Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита

Скачать PDF файл.

Формула / Реферат

Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита, включающий проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см3, отделяют и отмывают клетки костного мозга, отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде Mesencult, полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в паренхиму яичка экспериментального животного.

Текст

Смотреть все

СПОСОБ ПРОВЕДЕНИЯ КЛЕТОЧНОЙ ТЕРАПИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ХРОНИЧЕСКОГО ОРХОЭПИДИДИМИТАUS-A1-20130053336 ШОРМАНОВ И.С. и др. Острый эпидидимит: медицинские и социальные аспекты. Современные возможности патогенетической терапии. Экспериментальная и клиническая урология, 2012, 3, с. 71-78 [он-лайн] [найдено 13.07.2014] Найдено в Интернете: URL: http:// Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к урологии и предназначено для лечения экспериментальноого хронического орхоэпидидимита. Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита включает проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см 3, отделяют и отмывают клетки костного мозга,отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде Mesencult,полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в паренхиму яичка экспериментального животного."НАУЧНЫЙ ЦЕНТР УРОЛОГИИ ИМЕНИ АКАДЕМИКА Б.У. ДЖАРБУСЫНОВА" (KZ) Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к урологии, и предназначено для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита для усовершенствования общепринятых и разработки новых методов лечения и профилактики этого заболевания у людей. Острое воспаление яичка и придатка (орхоэпидидимит) является одним из наиболее частых урологических заболеваний. Более 27% мужчин на протяжении жизни переносят эпидидимоорхит. Статистические данные о частоте заболевания свидетельствуют об актуальности его изучения с различных точек зрения: патогенетической, диагностической, лечебной профилактической. Переход острого орхоэпидидимита в хронический чреват многими последствиям, среди которых наиболее серьезны нарушение проходимости придатка яичка, развитие склеротического и дистрофического процессов в яичке, что приводит к нарушению репродуктивной функции этих органов на стороне поражения. Тактика лечения острого и хронического орхоэпидидимита у пациентов строго дифференцирована,в некоторых случаях при остром орходидимите выполняют эпидидимотомию, ведущую к депрессии органа и уменьшению, а также проведение консервативного лечения путем антибиотикотерапии и физиотерапии (Чиненный В.Л. Острый эпидидимит в урологической практике. Автореферат на соиск. ученой степени канд. мед наук. 1991. Москва. с. 10-15). Недостатком известного способа лечения является то,что он не предназначен для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита. В доступных патентно-информационных источниках информации прототипа способу клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита не найдено. Задача изобретения - разработка способа клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита, позволяющего эффективно и доступно провести лечение. Способ клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита включает проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см 3, отделяют и отмывают клетки костного мозга, отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде Mesencult, полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка. Способ осуществляют следующим образом. В качестве объекта исследований используют беспородных кроликов, самцов, весом 3-4 кг, которым ранее осуществляют модель экспериментального хронического орхоэпидидимита путем введения в половые органы экспериментального животного бактериальной культуры. Введение осуществляют в паренхиму мошонки на глубину 3 мм в объеме 0,2 мл, в качестве бактериальной культуры используют смешанные культуры стафиллокок+стрептококк в титре 106 микробных тел. Клиническую картину экспериментального хронического орхоэпидидимита у экспериментального животного (кролик) определяют на 30 сутки, при проведении патоморфологических и ультразвуковых исследований экспериментальных животных. На 30 сутки от начала введения в половые органы экспериментального животного бактериальной культуры и при постановки диагноза экспериментального хронического орхоэпидидимита на основе патоморфологических и ультразвуковых исследований подопытным животным проводят антибактериальную терапию цефазолином в дозе 10 мг/кг. Затем выполняют забор костного мозга из крыла подвздошной кости в объеме 5 см 3 с гепаринизированным раствором Хенкса. После сепарации и отмывания ядросодержащих клеток от эритроцитов осадок ресуспендируют в питательной среде Mesencult, специальной среде для культивирования мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК). Клетки высевают в матрасики Т-25. По достижению монослоя клетки снимают диспергирующим раствором, отмывают раствором Хенкса. После центрифугирования осадок клеток ресуспендируют в физиологическом растворе. Концентрация клеток - 1 млн.клеток/см 3. Взвесь клеток в объеме 1 мл вводят в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка. Пример выполнения способа. Использовано животное - кролик самец, весом 3,5 кг. В паренхиму мошонки на глубину 3 мм в объеме 0,2 мл в качестве бактериальной культуры были введены смешанные культуры стафиллокок+стрептококк в титре 106 микробных тел. Клиническую картину экспериментального хронического орхоэпидидимита у данного экспериментального животного определили на 30 сутки,при проведении ультразвуковых исследований. После этого животному провели антибактериальную терапию цефазолином в дозе 10 мг/кг. Затем выполнили забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см 3, отделили и отмыли клетки костного мозга. После сепарации и отмывания ядросодержащих клеток от эритроцитов осадок ресуспендировали в питательной средеMesencult, специальной среде для культивирования мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК). Клетки высеяли в матрасики Т-25. По достижению монослоя клетки сняли со стекла диспергирующим раствором, отмыли раствором Хенкса. После центрифугирования осадок клеток ресуспендировали в физиологическом растворе. Концентрация клеток - 1 млн.клеток/см 3. Взвесь клеток в объеме 1 мл ввели в организм экспери-1 025096 ментальных животных в паренхиму яичка. Результаты гистоморфологического исследования после трансплантации аутологичных ММСК в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка. В материале ткань (паренхима) яичка с нормальной фиброзной стромой без признаков настоящего или прошлого воспаления или его организации. Сперматогенез выражен отлично во всех извитых канальцах - фиг. 1. В материале исследования - ткань яичка, нормального гистологического строения. Строма яичка нежно-волокнистая, хорошо васкуляризирована, без признаков воспаления или его организации. Во всех канальцах хорошо выражен сперматогенез (слегка "запустевшие" канальцы единичны: около 5%) - фиг. 2. В исследуемом материале - ткань яичка нормального гистологического строения. Строма нежноволокнистая, без признаков воспаления или его организации. Сперматогенез в извитых канальцах выражен хорошо: признаки "запустения" выражены очень слабо (около 10%) - фиг. 3. В исследуемом материале - нормальная ткань яичка. Признаков воспаления или его организации в строме и в паренхиме не обнаружено. Сперматогенез выражен хорошо ("полупустых" канальцев около 5%) - фиг. 4. В материале - ткань яичка без признаков бывшего или настоящего воспаления в строме и паренхиме яичка, а так же в прилежащих тканях. Сперматогенез отличный - фиг. 5. В исследуемом материале - ткань яичка нормального гистологического строения, без признаков воспаления или его организации в строме и в паренхиме. Сперматогенез отличный: "полупустых" канальцев менее 5% - фиг. 6. Результаты гистоморфологии после трансплантации аутологичных мононукларных клеток в паренхиму яичка показывают, что при этом наблюдается положительный эффект, выражающийся в следующем: нормализация фиброзной стромы; удовлетворительная/хорошая васкуляризация стромы; уменьшение "запустевших" канальцев. Таким образом, статистически доказано, что трансплантация аутологичных мононукларных клеток в паренхиму яичка приводят к уменьшению и исчезновению признаков воспаления и, главным образом,улучшает сперматогенез. Экспериментальным путем установлены нормальные показатели размеров яичек, показателей скорости кровотока, индекса резистентности и пульсационного индекса у лабораторных кроликов после проведенного лечения. Разработанный способ получения и введения ММСК в паренхиму яичка в организм лабораторных животных с целью изучения и внедрения новых методов лечения инфертильности может быть использован для экспериментального лечения этих заболеваний. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита, включающий проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см 3, отделяют и отмывают клетки костного мозга, отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде Mesencult, полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в паренхиму яичка экспериментального животного.

МПК / Метки

МПК: A61K 31/546, A61P 31/04, A61K 35/57

Метки: проведения, орхоэпидидимита, хронического, экспериментального, клеточной, лечения, терапии, способ

Код ссылки

<a href="http://easpatents.com/5-25096-sposob-provedeniya-kletochnojj-terapii-dlya-lecheniya-eksperimentalnogo-hronicheskogo-orhoepididimita.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита</a>

Похожие патенты