Применение 4-хлор-5-{2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино}-2-метил-3-(2h) пиридазинона или его фармацевтически приемлемых солей для нейропротекции (варианты), лекарственный препарат (варианты) и способ лечения (варианты)

ПРИМЕНЕНИЕ 4-ХЛОР-5-2-[4-(6-ФТОР-1,2-БЕНЗ[d]ИЗОКСАЗОЛ-3 ИЛ)ПИПЕРИДИН-1-ИЛ]ЭТИЛАМИНО-2-МЕТИЛ-3-(2H) ПИРИДАЗИНОНА ИЛИ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫХ СОЛЕЙ ДЛЯ НЕЙРОПРОТЕКЦИИ Гачайи Иштван, Гиглер Габор,Агоштон Марта, Компагне Хайналка, или его фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственных препаратов,пригодных для улучшения когнитивной функции или получения нейропротективного эффекта. Лекарственные препараты, содержащие 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3 ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его терапевтически приемлемую соль, можно применять для лечения или предотвращения гибели нейронов,слабоумия, рассеянного склероза, болезни Крейцфельда-Якоба, синдрома Хантингтона, бокового амиотрофического склероза, болезни Паркинсона, нарушения памяти, потери памяти, амнезии,инсульта или для улучшения функций памяти или способности к обучению.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ЭГИШ ДЬДЬСЕРДЬЯР НЬИЛЬВАНОШАН МЮКД РЕСВЕНЬТАРШАШАГ (HU) 016142 Область техники, к которой относится изобретение Изобретение относится к применению 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) и его фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственных препаратов, пригодных для улучшения когнитивной функции или имеющих нейропротективный эффект, и соответствующим способам лечения. Уровень техники 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) и его фармацевтически приемлемые соли впервые были описаны в опубликованной международной заявке на патент . WO 03/010166 и в венгерской заявке на патент . P0103063. Из уроня техники известно, что 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1 ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) представляет собой потенциальное лекарственное средство, имеющее ценный нейролептический эффект, пригодный при лечении психозов, особенно шизофрении. Под выражением "нейролептический эффект" согласно существующему уровню техники понимают ослабляющий эффект нейролептического лекарственного средства в отношении смятения,бреда, галлюцинаций и психомоторного возбуждения, являющихся результатом психозов у пациентов,страдающих такими расстройствами. За последние десятилетия в круг интересов исследователей в области медицины был включен ряд заболеваний, которые связаны с гибелью нейронов, хроническим распадом нейронов, снижением умственных способностей или деменцией, возникающих в процессе старения. Такие расстройства включают рассеянный склероз, болезнь Крейцфельда-Якоба, синдром Хантингтона, боковой амиотрофический склероз (БАС), болезнь Паркинсона, инсульт и гибель нейронов вследствие внезапных черепно-мозговых травм или травм позвоночника, или в результате воздействия токсических веществ, или в результате ишемии. Характерными симптомами вышеупомянутых расстройств являются снижение способности к обучению, потеря памяти и, в некоторых случаях, снижение умственных способностей. Согласно предшествующему уровню техники, различают два типа памяти. Так называемая "кратковременная память" характеризуется удерживанием информации в течение короткого промежутка времени, длящегося от нескольких минут до нескольких часов. Выражение "долговременная память" относится к удерживанию информации в течение периодов, находящихся в диапазоне от часов до лет (Baddleyand Warington, J. Verb. Learn. Verb. Behav. 9, 176-179 [1970]; Wright et al., Science 229, 287-289 [1985]). Процесс передачи информации из кратковременной памяти к долговременной памяти называют консолидацией. Процесс возврата информации из кратковременной или долговременной памяти называют удержанием. Хотя тотальная амнезия является сравнительно редкой, частота возникновения расстройств, сопровождающихся помрачением памяти или снижением памяти, возрастает. Во всем мире восемнадцать миллионов человек страдают болезнью Альцгеймера, и в ближайшие годы ожидается значительное увеличение количества пациентов, страдающих данным заболеванием (Fletcher, Mol. Med. Today, 3/10 p. 429-434,1997). Краткое изложение сущности изобретения На основе вышеизложенных фактов целью данных исследований было разработать лекарственные препараты, пригодные для лечения тех расстройств и заболеваний, связанных с помрачением памяти и снижением памяти, которые не относятся к психозам. Вышеуказанная цель решена при помощи настоящего изобретения. Настоящее изобретение основано на неожиданном открытии, что 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2 бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H)пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, как доказано, эффективны при предотвращении гибели нейронов,происходящей в результате всеобщей церебральной ишемии, или при предотвращении повреждения нейронов вследствие фокальной церебральной ишемии в экспериментальных моделях на животных. Кроме того, было обнаружено, что похожий по химическому строению ризперидон 3-(2-(4-(6-фтор-1,2 бенз[d]изоксазол-3-ил)-1-пиперидинил)-этил)-6,7,8,9-тетрагидро-2-метил-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4-1 016142 один формулы (II) или другие нейролептические лекарственные средства лишены такого эффекта. Таким образом,можно сделать вывод, что вышеупомянутый нейропротективный эффект не связан с известным нейролептическим эффектом соединения формулы (I). Благодаря признанному в настоящее время нейропротективному эффекту 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор 1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) и его фармацевтически приемлемые соли можно применять для улучшения параметров поведения, которые являются результатом гибели нейронов при рассеянном склерозе, мотонейронной болезни (т.е. боковом амиотрофическом склерозе, БАС), болезни Крейцфельда-Якоба, синдроме Хантингтона и болезни Паркинсона. Кроме того, в ходе фармакологических экспериментов, проводимых с использованием 4-хлор-5-2[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I), было обнаружено, что соединение эффективно на тех моделях на животных in vivo, которые подходят для обнаружения усиления способности к обучению и функциональных эффектов, связанных с эффектами улучшения памяти, например, модель условной реакции пассивного избегания, модель приподнятого крестообразного лабиринта и так называемая модель узнавания предмета. В предшествующем уровне техники отсутствуют данные об эффекте усиления способности к обучению и эффектах улучшения памяти нейролептических лекарственных средств, например, похожего по химическому строению ризперидона формулы (II). Неожиданный нейропротективный и усиливающий память эффект, а также эффект улучшения способности к обучению, присущий 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил -3-(2H) пиридазинону, описанному выше, проявляются у лиц, не страдающих психозами. Следовательно, вышеупомянутые эффекты не зависят от нейролептического эффекта соединения формулы (I), известного из области техники. Краткое описание графических материалов На фиг. 1 представлен эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1 ил]этиламино-2-метил-3-(2H)-пиридазинона (T) и ризперидона (R) на модели перманентной очаговой ишемии у крыс. На фиг. 2 представлен эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1 ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона (тест) и ризперидона (ризп) на модели пассивного избегания. На фиг. 3 представлен эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1 ил]этиламино-2-метил-3-(2H)-пиридазинона (тест-вещество) при индуцированном скополамином ухудшении памяти на модели восьмилучевого радиального лабиринта у крыс. Отражены исходные правильные ответы, ошибки рабочей памяти и количество общих ошибок. На фиг. 4 представлен эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1 ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона на модели узнавания предмета (тест-вещество). Подробное описание изобретения Вследствие вышеупомянутых эффектов, 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) и его фармацевтически приемлемые соли пригодны для лечения заболеваний и расстройств, связанных с потерей способности к обучению, помрачением памяти или слабоумием, например, состояниями, возникающими в результате внезапного повреждения головного мозга или позвоночника, инсульта, спазмов головного мозга, гибели нейронов вследствие черепно-мозговых травм или травм позвоночника. Кроме того, слабоумие вследствие старения,ослабление когнитивных функций в результате воздействия токсических веществ также можно лечить введением 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. В настоящем описании под выражением "фармацевтически приемлемая соль" понимают соли, полученные в результате реакции 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) и фармацевтически подходящей нетоксичной неорганической или органической кислоты. Такие фармацевтически приемлемые соли представляют собой соли соединения формулы (I), например, с хлористым водородом, бромистым водородом, серной кислотой,фосфорной кислотой, азотной кислотой, уксусной кислотой, винной кислотой, малеиновой кислотой,-2 016142 фумаровой кислотой, молочной кислотой, яблочной кислотой, лимонной кислотой, бензолсульфокислотой, толуолсульфокислотой, метансульфокислотой и т.д. Нейропротективный эффект 4-хлор-5-[2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) тестировали на мышах-песчанках при помощи модели полной ишемии головного мозга путем двусторонней окклюзии сонной артерии и на крысах при помощи модели очаговой церебральной ишемии путем постоянной окклюзии центральной мозговой артерии. В качестве сравнительного вещества использовали ризперидон [3-(2-(4-(6-фтор-1,2 бенз[d]изоксазол-3-ил)-1-пиперидинил)этил)-6,7,8,9-тетрагидро-2-метил-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4 один]формулы (II). Эксперименты на модели полной ишемии головного мозга осуществляли на самцах мышейпесчанок массой 50-80 г. При выполнении хирургических операций животных подвергали анестезии при помощи диэтилового эфира, высвобождали сонные артерии в паратрахеальной области путем вентрального надреза в центральном участке. Сонные артерии отделяли от вагосимпатического нервного ствола и зажимали на 3 мин, используя артериальные зажимы, и впоследствии освобождали. Во время хирургических операций проверяли температуру тела животных и поддерживали ее в нормальном диапазоне(37,50,5C) с помощью инфракрасной лампы. Исследуемое вещество 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2 бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) и вещество сравнения ризперидон формулы (II) вводили в дозе, равной 0,1 мг/кг, внутрибрюшинно (в/б) через 45 мин после хирургической операции. Через четыре дня после хирургической операции животных анестезировали, используя пентобарбитал натрия (60 мг/кг внутрибрюшинно, 10 мл/кг), и мозг животных подвергали перфузии физиологическим раствором через левый желудочек. Перфузию продолжали далее в течение 30 мин с использованием фиксирующего раствора (200 мл/животное). Фиксирующий раствор содержал 0,1% глутаральдегида,4% параформальдегида и 0,2% пикриновой кислоты в 0,1 М фосфатном буфере (pH 7,4). После перфузии мозг удаляли из черепа животных и хранили в вышеупомянутом фиксирующем растворе в течение по меньшей мере одной недели при 4C в холодильнике. Часть мозга, содержащую дорсальный гиппокамп, иссекали на коронарные срезы толщиной 60 мкм,используя замораживающий микротом. Срезы промывали четыре раза встряхиванием в течение 30 мин в 0,1 М фосфатном буфере (pH 7,4), в течение чего коронарные срезы плавали на поверхности в промывающем растворе. После этого коронарные срезы окрашивали путем импрегнации серебром. Окрашивание способом импрегнации серебром включает (а) погружение образца в раствор для предварительной обработки дважды на 5 мин (раствор для предварительной обработки содержит водный 2% раствор гидроксида натрия и 0,875% раствор гидроксида аммония); (б) погружение образца в раствор для импрегнации на 10 мин (раствор 0,875% гидроксида аммония и 0,5% нитрата серебра в воде); (в) промывание образца дважды в течение 2 минут и затем в течение одной минуты в растворе 0,5% карбоната натрия и 0,01% нитрата аммония в водном 29,1% этаноле; (г) проявка в течение одной минуты путем погружения среза в раствор для проявки (1-1,5% формальдегида и 0,01% нитрата аммония в 9,9% этаноле); (д) фиксация три раза по три минуты каждый в 0,5% растворе уксусной кислоты. Окрашенные срезы головного мозга помещали в 0,1 М фосфатный буфер (pH 7,4) и затем в хромированный желатин, закрепляли на слайдах и дегидратировали (высушивали), обрабатывали ксилолом в течение 10 мин и прикрепляли покровные пластины с использованием гистологического адгезива DPX (Fluka). Двустороннее повреждение нейронов в области гиппокампа CA1 оценивали по шестибалльной шкале в соответствии с нижеследующим: 0 - не наблюдали повреждение; 1 - 0-10% повреждение нейронов; 2 - 10-30% повреждение нейронов; 3 - 30-50% повреждение нейронов; 4 - 50-70% повреждение нейронов; 5 - 70-90% повреждение нейронов; 6 - 90-100% повреждение нейронов. Средние баллы, измеренные в экспериментальной группе, выражали в процентах от средних баллов, наблюдаемых в случае контрольных животных. Статистическую оценку проводили путем непараметрического U-критерия МаннаУитни. Результаты суммированы в табл. 1.-3 016142 Таблица 1. Эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) и ризперидона на повреждение нейронов гиппокампа, наблюдаемое при полной ишемии, полученной путем двусторонней окклюзии сонной артерии у мышей-песчанок Вышеприведенные экспериментальные данные подтверждают, что 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) значительно уменьшил процент повреждения нейронов в области гиппокампа CA1 в дозе, равной 0,1 мг/кг при внутрибрюшинном (в/б) введении, в то время как ризперидон формулы (II) был неэффективен в той же самой дозе. В экспериментах, нацеленных на исследование эффекта соединения формулы (I) в модели фокальной ишемии, головного мозга использовали методику Brint с соавторами (Brint, S. Focal brain ischemia inipsilateral common carotid arteries. J. Cereb. Blood Flow Metab. 8: 474-485, 1988). Крыс-самцов линии Sprague-Dawley массой от 200 до 220 г анестезировали при помощи 60 мг/кг в/б пентобарбитала и вызывали окклюзию дистальной ветви центральной мозговой артерии и сонной артерии на той же стороне, используя электрохирургический каутер. Исследуемое соединение и вещество сравнения вводили внутрибрюшинно через 30 мин после хирургической операции. Через 48 ч после хирургической операции крыс снова анестезировали, используя 120 мг/кг в/б пентобарбитала, и мозг животных подвергали перфузии через левый желудочек сердца при помощи 3 мл 4% раствора 2,3,5 трифенилтетразолия хлорида (TTX). Через один час мозг животных удаляли и немедленно помещали в ледяной физиологический раствор на 1-2 мин. После этого мозг животных один за другим помещали в 8% раствор формалина. Через 24 ч сделали срезы головного мозга толщиной 1 мм и определяли зону поврежденной ткани мозга при помощи компьютеризованной системы записи и анализа изображений. Статистический анализ выполняли при помощи ANOVA и Duncan-теста. Результаты суммированы в табл. 2 и на фиг. 1.-4 016142 Таблица 2. Эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона и ризперидона на модели перманентной фокальной ишемии у крыс СКП - среднеквадратическая погрешность измерений На основе результатов, полученных на модели очаговой церебральной ишемии у крыс, следует сделать вывод, что 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил 3-(2H) пиридазинон формулы (I) уменьшил размер церебрального инфаркта статистически достоверным образом при введении в дозе, равной 0,03 мг/кг, в/б, в то время как ризперидон формулы (II), как показано, являлся неэффективным при том же самом диапазоне дозировок (0,01-0,3 мг/кг в/б). В экспериментах на животных, представленных выше, 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол 3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) предотвращал повреждение нейронов, являющееся результатом полной ишемии головного мозга, и повреждение ткани головного мозга вследствие фокальной ишемии головного мозга. Данные эффекты 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2 бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) являются неожиданными, поскольку ризперидон формулы (II), оказывающий эффект, похожий на известную нейролептическую активность 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона, не проявляет какого-либо нейропротекторного эффекта. Влияние 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3(2H) пиридазинона на процессы обучения и запоминания было исследовано на крысах с использованием тестов пассивного избегания, восьмилучевого радиального лабиринта и узнавания предмета. Тесты пассивного избегания проводили на крысах-самцах линии Wistar массой от 200 до 220 г(Charles River, Budapest). Экспериментальных животных содержали в комнате, имеющей циркадные периоды света-темноты, равные 12-12 ч. Свет включали в 6:00 утра. Относительная влажность в комнате была 6010%. Тесты проводили в аппарате так называемого переходного типа с пятью каналами, который подходит для тестирования обучения пассивному избеганию. Аппарат включает две камеры из плексигласа размером 202016 см. Одна из камер прозрачная,другая непрозрачная, покрашенная черной краской. Между камерами существует разделительная стенка,имеющая отверстие размером 7,58 см. Указанное отверстие может открываться или закрываться посредством управляемой компьютером задвижной двери. Переход крысы из одной камеры в другую детектируется двумя параллельными рядами фотоэлементов, и дверь автоматически закрывается после перехода животного. Пол камеры, покрашенной черной краской, состоит из прутьев, сделанных из нержавеющей стали, оборудованных электрической цепью, способной произвести удар электрическим током. На светлой (прозрачной) стороне аппарата над дверью имеется лампочка мощностью 10 Вт. Тесты проводили последовательно в течение двух дней с 24-часовой разницей во времени.-5 016142 Первая часть теста представляет собой так называемый период приобретения, когда животное способно приобрести специфическую информацию, характерную для ситуации (при входе в темную камеру происходит удар электрическим током). Вторая часть теста прой так называемый период удержания. На этой стадии тестируют способность животного помнить информацию, которая была собрана в первой части (при входе в темную часть произойдет удар электрическим током, следовательно, менее травматично оставаться в светлом отделении). На первый день тестирования (период приобретения) пронумерованных животных помещают в прозрачное отделение аппарата, в то время как раздвижная дверь закрыта. Через 30 с дверь открывают так, чтобы животное могло свободно войти в темную камеру. Одновременно запускали таймер для измерения задержки перехода. Задержка перехода представляет собой промежуток времени, который проходит между открытием раздвижной двери и переходом животного из светлого отделения в темное отделение. Когда животное вошло в темную камеру, таймер, измеряющий задержку, останавливают. Через 3 с после входа в темное отделение животное получало удар электрического тока силой 0,4 мА в течение 10 с в виде электрошока в лапу. Животные, принадлежавшие к группам абсолютного контроля, не получали электрошока в лапу. После электрошока животных немедленно удаляли из аппарата. Животным позволяли войти в темное отделение в течение периода времени, равного 180 с. Роль группы абсолютного контроля заключается в том, чтобы продемонстрировать, что животное способно помнить электрический шок. Это является сутью приобретения. Во время теста второго дня (удержание знаний) через 24 ч животных снова помещали в аппарат. Последующая часть процедуры была идентична таковой, выполнявшейся в первый день, с единственным отличием, что, за исключением одной группы, животные не получали удар электрическим током. Так же,как и в первый день, животным предоставляли 180 с. для входа в темную камеру. Во время экспериментов, направленных на определение эффекта 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2 бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этил-амино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I), на второй день за 60 мин до помещения животных в аппарат экспериментальным животным давали исследуемое вещество [соединение формулы (I)] и сравнительное вещество [ризперидон формулы (II)] или носитель (0,4% раствор метилцеллюлозы). Схему эксперимента выполняли перорально в дозе, равной 0,005 мг/кг, в объеме, равном 5 мл/кг. Статистическую обработку проводили путем многофакторного дисперсионного анализа. Различия между группами анализировали при помощи критерия Дункана. Результаты продемонстрированы в табл. 3 и на фиг. 2. На основе результатов тестов можно сделать вывод, что 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) значительно улучшал память в исключительно низкой дозе, равной 0,005 мг/кг. В той же самой дозе ризперидон не проявлял никакого эффекта. Таблица 3. Эффекты 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил) пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона и ризперидона на модели пассивного избегания у крыс-6 016142 Тест на модели восьмилучевого радиального лабиринта пригоден для исследования процессов обучения и запоминания и также для скрининга потенциальных лекарственных средств, оказывающих влияние на эти процессы. Аппарат состоит из восьмиугольной центральной платформы (диаметр 30 см, высота 25 см) и восьми ответвлений длиной 70 см, имеющих высоту 11 см, присоединенных к центральной платформе и имеющих противоположный конец, закрытый кормушкой. Основание лабиринта выполнено из нержавеющей стали, стены и потолок сделаны из плексигласа. Кормушки сделаны из нержавеющей стали. Во время исследований используют крыс-самцов линии Sprague-Dawley массой от 240 до 250 г. Цикл света-темноты для животных составляет 12-12 ч, свет включают в 7:00 утра. Эксперименты проводили в светлой части цикла (между 9:00 утра и 3:00 пополудни). Во время так называемого диетического периода животные частично голодают, поскольку побуждение голодом используют для обучения. По этой причине животных содержат на диете, состоящей из 2 кусочков стандартного кормового брикета в день, в течение одной недели. Через неделю масса тела животных достигает приблизительно 80-85% массы тела животных, питающихся нормально. Во время периода акклиматизации животных помещают в лабиринт на 10 мин в течение первых двух дней. В каждую кормушку кладут маленький кусочек печенья. Животным дают пищу только после посещения лабиринта. Во время периода обучения, который длится в течение 10-12 дней, животное должно научиться находить все кусочки печенья в лабиринте и избегать входа в те ответвления, в которых оно уже побывало. Через 5 мин пребывания в лабиринте животных возвращают в их клетки, куда помещают дневную порцию корма. Целью фазы отбора, выполняемой после фазы обучения, является отобрать для участия в эксперименте только тех животных, которые выучили задание, т.е. животных, которые ошибаются максимум в одном из трех испытаний (TE1 и ICR7, t5 мин). Передвижение животного подвергали мониторингу с использованием видеокамеры, которую устанавливали в соседней комнате. Во время самого эксперимента животных разделяли на три группы: C (контроль), S (скополамин) иT (тест). Животным из группы C как абсолютному контролю вводили носитель внутрибрюшинно (в/б)(физиологический раствор, время предварительной обработки: 30 мин). Группам S вводили в/б носитель и подкожно 0,5 мг/кг скополамина. Тест можно оценивать только в случае, если выполнение задачи группами S гораздо хуже, чем таковое для группы C. Группе T вводили внутрибрюшинно дозу 4-хлор-52-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этил-амино-2-метил-3-(2H) пиридазинона,равную 0,01 мг/кг, или 0,01 мг/кг ризперидона, соответственно, а также вводили подкожно дозу скополамина, равную 0,5 мг/кг. Во время испытаний животных помещали в лабиринт по отдельности и подвергали их движение мониторингу с использованием видеокамеры. После выполнения животными своего задания их удаляли из лабиринта. Оценка результатов включала определение следующих переменных величин: количество первоначальных правильных ответов; количество общих ошибок (TE ошибка); количество ответвлений, в которые входили неоднократно (WM ошибка), количество ответвлений, в которые не входили (RM ошибка),количество ответвлений, в которые входили до первой ошибки (ICR). Ошибка рабочей памяти (WM) показывает, что рабочая память (working memory) животного повреждена, поскольку животное не может запомнить вход в конкретное ответвление. Ошибка RM указывает на повреждение долгосрочной (справочной) памяти (reference memory), т.к. животное не может вспомнить, в какие ответвления нужно зайти(в настоящем эксперименте, все они). Статистическую оценку проводили дисперсионным анализом. Различия между группами определяли при помощи критерия Дункана. На основе результатов тестов, суммированных в табл. 4, можно сделать вывод, что 4-хлор-5-2-[4(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) в значительной степени предотвращал ухудшение памяти, возникающее вследствие введения скополамина, по всем трем параметрам, исследованным при введении в дозе, равной 0,01 мг/кг, внутрибрюшинно. В той же самой дозировке нейролептик ризперидон не показал значительного эффекта.-7 016142 Таблица 4. Эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона и ризперидона при индуцированном скополамином ухудшении памяти на модели восьмилучевого радиального лабиринта у крыс Тест узнавания предмета у крыс основан на наблюдении, что когда животные сталкиваются с незнакомой обстановкой, то они ее исследуют и осваивают доступную территорию. Они ведут себя схожим образом в случае незнакомых предметов, расположенных в пределах их территории. При организации настоящего эксперимента, за сутки до дня самих испытаний животных помещают в камеру, где им предоставляют две минуты на ознакомление с окружающей обстановкой. На первый день эксперимента два идентичных предмета (в настоящем опыте это пластиковая бутыль для ополаскивания и стеклянная бутыль) помещают в камеру и определяют длину периода, который животные тратят на изучение двух предметов. Продолжительность периода тестирования составляет 4-5 мин. Разница между продолжительностью периодов времени, потраченных на изучение каждого предмета, представляет собой так называемый индекс различения. На второй день (через 24 ч после первого периода тестирования) эксперимента в камеру помещают два различных предмета, из которых один известен животным, а другой неизвестен. В контрольной группе индекс различения не отличается значительно, что означает, что животные не могут запомнить предмет, с которым они познакомились в первый день. В случае, когда животным в первый день вводят лекарственное средство для улучшения памяти (например, перорально (п/о), за 60 мин до начала тестирования), животные в состоянии лучше вспоминать уже известные предметы, и индекс различения увеличивается в пользу неизвестного предмета. Было обнаружено, что 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) значительно улучшал функции памяти даже в исключительно низкой дозе, равной 0,01 мг/кг (табл. 5). Таблица 5. Эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) на модели узнавания предмета Если суммировать, то настоящее изобретение основано на неожиданном открытии, что 4-хлор-5-2[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы(I) и его фармацевтически приемлемые соли обладают значительным нейропротективным эффектом, по-8 016142 скольку указанные соединения пригодны для предотвращения гибели нейронов в CA1 области гиппокампуса, являющейся результатом полной ишемии головного мозга вследствие окклюзии сонных артерий у мышей-песчанок, и что указанные соединения значительно уменьшали повреждение головного мозга, возникающее в результате фокальной ишемии у крыс. Кроме того, неожиданно было обнаружено, что 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3 ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) и его фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, проявляют благоприятный эффект в отношении улучшения процессов обучения и запоминания. Таким образом, было сделано заключение, что 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2 бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) можно выгодно применять терапевтически при внезапном повреждении нейронов головного или спинного мозга ишемической или травматической природы, включая, без ограничения, различные формы инсульта,спазмы головного мозга, церебральную вазоконстрикцию, черепно-мозговые травмы или травмы позвоночника вследствие несчастного случая, хронические нейродегенеративные заболевания, включая мотонейронную болезнь (БАС), рассеянный склероз, болезнь Крейцфельда-Якоба, синдром Хантингтона, болезнь Паркинсона, и при любом заболевании, расстройстве или состоянии, где нейроны или их часть повреждены или разрушены, чтобы уменьшить скорость гибели нейронов и таким образом уменьшить степень прогрессирования болезни. Кроме того, 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил 3-(2H) пиридазинон формулы (I) и его фармацевтически приемлемые соли пригодны для лечения и/или предотвращения заболеваний, расстройств или состояния, где нарушены функции обучения или запоминания или имеется риск такого нарушения. Такими заболеваниями являются болезнь Альцгеймера, болезнь Корсакова, синдром Хантингтона и болезнь Паркинсона а также слабоумие вследствие старения, деменция цереброваскулярной природы или потеря когнитивных функций, возникающая в результате влияния токсических веществ. Вышеупомянутые эффекты не следуют из нейролептической активности 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор 1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I), известной из уровня техники, поскольку вещество сравнения ризперидон формулы (II) также имеет нейролептическую активность, но не обладает вышеупомянутыми нейропротективным и усиливающим когнитивные функции эффектами. Согласно первому аспекту настоящего изобретения, предложен способ применения 4-хлор-5-2-[4(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этил-амино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы(I) или его фармацевтически приемлемой соли для достижения нейропротективного эффекта или для влияния на когнитивные функции. Применение соединения формулы (I) обычно осуществляют при помощи лекрственных препаратов путем введения такого лекарственного препарата, содержащего терапевтически эффективное количество 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1 ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в таком лечении. Определение активной дозы 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1 ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли является задачей лечащего врача. Обычно суточная доза соединения формулы (I) составляет 0,01-300 мг/кг, и зависит, например, от типа, особенностей и тяжести излечиваемого заболевания, возраста, пола, физиологического состояния пациента, других режимов лечения и способа введения. Другим аспектом настоящего изобретения является применение 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2 бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) и его фармацевтически приемлемых солей для изготовления лекарственного препарата, пригодного для влияния на когнитивную функцию или для оказания нейропротективного эффекта. Согласно дополнительному аспекту настоящего изобретения предложены лекарственные препараты, содержащие 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил 3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель, возможно в смеси с одним или более фармацевтическим вспомогательным веществом,известным из уровня техники. Содержание активного ингредиента в лекарственном препарате согласно настоящему изобретению обычно составляет 0,1-95 мас.%, предпочтительно 1-50 мас.%, наиболее предпочтительно 5-30 мас.%. Лекарственные препараты согласно настоящему изобретению можно вводить перорально. Пероральные лекарственные препараты могут быть представлены в форме порошков, таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, жевательных таблеток, капсул, микрокапсул, гранул, драже, пастилок, растворов или эмульсий. Другие виды лекарственных препаратов согласно настоящему изобретению пригодны для парентерального введения, например, инъекционные препараты, пригодные для внутривенных, подкожных или внутрибрюшинных инъекций или в виде инфузионных препаратов. Различные виды лекарственных препаратов согласно настоящему изобретению предназначены для введения ректально (например, суппозитории), трансдермально (например, пластыри), в форме имплантов или местно (например, кремы, мази-9 016142 или пластыри). Твердые, мягкие или жидкие лекарственные препараты согласно настоящему изобретению можно получить способами, известными из уровня техники. Лекарственные препараты, пригодные для перорального введения согласно настоящему изобретению, содержат активный ингредиент 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1 ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль, вместе с носителем или наполнителем (например, лактоза, глюкоза, крахмал, кальция фосфат, микрокристаллическая целлюлоза), связывающим веществом (например, желатин, сорбит,поливинилпирролидон), разрыхлителем (например, кроскармелоза, натрия карбоксиметилцеллюлоза,кросповидон), добавками, облегчающими таблетирование (например, магния стеарат, тальк, полиэтиленгликоль, кремниевая кислота, кремния диоксид), или сурфактантом (например, натрия лаурилсульфат). Лекарственные препараты, пригодные для перорального введения, содержащие 4-хлор-5-2-[4-(6 фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, представленные в жидкой форме, могут представлять собой раствор, сиропы, суспензии или эмульсии и могут содержать добавки, облегчающие суспендирование(например, желатин, карбоксиметилцеллюлоза), растворители (например, вода, масла, глицерин, пропиленгликоль, этанол), буферные растворы (например, ацетатный, фосфатный или цитратный буферные растворы) и стабилизаторы (например, метил-4-гидроксибензоат). Парентеральные лекарственные препараты, содержащие 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в виде активного ингредиента, представляют собой стерильные изотонические растворы, которые могут содержать, помимо растворителя, буферные растворы и стабилизаторы. Мягкие лекарственные препараты, содержащие 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил) пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, содержат активный ингредиент, гомогенно диспергированный в основе препарата (например, полиэтиленгликоль, масло какао). Лекарственные препараты согласно настоящему изобретению, содержащие 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор 1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон или его фармацевтически приемлемую соль, можно получить согласно способам фармацевтической технологии, известным из уровня техники. Активный ингредиент гомогенно смешивают с твердым или жидким носителями и вспомогательными веществами и превращают в фармацевтическую лекарственную форму. Подходящие носители и вспомогательные вещества, а также подходящие способы описаны в уровне техники(Remington's Pharmaceutical Sciences, Edition 18, Mack Publishing Co., Easton, USA, 1990). Лекарственные препараты, содержащие 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, содержат активный ингредиент виде стандартной лекарственной формы. Дополнительной целью настоящего изобретения является способ влияния на когнитивную функцию или оказания нейропротективного эффекта путем введения пациенту, нуждающемуся в таком лечении, 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона или его фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли в терапевтически эффективном количестве. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H)пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления нейропротективных лекарственных препаратов. 2. Применение 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного препарата, пригодного для влияния на память или способность к обучению.- 10016142 3. Применение 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного препарата, пригодного для лечения или предотвращения заболеваний, связанных с гибелью нейронов, выбранных из слабоумия, рассеянного склероза, болезни Крейцфельда-Якоба, синдрома Хантингтона, бокового амиотрофического склероза, болезни Паркинсона или инсульта. 4. Применение 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного препарата, пригодного для улучшения памяти, лечения или предотвращения потери памяти, нарушений памяти или амнезии. 5. Нейропротективный лекарственный препарат, содержащий 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль и один или более фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество. 6. Лекарственный препарат, пригодный для лечения заболеваний, связанных с гибелью нейронов,выбранных из слабоумия, рассеянного склероза, болезни Крейцфельда-Якоба, синдрома Хантингтона,бокового амиотрофического склероза, болезни Паркинсона или инсульта, содержащий 4-хлор-5-2-[4-(6 фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) и один или более фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. 7. Лекарственный препарат, пригодный для улучшения памяти или способности к обучению, содержащий 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его кислотно-аддитивную соль в качестве активного ингредиента, и один или более фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество. 8. Лекарственный препарат, пригодный для улучшения памяти или предотвращения или лечения потери памяти, нарушений памяти или амнезии, который содержит 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с фармацевтически приемлемым носителем и/или вспомогательным веществом. 9. Способ изготовления лекарственного препарата по любому из пп.5-8, который включает смешивание 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли с подходящим количеством фармацевтически приемлемого носителя и, возможно, с другими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и превращение полученной таким образом смеси в фармацевтическую лекарственную форму. 10. Применение 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для предотвращения или лечения заболеваний, связанных с гибелью нейронов, выбранных из слабоумия, рассеянного склероза, болезни Крейцфельда-Якоба, синдрома Хантингтона, бокового амиотрофического склероза, болезни Паркинсона или инсульта. 11. Применение 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для улучшения способности к обучению или улучшения памяти, или для предотвращения или лечения потери памяти, нарушений памяти или амнезии. 12. Способ лечения заболеваний, связанных с гибелью нейронов, выбранных из слабоумия, рассеянного склероза, болезни Крейцфельда-Якоба, синдрома Хантингтона, бокового амиотрофического склероза, болезни Паркинсона или инсульта, который включает введение лицу, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3 ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. 13. Способ улучшения памяти или лечения или предотвращения потери памяти, нарушений памяти или амнезии, который включает введение лицу, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически приемлемого количества 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2 метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. 14. Способ улучшения способности к обучению, который включает введение лицу, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол 3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.- 11016142 Эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона (T) и ризперидона (R) на модели перманентной очаговой ишемии у крыс 4-хлор-5-2-[4-(6 фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинон (T)- 12016142 Эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино]-2-метил-3-(2H) пиридазинона (тест) и ризперидона (ризп) на модели пассивного избегания Фиг. 2 Эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона (тест-вещество) при индуцированном скополамином ухудшении памяти на модели восьмилучевого радиального лабиринта у крыс. Исходные правильные ответы. Фиг. 3 (продолжение) Эффект 4-хлор-5-2-[4-(6-фтор-1,2-бенз[d]изоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этиламино-2-метил-3-(2H) пиридазинона на модели узнавания предмета (тест-вещество).