количестве по сравнению с количеством, кото- 24024250 рое ранее считалось полезным, и обычно является(ются) таким(и), как определено выше, соответственно способен вызывать CD4+ Т-клеточный иммунный ответ по меньшей мере на один из компонентовантигенов или антигенную композицию, по меньшей мере сравнимый с ответом, который получают с адъювантными композициями, содержащими некоторые из адъювантов предшествующего уровня техники. Эта характеристика ниже по тексту упоминается как "сравнимый CD4+ Т-клеточный иммунный ответ". Термин "улучшенный CD4 Т-клеточный иммунный ответ" означает, что более высокий CD4+ ответ достигается у пациента-человека после введения адъювантного иммуногенного препарата, как он определен здесь, по сравнению с ответом, достигаемым после введения этого же препарата без адъюванта. Например, более сильный CD4+ Т-клеточный ответ достигается у пациента-человека при введении иммуногенного препарата, содержащего вирус гриппа или его антигенный препарат вместе с адъювантом в виде эмульсии типа "масло в воде", содержащим метаболизируемое масло, такое как сквален, токол(возможно -токоферол) и эмульгатор (возможно полиоксиэтиленсорбитана моноолеат, такой как Tween 80 или Polysorbat 80), по сравнению с ответом, формирующимся после введения иммуногенной композиции, содержащей вирус гриппа или его антигенный препарат без адъюванта. Такой адъювантный препарат преимущественно будет применяться для индуцирования противогриппозного CD4+ Тклеточного ответа, способного обнаруживать эпитопы вируса гриппа, презентируемые молекулами МНСII класса. Предпочтительно указанный иммунологический ответ, индуцированный адъювантным препаратом на основе расщепленного вируса гриппа для применения в настоящем изобретении, более сильный, чем иммунологический ответ, индуцированный любой другой неадъювантной традиционной вакциной против гриппа, такой как субъединичная вакцина против гриппа или вакцина против гриппа на основе целого вируса. В частности, но не исключительно, указанный "улучшенный CD4+ Т-клеточный иммунный ответ" или "сравнимый CD4+ Т-клеточный иммунный ответ" получают у иммунологически непримированного пациента, т.е. у пациента, который является серонегативным по отношению к указанному вирусу гриппа или антигену. Эта серонегативность может быть результатом того, что указанный пациент никогда не сталкивался с таким вирусом или антигеном (так называемый "наивный" пациент) или, альтернативно, не реагировал на указанный антиген при столкновении с ним. Предпочтительно указанный улучшенныйCD4+ Т-клеточный иммунный ответ получают у субъекта с ослабленным иммунитетом, такого как пожилой человек, обычно в возрасте по меньшей мере 50 лет, типично 65 лет или старше, или у взрослого субъекта младше 65 лет с высоким риском медицинского состояния (взрослый субъект, "подверженный высокому риску"), или у ребенка младше двух лет.(Улучшенный) CD4+ Т-клеточный иммунный ответ можно оценить путем измерения количества клеток, продуцирующих любой из следующих цитокинов: клетки, продуцирующие по меньшей мере два разных цитокина (CD40L, IL-2, IFN-7, TNF-); клетки, продуцирующие по меньшей мере CD40L и другой цитокин (IL-2, TNF-, IFN-); клетки, продуцирующие по меньшей мере IL-2 и другой цитокин (CD40L, TNF-, IFN-); клетки, продуцирующие по меньшей мере IFN- и другой цитокин (IL-2, TNF-, CD40L); клетки, продуцирующие по меньшей мере TNF- и другой цитокин (IL-2, CD40L, IFN-)."Улучшенный" CD4+ Т-клеточный иммунный ответ будет иметь место, когда клетки, продуцирующие любой из цитокинов, упомянутых выше, будут присутствовать в большем количестве после введения адъювантного препарата по сравнению с введением композиции без адъюванта. В типичном случае должно соблюдаться по меньшей мере одно, предпочтительно два из пяти условий, упомянутых здесь выше. В конкретном воплощении клетки, продуцирующие все четыре цитокина, присутствуют в большем количестве в адъювантной группе по сравнению с неадъювантной группой. "Сравнимый" CD4+ Т-клеточный иммунный ответ будет иметь место, когда отсутствует значимое, возможно статистически значимое снижение ответа при использовании адъювантного иммуногенного препарата, где адъювантный(ые) компонент(ы) присутствует(ют) в меньшем количестве по сравнению с количеством, которое ранее рассматривали как полезное, и которое типично является таким, как определено здесь, по сравнению с ответом при использовании композиций с некоторыми адъювантами предшествующего уровня техники (т.е. с тем же компонентом(ами) в большем количестве). В конкретном воплощении улучшенный CD4+ Т-клеточный иммунный ответ может давать адъювантный препарат против гриппа по настоящему изобретению, и в идеале он может быть получен после одного введения. Однодозовый подход будет крайне уместным, например, в ситуации быстро развивающейся эпидемии. В некоторых обстоятельствах особенно для пожилого населения, или в случае маленьких детей (младше 9 лет), которые впервые вакцинируются против гриппа, или в случае пандемии может быть полезным введение двух доз одного и того же препарата для этого сезона. Вторая доза указанного этого же препарата (все еще рассматриваемого как "препарат для первой вакцинации") может быть введена во время текущего первичного иммунного ответа и через адекватный промежуток времени. Обычно вторую дозу данного препарата вводят через несколько недель или примерно через один месяц, напри- 25024250 мер через 2, 3, 4, 5 или 6 недель после введения первой дозы, чтобы способствовать примированию иммунной системы у не реагирующих или слабо реагирующих индивидуумов. В конкретном аспекте после примо-вакцинации следует курс последующей вакцинации адъювантным вакцинным продуктом, содержащим гетерологичный штамм вируса гриппа. В конкретном воплощении введение указанного иммуногенного препарата альтернативно или дополнительно индуцирует улучшенный ответ В-клеток памяти у пациентов, которым введен адъювантный иммуногенный препарат, по сравнению с ответом В-клеток памяти, вызванным у индивидуумов, иммунизированных композицией без адъюванта. Имеется в виду, что улучшенный ответ В-клеток памяти означает повышенную концентрацию В-лимфоцитов периферической крови, способных, столкнувшись с антигеном, дифференцироваться в плазматические клетки, секретирующие антитела, измеренную посредством стимуляции дифференцировки in vitro (смотри раздел "Примеры", например, способы Elispot с В-клетками памяти). В еще одном воплощении адъювантный иммуногенный препарат, в котором компонент(ы)-адъювант присутствует(ют) в меньшем количестве по сравнению с количеством, которое ранее считалось полезным, и типично является таким, как определено здесь, способен вызывать ответ В-клеток памяти по меньшей мере на один из антигенов антигенного компонента или антигенную композицию,сравнимый (т.е. незначительно ниже или возможно статистически незначимо ниже) с ответом, который вызывают адъювантные композиции с адъювантами предшествующего уровня техники. Эта характеристика в данном описании называется "сравнимый ответ В-клеток памяти". В еще одном конкретном воплощении вакцинация адъювантным препаратом для первой вакцинации не оказывает измеримого влияния на CD8-ответ. Предпочтительно заявленная дозированная форма, содержащая вирус гриппа или его антигенный препарат, приготовленный с использованием адъюванта в виде эмульсии типа "масло в воде", в частности с использованием адъюванта в виде эмульсии "масло в воде", содержащего метаболизируемое масло,такое как сквален, токол (возможно -токоферол) и эмульгатор (возможно полиоксиэтиленсорбитана моноолеат, такой как Tween 80 или Polysorbat 80) в небольших количествах, таких, как определено здесь, эффективна в стимуляции Т-клеточных ответов у человеческой популяции с ослабленным иммунитетом или иммунологически наивной человеческой популяции. Соответственно введение разовой дозы адъювантного иммуногенного препарата для первой вакцинации, как описано в данном изобретении,обеспечивает улучшенную серозащиту, оцениваемую по кореллятам защиты для вакцин против гриппа, с последующей ревакцинацией против вируса гриппа, чем вакцинация неадъювантной вакциной против гриппа. Заявленный адъювантный препарат также преимущественно вызывает улучшенный CD4 Тклеточный иммунный ответ против вируса гриппа по сравнению с ответом, достигаемым с использованием неадъювантного препарата. Это свойство может быть связано с повышенной реактивностью после вакцинации или инфицирования по отношению к антигенному воздействию вируса гриппа. Кроме того,это также может быть связано с перекрестной реактивностью, т.е. с более высокой способностью реагировать на вариантные штаммы вируса гриппа. Этот качественно и/или количественно улучшенный ответ может быть благоприятным во всех популяциях в случае пандемии и особенно в человеческой популяции с ослабленным иммунитетом, такой как популяция пожилых людей (в возрасте 65 лет и старше) и, в частности, у пожилого населения, подверженного высокому риску. Он также может быть благоприятным для большей части наивной популяции маленьких детей (младше 5 лет, предпочтительно младше 2 лет). Когда препарат содержит по меньшей мере один пандемический штамм, этот улучшенный ответ будет благоприятным для применения для примирования, например, вакциной из стратегического запаса, содержащей дрейф-вариант, до или в начале пандемической вспышки. Результатом может быть снижение общего показателя заболеваемости и смертности и предотвращение экстренных госпитализаций по поводу пневмонии или другого гриппоподобного заболевания. Кроме того, это обеспечивает формированиеCD4 Т-клеточного ответа, который более устойчив во времени, например все еще присутствует через год после первой вакцинации, по сравнению с ответом, сформированным неадъювантным препаратом. Все эти преимущества могут быть достигнуты с использованием заявленного адъювантного препарата с одновременным снижением общей реактогенности по сравнению с адъювантом, имеющим большее(ие) количество(а) компонента(ов). Предпочтительно в CD4 Т-клеточный иммунный ответ, такой как "улучшенный" или "сравнимый"CD4 Т-клеточный иммунный ответ, получаемый у непримированного субъекта, вовлечено индуцирование перекрестно-реактивного CD4 Т-хелперного ответа. В частности, увеличивается количество перекрестно-реактивных CD4 Т-клеток. Под "перекрестно-реактивным" CD4 ответом подразумевается, что CD4 Т-клетка направленно воздействует на общие эпитопы штаммов вируса гриппа, возможно из разных монофилетических групп или линий. Обычно доступные вакцины против гриппа эффективны только против инфицирующих штаммов вируса гриппа, которые имеют гемагглютинин со сходными антигенными характеристиками. В том случае, когда инфицирующий (циркулирующий) вирус гриппа претерпел незначительные изменения, такие как точечная мутация или аккумулирование точечных мутаций, приводящие к аминокислотным заменам в поверхностных гликопротеинах, в частности в гемагглютинине (вариантный штамм вируса, подверг- 26024250 шийся антигенному дрейфу), вакцина все еще может обеспечивать защиту, хотя она может обеспечивать только ограниченную защиту, так как новые образовавшиеся варианты могут ускользать от иммунитета,сформированного предыдущей гриппозной инфекцией или вакцинацией. За ежегодные эпидемии ответственен антигенный дрейф, который происходит в межпандемические периоды времени (WileySkehel,1987, Ann. Rev. Biochem. 56, 365-394). Индуцирование перекрестно-реактивных CD4 Т-клеток дает дополнительное преимущество композиции по изобретению, заключающееся в том, что она может обеспечивать также перекрестную защиту, другими словами защиту от гетерологичных инфекций, т.е. инфекций, вызываемых циркулирующим штаммом вируса гриппа, который является вариантом (например дрейф-вариантом) штамма вируса гриппа, содержащегося в данной иммуногенной композиции. Это может быть полезным, когда размножение в яйцах или продуцирование в культуре клеток циркулирующего штамма затруднено, и в этом случае использование дрейф-варианта штамма становится рабочей альтернативой. Это также может быть полезным, когда субъекту была сделана первая и вторая вакцинации с интервалом в несколько месяцев или в один год, и штамм вируса гриппа в иммуногенной композиции,использованной для второй иммунизации, представляет собой дрейф-вариант штамма, использованного в композиции для первой вакцинации. Таким образом, адъювантный иммуногенный препарат против гриппа, как он определен здесь, обладает более высокой способностью индуцировать серозащиту и перекрестно-реактивные CD4 Т-клетки у вакцинированных пожилых субъектов или маленьких детей. Эта характеристика может быть связана с более высокой способностью реагировать на вариантный штамм, присутствующий в данной иммуногенной композиции. Это может оказаться важным преимуществом в пандемической ситуации. Например,иммуногенный препарат против гриппа, содержащий по меньшей мере один пандемический штамм, возможно любой из Н 5, Н 2, Н 9, Н 7 или Н 6, может обеспечить более высокую способность реагировать против пандемического варианта, т.е. дрейф-варианта указанного пандемического штамма(ов), либо после следующей вакцинации, либо после инфицирования указанным дрейф-вариантом штамма. Например,адъювантный вакцинный препарат содержит штамм A/Indonesian и способен вызывать перекрестный защитный и/или перекрестно-реактивный иммунный ответ против одного, предпочтительно более чем одного из дрейфующих штаммов, таких как штамм(ы) A/Hong Kong, A/Turkey, A/Vietnam и/или A/Anhui. Обнаружение перекрестно-реактивных CD4 Т-клеток после вакцинации вакциной против гриппа. После введения классической тривалентной вакцины против гриппа (через 3 недели) наблюдается существенное увеличение концентрации CD4 Т-клеток периферической крови, реагирующих на антигенный препарат штамма (цельный вирусный или расщепленный антиген), который гомологичен одному из антигенов, присутствующих в вакцине (H3N2: A/Panama/2007/99, H1N1: A/New Caledonia/20/99, В:B/Shandong/7/97) (см. пример III). Сравнимое увеличение концентрации можно наблюдать, если CD4 Тклетки периферической крови повторно стимулируются штаммами гриппа, классифицируемыми как дрейф-варианты штаммов (H3N2: A/Sydney/5/97, H1N1: A/Beijing/262/95, В: B/Yamanashi/166/98). Напротив, если CD4 Т-клетки периферической крови повторно стимулируются штаммами вируса гриппа,классифицируемыми экспертом в данной области как шифт-варианты штаммов (H2N2: A/Singapore/1/57,H9N2: A/Hongkong/1073/99), то после вакцинации заметного увеличения не наблюдается.CD4 Т-клетки, которые способны распознавать как гомологичные штаммы, так и дрейф-варианты штаммов гриппа, в настоящем документе называются "перекрестно-реактивными". Адъювантные препараты против гриппа, как они описаны здесь, способны демонстрировать гетеросубтипическую перекрестную реактивность, поскольку имеет место заметная перекрестная реактивность против дрейфвариантов штаммов вируса гриппа. Как указано выше, способность вакцинного препарата, содержащего по меньшей мере один пандемический штамм, быть эффективным против дрейф-вариантов пандемического(их) штамма(ов) может оказаться важной характеристикой в случае пандемии. Согласно вышеуказанным данным у человека были идентифицированы CD4 Т-клеточные эпитопы,общие для разных штаммов вирусов гриппа (Gelder С et al. 1998, Int Immunol. 10(2):211-22; Gelder CM etal. 1996 J Virol. 70(7):4787-90; Gelder CM et al. 1995 J Virol. 1995 69(12):7497-506). Заявленная дозированная форма иммуногенного препарата благодаря ее иммуногенным свойствам может обеспечить создание упреждающей стратегии вакцинации против угрозы пандемии гриппа у человека, включая накопление запаса предпандемической вакцины, чтобы лучше подготовиться к началу пандемии. Она также может быть способна обеспечить упреждающую стратегию вакцинации против циркулирующих штаммов, которые могут не точно соответствовать штамму(ам), присутствующим в вакцинной композиции. В конкретном воплощении адъювантный препарат может принести дополнительную пользу, обеспечив лучшую защиту против циркулирующих штаммов, которые подверглись значительному изменению (такому как, например, рекомбинация генов между двумя разными видами) в гемагглютинине (антигенный сдвиг), против которого имеющиеся в данный момент вакцины не эффективны. В частности, предпандемическая вакцина представляет собой вакцину, которая содержит по меньшей мере один пандемический штамм (возможно H5N1 (птичий грипп, сходный со штаммами, циркулирующими в данный момент в популяции птиц, и которая изготовлена, например, путем применения обратной генетики. Иммунитет, развившийся в ответ на предпандемическую вакцину, позволит иммун- 27024250 ной системе "примироваться" или "обучиться" и находиться в готовности и, тем самым, обеспечить более быстрое развитие защитных иммунных ответов после контакта с реальным пандемическим штаммом вируса, приводя к снижению восприимчивости к родственному пандемическому штамму вируса гриппа. Сразу после объявления WHO пандемии и идентификации конечного пандемического штамма (который может представлять собой или не представлять собой дрейф-вариант штамма) предпандемическая вакцина также обеспечит более быстрый иммунный ответ на пандемическую вакцину, когда она станет доступной. Ревакцинация и композиция, используемая для ревакцинации (композиция для ревакцинации). В одном из аспектов настоящего изобретения предложено применение(а) вируса гриппа или его антигенного препарата из первого штамма вируса гриппа и(б) адъюванта в виде эмульсии "масло в воде", как определено здесь, в изготовлении иммуногенного препарата, как он определена здесь, для защиты от гриппозных инфекций, вызываемых штаммом вируса гриппа, который представляет собой вариант указанного первого штамма вируса гриппа. Предложено также применение дозированной формы иммуногенного препарата, содержащей вирус гриппа или его антигенный препарат, из первого штамма вируса гриппа, и адъювант в виде эмульсии типа "масло в воде", как определено здесь, для для защиты человека или человеческой популяции от гриппозных инфекций, вызываемых штаммом вируса гриппа, который представляет собой вариант указанного первого штамма вируса гриппа. В еще одном аспекте настоящего изобретения предложено применение антигена вируса гриппа в изготовлении дозированной формы иммуногенного препарата против гриппа для ревакцинации людей,ранее вакцинированных (одной или двумя дозами) адъювантного препарата против гриппа, как он определен здесь. Также предложено применение дозированной формы иммуногенного препарата, содержащего вирус гриппа или его антигенный препарат, вместе с адъювантом в виде эмульсии типа "масло в воде", как определено здесь, для применения для ревакцинации людей, ранее вакцинированных (одной или двумя дозами) адъювантного препарата против гриппа, как он определен здесь. В одном из воплощений иммуногенный препарат для ревакцинации содержит вирус гриппа или его антигенный препарат, который имеет общие CD4 Т-клеточные эпитопы с вирусом гриппа или его антигенным препаратом, используемым для первой вакцинации. Термин "общий CD4 Т-клеточный эпитоп" обозначает пептиды/последовательности/эпитопы из разных антигенов, которые может распознавать одинаковая CD4 клетка (см. примеры описанных эпитопов в: Gelder С. et al., 1998, Int. Immunol. 10(2):211-22; Gelder C.M. et al., 1996, J. Virol. 70(7):4787-90; Gelder C.M. et al., 1995, J. Virol. 1995 69(12):7497-506). В одном из аспектов настоящего изобретения предложено применение вируса гриппа или его антигенного препарата из первого штамма вируса гриппа (возможно пандемического) в изготовлении адъювантного иммуногенного препарата, как он определен здесь, для защиты от гриппозных инфекций, вызываемых штаммом вируса гриппа, который представляет собой вариант указанного первого штамма вируса гриппа (возможно пандемического). Также предложена адъювантная иммуногенная композиция,содержащая вирус гриппа или его антигенный препарат из первого штамма вируса гриппа (возможно пандемического) и адъювант, как он определен здесь, для применения для защиты от гриппозных инфекций, вызываемых штаммом вируса гриппа, который представляет собой вариант указанного первого штамма вируса гриппа (возможно пандемического). В еще одном аспекте изобретения предложено применение вируса гриппа или его антигенного препарата в изготовлении иммуногенного препарата против гриппа для ревакцинации людей, ранее вакцинированных заявленным здесь адъювантным препаратом против гриппа или адъювантным препаратом против гриппа, содержащим вариант штамма вируса гриппа, где адъювант является таким, как определено здесь. Также предложена дозированная форма иммуногенного препарата против гриппа, содержащая вирус гриппа или его антигенный препарат вместе адъювантом в виде эмульсии типа "масло в воде", как определено здесь, для применения для ревакцинации людей, ранее вакцинированных заявленным здесь адъювантным препаратом против гриппа или адъювантным препаратом против гриппа, содержащим вариант штамма вируса гриппа, где адъювант является таким, как здесь определено. В еще одном аспекте настоящего изобретения предложен способ вакцинации человеческого населения или индивидуумов против одного штамма вируса гриппа с последующей ревакцинацией указанного человека или населения против варианта штамма вируса гриппа, включающий введение указанному человеку (1) первого препарата, содержащего вирус гриппа или его антигенный препарат из первого штамма вируса гриппа и адъювант, как он определен здесь, и (2) второго иммуногенного препарата, содержащего вариант штамма вируса гриппа указанного первого штамма вируса гриппа. В конкретном воплощении указанный первый штамм ассоциируется с пандемией или имеет потенциал ассоциироваться со вспышкой пандемии. В еще одном конкретном воплощении указанный вариантный штамм ассоциируется с пандемией или имеет потенциал ассоциироваться с пандемией. В частности, ревакцинацию выполняют препаратом против гриппа, содержащим по меньшей мере один штамм, который представляет собой циркулирующий пандемический штамм. В еще одном воплощении указанный вариантный штамм представляет собой дрейф-вариант штамма, возможно из ближайшей или отдаленной монофиле- 28024250 тической группы H3N2, используемого в качестве первого штамма. В еще одном воплощении указанный вариантный штамм представляет собой штамм В другой линии относительно линии первого штамма В(например B/yamagata или B/Victoria, относящиеся к разным линиям). Примирующий препарат и препарат для ревакцинации оба могут быть моновалентными или предпочтительно поливалентными, т.е. могут содержать по меньшей мере два штамма вируса гриппа, например бивалентная, тривалентная, квадривалентная или пентавалентная вакцина. Когда препарат(ы) является(ются) поливалентной(ыми), тогда по меньшей мере один штамм предпочтительно выбран из группы, состоящей из пандемического штамма,штамма В (такого как B/yamagata или B/Victoria), штамма H3N2 и возможно дрейф-варианта штамма,присутствующего в вакцине, используемой для первой вакцинации. Первая вакцинация предпочтительно может представлять собой две дозы, вводимые в пределах нескольких недель во время одного и того же текущего иммунного ответа, как определено выше. Типично,ревакцинацию выполняют через нескольких месяцев после первой вакцинации, предпочтительно по меньшей мере через 3 или 4 месяца после первой вакцинации, предпочтительно через 8-14 месяцев,предпочтительно приблизительно через 10-12 месяцев или более после первой вакцинации. Предпочтительно ревакцинацию выполняют по меньшей мере через 6 месяцев после первой(ых) вакцинации(ий). Предпочтительно ревакцинацию выполняют ближе к или в следующий сезон гриппа, например приблизительно через год после введения первого иммуногенного препарата. Препарат для ревакцинации также можно вводить каждый последующий год (третья, четвертая, пятая вакцинация и т.д.). Соответственно в одном из воплощений изобретения предложена схема вакцинации (или препарат для применения по указанной схеме), включающая (1) первичную вакцинацию, которую выполняют адъювантным препаратом по изобретению, вводимым одной или двумя дозами (предпочтительно с разнесением по времени, например с интервалом 3-6 недель или 3-4 недели), в любое время в течение года(т.е. не в сезон гриппа), и последующую (2) ревакцинацию, которую выполняют по меньшей мере через промежуток времени от 6 недель до одного года после первой вакцинации. Когда при первичной вакцинации вводят две дозы, тогда первой дозой вводят адъювантную тривалентную или квадривалентную сезонную вакцину, а затем второй дозой вводят пандемическую (например моновалентную) адъювантную вакцину. Предпочтительно ревакцинирующую дозу вводят по меньшей мере через 6 недель после первой вакцинации и в любое время в пределах обычного календаря иммунизации (например для детей) или на следующий сезон гриппа. Ревакцинация может быть выполнена любой коммерчески одобренной вакциной против гриппа (например классической тривалентной вакциной без адъюванта или адъювантной вакциной, такой как FluAd) или адъювантной композицией по изобретению (например адъювантной тривалентной или квадривалентной композицией). Предпочтительно препарат для ревакцинации содержит циркулирующие сезонные штаммы для данного сезона, которые могут представлять собой дрейф-вариант из штаммов, присутствующих в первичной вакцине. Эта схема вакцинации подходит для педиатрической группы населения, которая могла быть примирована в жизни раньше (например в возрасте до 6 или до 2 месяцев) имеющейся тогда вакциной и ревакцинирована препаратом, содержащим циркулирующие штаммы, которые могут представлять собой дрейф-варианты штаммов, присутствующих в первичном препарате. Иммуногенный препарат для ревакцинации (препарат для ревакцинации) может содержать антигенный препарат любого типа, либо инактивированный, либо живой аттенуированный. Он может содержать антигенный препарат такого же типа, например расщепленный вирус гриппа или его антигенный препарат, цельный вирион или очищенную НА и NA (субъединичную) вакцину, как и иммуногенный препарат, используемый для первой вакцинации. Препарат для ревакцинации может содержать антиген(ы) вируса гриппа такого же подтипа, как и используемый для первой вакцинации. Например, когда первую вакцинацию проводят после объявления пандемии, и ревакцинацию проводят позже, тогда ревакцинацию выполняют вакциной, содержащей штамм вируса гриппа (например H5N1 Vietnam) такого же подтипа, как в используемой для первой вакцинации (например H5N1 Vietnam). Альтернативно, препарат для ревакцинации может содержать дрейф-штамм антигена(ов) такого же подтипа, как и используемый для первой вакцинации, например H5N1 Indonesia. В еще одном воплощении указанный штамм вируса гриппа, используемый для ревакцинации, представляет собой шифт-штамм, т.е. отличается от штамма, используемого для первой вакцинации, например имеет НА или NA другого подтипа, такой какH5N2 (такой же подтип НА, как и H5N1, но другой подтип NA) или H7N1 (отличающийся от H5N1 подтип НА, но такой же подтип NA). Например, вакцинная композиция для первой иммунизации содержит штамм A/Indonesian, а композиция для ревакцинации содержит штамм(ы) A/Hong Kong, A/Turkey,A/Vietnam и/или A/Anhui. В одном из воплощений используют расщепленный вирус. Композиция для ревакцинации может быть адъювантной или неадъювантной. Неадъювантная композиция для ревакцинации может представлять собой Fluarix/a-Rix/lnflusplit, которую вводят внутримышечно и которая содержит три инактивированных расщепленных вирионных антигена, приготовленных из рекомендованных WHO штаммов вируса гриппа соответствующего сезона гриппа. В частности, штаммы вируса гриппа или их антигенные препараты выбраны в соответствии с материалами, распространяемыми Всемирной организацией здра- 29