Композиции и способ лечения болезни шарко-мари-тусса

Есть еще 22 страницы.

Смотреть все страницы или скачать PDF файл.

Формула / Реферат

1. Композиция, включающая по меньшей мере два соединения, выбранные из D-сорбита; баклофена; пилокарпина; налтрексона; метимазола; мифепристона и кетопрофена или их солей, для лечения болезни Шарко-Мари-Тусса (CMT) или связанных с ней расстройств, выбранных из наследственной нейропатии с предрасположенностью к параличу от сдавления нерва (HNPP), синдрома Дежерина-Сотта (DSS) и врожденной гипомиелинизирующей нейропатии (CHN).

2. Композиция по п.1, где заболевание представляет собой CMT, предпочтительно CMT1А.

3. Фармацевтическая композиция, включающая одну из следующих комбинаций соединений:

мифепристон и метимазол,

пилокарпин и баклофен,

мифепристон и пилокарпин,

мифепристон и баклофен,

мифепристон и кетопрофен,

мифепристон и налтрексон,

пилокарпин и кетопрофен,

пилокарпин и налтрексон,

баклофен и кетопрофен,

кетопрофен и метимазол,

сорбит и налтрексол или

сорбит и метимазол,

или их солей и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

4. Фармацевтическая композиция по п.3, включающая дополнительное активное соединение.

5. Композиция по любому одному из пп.1-4, где указанные по меньшей мере два соединения являются связанными, ковалентно или нековалентно, с линкером или без него.

6. Композиция по п.5, где соединения являются связанными с расщепляемым или нерасщепляемым линкером.

7. Композиция по любому одному из пп.1-6, где указанные по меньшей мере два соединения содержатся с выделяющими лекарственное средство полимером, биомолекулой, мицеллой или липосомообразующими липидами, или эмульсиями типа масло в воде, или пегилированными или твердыми наночастицами, или микрочастицами для перорального, или парентерального, или интратекального введения, чтобы модифицировать распределение в тканях или биодоступность.

8. Применение комбинации по меньшей мере двух соединений, выбранных из D-сорбита; баклофена; пилокарпина; налтрексона; метимазола; мифепристона и кетопрофена, или их солей для получения лекарственного средства для лечения болезни Шарко-Мари-Тусса или связанных с ней расстройств, выбранных из HNPP, DSS и CHN.

9. Применение по п.8, где указанная комбинация включает

мифепристон и метимазол,

пилокарпин и баклофен,

мифепристон и пилокарпин,

мифепристон и баклофен,

мифепристон и кетопрофен,

мифепристон и налтрексон,

пилокарпин и кетопрофен,

пилокарпин и налтрексон,

баклофен и кетопрофен,

баклофен и налтрексон,

кетопрофен и метимазол,

сорбит и налтрексол или

сорбит и метимазол

или их соли.

10. Применение по любому из пп.8 или 9, где соединения скомбинированы для группового или раздельного введения, одновременно или последовательно.

11. Применение по п.8, где заболевание представляет собой CMT, предпочтительно CMT1А.

12. Способ лечения болезни Шарко-Мари-Тусса (CMT) или связанных с ней расстройств, выбранных из наследственной нейропатии с предрасположенностью к параличу от сдавления нерва (HNPP), синдрома Дежерина-Сотта (DSS) и врожденной гипомиелинизирующей нейропатии (CHN) у субъекта, где указанный способ включает одновременное, раздельное или последовательное введение субъекту по меньшей мере двух соединений, выбранных из D-сорбита; баклофена; пилокарпина; налтрексона; метимазола; мифепристона и кетопрофена или их солей.

13. Способ по п.12, в котором способ включает одновременное, раздельное или последовательное введение субъекту по меньшей мере двух следующих соединений:

мифепристон и метимазол,

пилокарпин и баклофен,

мифепристон и пилокарпин,

мифепристон и баклофен,

мифепристон и кетопрофен,

мифепристон и налтрексон,

пилокарпин и кетопрофен,

пилокарпин и налтрексон,

баклофен и кетопрофен,

баклофен и налтрексон,

кетопрофен и метимазол,

сорбит и налтрексол или

сорбит и метимазол,

или их солей.

Текст

Смотреть все

КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ ШАРКО-МАРИ-ТУССА Изобретение относится к композициям и способам для лечения болезни Шарко-Мари-Тусса и связанных с ней расстройств. Более конкретно, изобретение относится к комбинированной терапии для лечения указанного заболевания, воздействуя на экспрессию PMP22 у больного. Настоящее изобретение относится к композициям и способам лечения болезни Шарко-Мари-Тусса(Charcot-Marie-Tooth disease) и связанных с ней расстройств. Болезнь Шарко-Мари-Тусса ("CMT") представляет собой редкую генетическую периферическую полинейропатию. Поражая приблизительно 1 из 2500 индивидуумов, данное заболевание представляет собой наиболее частое наследственное поражение периферической нервной системы. Его начало обычно наступает во время первой или второй декады жизни, хотя оно может быть выявлено в раннем детстве. Течение заболевания хроническое, с постепенной нервно-мышечной дегенерацией. Заболевание является инвалидизирующим со случаями сопровождающей неврологической боли и крайнего мышечного бессилия. CMT является одной из наиболее изученных генетических патологий с приблизительно 30000 случаев во Франции. В то время как большинство пациентов, страдающих CMT, скрывают в себе дупликацию фрагмента хромосомы 17, содержащего ген миелина: PMP22 (форма CMT1 А), в различных формахCMT задействованы две дюжины генов. Соответственно, несмотря на моногенную первопричину, данная патология проявляет клиническую гетерогенность благодаря возможным генам модуляторам. Мутированные гены у пациентов, страдающих CMT, образуют кластеры вокруг тесно взаимосвязанных молекулярных путей, нарушая дифференцировку шванновских клеток или нейронов или изменяя взаимодействие данных клеток в периферических нервах.PMP22 представляет собой основной компонент миелина, экспрессируемый в компактном участке,по существу, всех миелиновых волокон в периферической нервной системе и продуцируемый преимущественно шванновскими клетками. Небольшая, 1,5-разовая сверхэкспрессия нормального белка PMP22 также наблюдается в шванновских клетках у пациентов, страдающих CMT, гетерозиготных по дупликации (в некоторых редких случаях, CMT1A-подобный фенотип может быть также связан со структурными мутациями в протеине PMP22) (Lupski et al., 1992; Suter et al., 1992; Roa et al., 1993; Thomas et al.,1997; SuterScherer, 2003; NaveSereda, 2007). Прямое свидетельство того, что доза аномального генаPMP22 вызывает CMT1A-подобный фенотип, было предоставлено с помощью трансгенных экспериментов на моделях грызунов со сверхэкспрессией белка PMP22 (Niemann et al., 1999; Perea et al., 2001;Robaglia-Schlupp et al., 2002; Meyer et al., 2006; SeredaNave, 2006). Более того, терапевтические воздействия онапристоном: специфическим ингибитором рецептора прогестерона (Sereda et al., 2003;Meyer zu Horste et al., 2007) и аскорбиновой кислотой (Passage et al., 2004) уменьшали данную экспрессию у трансгенных животных, улучшая или замедляя прогрессирование фенотипа заболевания. Существующие экспериментальные данные показывают, что протеин PMP22 является не только структурным компонентом миелиновых оболочек, но также важным регуляторным протеином, влияющим на множественные фенотипические особенности шванновских клеток. Точный механизм, связывающий аномальный уровень белка с изменением его функций в CMT1A-мутированной глиальной клетке, является не полностью понятным, но начинают появляться некоторые клеточные механизмы, потенциально объясняющие его вредные воздействия на биологию шванновской клетки. Проработка общедоступных данных, описывающих молекулярные механизмы и патологические проявления заболевания CMT1 А, позволила авторам изобретения отдать предпочтение некоторым функциональным клеточным модулям - транскрипционной регуляции гена PMP22, укладке/деградации белкаPMP22, пролиферации и апоптозу шванновских клеток, отложению и ремоделированию экстрацеллюлярного матрикса, иммунному ответу - как потенциальным приемлемым мишеням для терапевтических воздействий, касающихся CMT. Сочетанное влияние данных дерегулированных функциональных модулей на начало и прогрессирование патологических проявлений болезни Шарко-Мари-Тусса объясняет потенциальную эффективность комбинаторного лечения CMT. Вслед за начальным построением динамической модели патологии CMT последовал отбор имеющихся на рынке характерных лекарственных средств, нацеленных на функциональную регуляцию клеточных путей, релевантных для заболевания CMT1 А. Сущность изобретения Целью настоящего изобретения является предоставление новых терапевтических подходов в лечении CMT и связанных с ней расстройств. Изобретение также относится к композициям и способам модуляции экспрессии PMP22 у пациента. Авторы изобретения идентифицировали различные пути, которые можно регулировать у больного для улучшения CMT и связанных с ней расстройств. Авторы изобретения также получили несколько лекарственных средств, которые, в комбинации (комбинациях) или отдельно, могут эффективно влиять на такие пути, приводящие к развитию CMT и связанных с ней расстройств, и представили новую терапию для лечения данных нарушений. Вследствие этого изобретение предоставляет новые композиции и способы лечения болезни CMT и связанных с ней расстройств. Более конкретно, цель данного изобретения относится к применению комбинаций соединений для(получение лекарственного средства для) лечения CMT или связанных с ней расстройств, причем указанные соединения выбирают из агониста ГАМК-В-рецепторов, агониста мускариновых рецепторов,антагониста рецепторов стероидных гормонов, лекарственного средства, влияющего на D-сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов или частичного агониста, ингибитора передачи сигналов тироидными гормонами, активатора ERK (киназы, регулирующей внутриклеточные сигналы),ингибитора pAkt-киназы, ингибитора ЦОГ и любой их комбинации (комбинаций). Соединение может представлять собой лекарственное средство или антитело (или его фрагмент или производное), протеин или пептид. Другая цель изобретения относится к применению комбинаций соединений, выбранных из соединения А: D-сорбита (CAS 50-70-4) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; соединения В: баклофена (CAS 1134-47-0 и CAS 63701-56-4 для баклофена - гидрохлорида) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; соединения С: пилокарпина (CAS 92-13-7 и CAS 54-71-7 для пилокарпина гидрохлорида) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; соединения D: налтрексона (CAS 16590-41-3 и CAS 16676-29-2 для налтрексона гидрохлорида) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; соединения Е: метимазола (CAS 60-56-0) и его возможных солей и производных; соединения F: мифепристона (CAS 84371-65-3) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; монтелукаста (CAS 158966-92-8) и его возможных солей и производных; кетопрофена (CAS 22071-15-4 и CAS 57495-14-4 для кетопрофена натрия) и его возможных солей и производных; соединения G или отдельного его соединения для (получение лекарственного средства для) леченияCMT или связанных с ней расстройств. Другая цель изобретения относится к применению соединения, выбранного из ацетазоламида (CAS 59-66-5 и CAS 1424-27-7 для натриевой формы) и его возможных солей и производных; аминоглютетимида (CAS 125-84-8) и его возможных солей и производных; азтреонама (CAS 78110-38-0 и CAS 80581-86-8 существует для азтреонама динатрия) и его возможных солей и производных; баклофена (CAS 1134-47-0 и CAS 63701-56-4 для баклофена - гидрохлорида) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; балзалазида (CAS 80573-04-2, 150399-21-6 (динатриевой формы), 213594-60-6 (динатриевой формы) и 82101-18-6) и его возможных солей и производных; бикалутамида (CAS 90357-06-5) и его возможных солей и производных; бромокриптина (CAS 25614-03-3 и CAS 22260-51-1 для мезилатной формы) и его возможных солей и производных; буметанида (CAS 28395-03-1) и его возможных солей и производных; буспирона (CAS 36505-84-7 и CAS 33386-08-2 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; ципрофлоксацина (CAS 85721-33-1 и CAS 86393-32-0 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; клонидина (CAS 4205-90-7 и CAS 4205-91-8 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; циклоспорина A (CAS 59865-13-3) и его возможных солей и производных; дисульфирама (CAS 97-77-8) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; эксеместана (CAS 107868-30-4) и его возможных солей и производных; фелбамата (CAS 25451-15-4) и его возможных солей и производных; фенофибрата (CAS 49562-28-9) и его возможных солей и производных; финастерида (CAS 98319-26-7) и его возможных солей и производных; флумазенила (CAS 78755-81-4) и его возможных солей и производных; флунитразепама (CAS 1622-62-4) и его возможных солей и производных; фуросемида (CAS 54-31-9) и его возможных солей и производных; габапентина (CAS 60142-96-3) и его возможных солей и производных; галантамина (CAS 357-70-0 и CAS 1953-04-4 для гидробромидной формы) и его возможных солей и производных; галоперидола (CAS 52-86-8) и его возможных солей и производных; ибупрофена (CAS 15687-27-1 и CAS 31121-93-4 для натриевой соли) и его возможных солей и производных; изопротеренола (CAS 7683-59-2, CAS 51-30-9 для гидрохлоридной формы, CAS 5984-95-2 (изопротеренола (-)-гидрохлорида и его возможных солей и производных;L-карнитина (CAS 541-15-1 и CAS 6645-46-1 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; лиотиронина (Т 3) (CAS 6893-02-3 и CAS 55-06-1 для натриевой формы) и его возможных солей и производных; лозартана (CAS 114798-26-4 и CAS 124750-99-8 для калиевой формы) и его возможных солей и производных; локсапина (CAS 1977-10-2 и CAS 27833-64-3 и CAS 54810-23-0 для сукцинатной и гидрохлоридной форм соответственно) и его возможных солей и производных; метапротеренола (CAS 586-06-1 и CAS 5874-97-5 для сульфатной формы) и его возможных солей и производных; метараминола (CAS 54-49-9 и CAS 33402-03-8 для битартратной формы) и его возможных солей и производных; метформина (CAS 657-24-9 и CAS 1115-70-4 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; метимазола (CAS 60-56-0) и его возможных солей и производных; метилэргоновина (CAS 113-42-8 и CAS 57432-61-8, соответствующий малеатной соли) и его возможных солей и производных; метопирона (CAS 54-36-4) и его возможных солей и производных; метопролола (CAS 37350-58-6, CAS 51384-51-1 и CAS 56392-17-7 (тартратные формы и его возможных солей и производных; мифепристона (CAS 84371-65-3) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; надолола (CAS 42200-33-9) и его возможных солей и производных; налоксона (CAS 465-65-6 и CAS 51481-60-8 для гидрохлорида дигидрата) и его возможных солей и производных; налтрексона (CAS 16590-41-3 и CAS 16676-29-2 для налтрексона гидрохлорида) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; норфлоксацина (CAS 70458-96-7) и его возможных солей и производных; пентазоцина (CAS 359-83-1, CAS 7361-76-4 для (+)-формы пентазоцина, CAS 17146-95-1 для лактатной формы, CAS 64024-15-3 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; феноксибензамина (CAS 59-96-1, CAS 63-92-3 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; фенилбутирата (CAS 1716-12-7, который соответствует натриевой форме; CAS 1821-12-1, который соответствует 4-фенилбутировой кислоте) и его возможных солей и производных; пилокарпина (CAS 92-13-7 и CAS 54-71-7 для пилокарпина гидрохлорида) и его возможных солей,пролекарств лекарственного средства и производных; пиоглитазона (CAS 111025-46-8, CAS 112529-15-4 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; празозина (CAS 19216-56-9, CAS 19237-84-4 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; ралоксифена (CAS 84449-90-1, CAS 82640-04-8 для гидрохлоридной формы) и его возможных солей и производных; рифампина (CAS 13292-46-1) и его возможных солей и производных; симвастатина (CAS 79902-63-9) и его возможных солей и производных;D-сорбита (CAS 50-70-4) и его возможных солей, пролекарств лекарственного средства и производных; соединения спиронолактона (CAS 52-01-7) и его возможных солей и производных; тамоксифена (CAS 10540-29-1, CAS 54965-24-1 для цитратной формы) и его возможных солей и производных; трилостана (CAS 13647-35-3) и его возможных солей и производных; вальпроевой кислоты (CAS 99-66-1, CAS 1069-66-5 и CAS 76584-70-8 для натриевой формы и формы дивальпроекса натрия соответственно) и ее возможных солей и производных; карбамазепина (CAS 298-46-4, CAS 85756-57-6 для дигидратной формы) и его возможных солей и производных; кетопрофена (CAS 22071-15-4 и CAS 57495-14-4 для кетопрофена натрия) и его возможных солей и производных; флубипрофена (CAS 5104-49-4, CAS 51543-39-6 и CAS 51543-40-9, соответствующие энантиомерамS и R; CAS 56767-76-1, соответствующий натриевой форме) и его возможных солей и производных; диклофенака (CAS 15307-86-5, CAS 15307-79-6 для натриевой формы; CAS 15307-81-0 для калиевой формы) и его возможных солей и производных; мелоксикама (CAS 71125-38-7) и его возможных солей и производных; такролимуса (CAS 104987-11-3, CAS 109581-93-3 для моногидратной твердой формы) и его возможных солей и производных; диазепама (CAS 439-14-5) и его возможных солей и производных; дутастерида (CAS 164656-23-9) и его возможных солей и производных; индометацина (CAS 53-86-1, CAS 74252-25-8 и 7681-54-1 для 2 натриевых форм) и его возможных солей и производных; динопростона (CAS 363-24-6) и его возможных солей и производных; карбахола (CAS 51-83-2, CAS 462-58-8, который соответствует холинкарбонату (сложному эфиру и его возможных солей и производных; эстрадиола (CAS 50-28-2 и 57-91-0 для бета- и альфа-форм соответственно) и его возможных солей и производных; куркумина (CAS 458-37-7) и его возможных солей и производных; лития (CAS 7439-93-2, CAS 554-13-2 и 919-16-4 для карбонатной и цитратной безводных форм;CAS 7447-41-8 для хлоридной формы) и его возможных солей и производных; рапамицина (CAS 53123-88-9) и его возможных солей и производных; бетаина (CAS 2218-68-0, для хлоралбетаина; CAS 107-43-7, 17146-86-0, 590-46-5, 590-47-6 соответствуют формам бетаина, бетаина моногидрата, бетаина гидрохлорида и бетаина моногидрата) и его возможных солей и производных; трегалозы (CAS 4484-88-2) и ее возможных солей и производных; амилорида (CAS 2016-88-8, соответствующий безводному гидрохлориду; CAS 2609-46-3, соответствующий амилориду (определенному в IPA и его возможных солей и производных; альбутерола (CAS 18559-94-9, CAS 51022-70-9 для сульфатной формы) и его возможных солей и производных,или их комбинации (комбинаций) для (получение лекарственного средства для) лечения CMT или связанных с ней расстройств. Дополнительная цель данного изобретения относится к применению комбинации по меньшей мере двух соединений, выбранных из D-сорбита (соединение А); баклофена (соединение В); пилокарпина (соединение С); налтрексона (соединение D); метимазола (соединение Е); мифепристона (соединение F) и кетопрофена (соединение G) или солей или пролекарств лекарственного средства, для (получение лекарственного средства для) лечения CMT или связанных с ней расстройств. Дополнительная цель данного изобретения относится к применению соединения, выбранного из Dсорбита (соединение А); баклофена (соединение В); пилокарпина (соединение С); налтрексона (соединение D); метимазола (соединение Е); мифепристона (соединение F) и кетопрофена (соединение G) или солей, пролекарств лекарственного средства или их агонистов, для (получение лекарственного средства для) лечения CMT или связанных с ней расстройств. Дополнительная цель данного изобретения относится к применению комбинации по меньшей мере двух соединений, выбранных из ацетазоламида; аминоглютетимида; азтреонама; баклофена; балзаразида; бикалутамида; бромокриптина; буметанида; буспирона; ципрофлоксацина; клонидина; циклоспорина А; дисульфирама; эксеместана; фелбамата; фенофибрата; финастерида; флумазенила; флунитразепама; фуросемида; габапентина; галантамина; галоперидола; ибупрофена; изопротеренола; L-карнитина; лиотиронина (Т 3); лозартана; локсапина; метапротеренола; метараминола; метформина; метимазола; метилэргоновина; метопирона; метопролола; мифепристона; монтелукаста; надолола; налтрексона; налоксона; норфлоксацина; пентазоцина; феноксибензамина; фенилбутирата; пилокарпина; пиоглитазона; празозина; ралоксифена; рифампина; симвастатина; спиронолактона; тамоксифена; трилостана; вальпроевой кислоты; карбамазепина; кетопрофена; флубипрофена; диклофенака; мелоксикама; D-сорбита; такролимуса; диазепама; дутастерида; индометацина; динопростона; карбахола; эстрадиола; куркумина; лития; рапамицина; бетаина; трегалозы; амилорида; альбутерола или солей, пролекарств лекарственного средства или их агонистов, для (получение лекарственного средства для) лечения CMT или связанных с ней расстройств. Другая цель изобретения относится к применению комбинации по меньшей мере двух соединений,выбранных из D-сорбита (соединение А); баклофена (соединение В); пилокарпина (соединение С); налтрексона (соединение D); метимазола (соединение Е); мифепристона (соединение F), кетопрофена (соединение G) или солей, пролекарств лекарственного средства или их агонистов, для (получение лекарственного средства для) уменьшения экспрессии PMP22 у больного, страдающего CMT или связанными с ней расстройствами. Другая цель изобретения относится к применению комбинации по меньшей мере двух соединений,выбранных из ацетазоламида; аминоглютетимида; азтреонама; баклофена; балзаразида; бикалутамида; бромокриптина; буметанида; буспирона; ципрофлоксацина; клонидина; циклоспорина А; дисульфирама; эксеместана; фелбамата; фенофибрата; финастерида; флумазенила; флунитразепама; фуросемида; габапентина; галантамина; галоперидола; ибупрофена; изопротеренола; L-карнитина; лиотиронина (Т 3); лозартана; локсапина; метапротеренола; метараминола; метформина; метимазола; метилэргоновина; метопирона; метопролола; мифепристона; монтелукаста; надолола; налтрексона; налоксона; норфлоксацина; пентазоцина; феноксибензамина; фенилбутирата; пилокарпина; пиоглитазона; празозина; ралоксифена; рифампина; симвастатина; спиронолактона; тамоксифена; трилостана; вальпроевой кислоты; карбамазепина; кетопрофена; флубипрофена; диклофенака; мелоксикама; D-сорбита; такролимуса; диазепама; дутастерида; индометацина; динопростона; карбахола; эстрадиола; куркумина; лития; рапамицина; бетаи-4 019402 на; трегалозы; амилорида; альбутерола или солей, пролекарств лекарственного средства или их агонистов, для (получение лекарственного средства для) уменьшения экспрессии PMP22 у больного, страдающего CMT или связанными с ней расстройствами. Дополнительной целью данного изобретения является фармацевтическая композиция, включающая комбинацию по меньшей мере двух соединений, выбранных из группы D-сорбита, баклофена, пилокарпина, налтрексона, метимазола, мифепристона и кетопрофена, солей, пролекарств лекарственного средства и фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества. В предпочтительном варианте осуществления вышеуказанные лекарственные средства применяются в комбинации (комбинациях) для предоставления наиболее результативного эффекта. В этом отношении дополнительная цель данного изобретения состоит в применении комбинации лекарственных средств для лечения CMT или связанных с ней расстройств, причем указанная комбинация выбрана из антагонистов рецепторов стероидных гормонов и соединения, выбранного из агониста мускариновых рецепторов, агониста ГАМК-В-рецепторов, активатора ERK, ингибитора pAkt-киназы; лекарственного средства, воздействующего на передачу сигналов тиреоидными гормонами; лекарственного средства, воздействующего на D-сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов, ингибитора ЦОГ; агониста мускариновых рецепторов и соединения, выбранного из агониста ГАМК-В-рецепторов,активатора ERK, ингибитора pAkt-киназы, лекарственного средства, воздействующего на передачу сигналов тиреоидными гормонами; лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагонистов опиоидных рецепторов; ингибитора ЦОГ; агониста ГАМК-В-рецепторов и соединения, выбранного из активатора ERK, ингибитора pAktкиназы, лекарственного средства, воздействующего на передачу сигналов тиреоидными гормонами; лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов и ингибитора ЦОГ; активатора ERK и соединения, выбранного из ингибитора pAkt-киназы, лекарственного средства,воздействующего на передачу сигналов тиреоидными гормонами; лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов, ингибитора ЦОГ; ингибитора pAkt-киназы и лекарственного средства, воздействующего на передачу сигналов тиреоидными гормонами; соединения, выбранного из лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов и ингибитора ЦОГ; лекарственного средства, воздействующего на передачу сигналов тиреоидными гормонами; и лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, и антагониста опиоидных рецепторов или ингибитора ЦОГ; лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, и антагониста опиоидных рецепторов или ингибитора ЦОГ; антагониста опиоидных рецепторов и ингибитора ЦОГ. В конкретном аспекте изобретение относится к применению вышеуказанных соединений, или композиций, или комбинаций для лечения CMT. Изобретение дополнительно предоставляет способ лечения CMT или связанных с ней расстройств,в частности CMT, включая введение нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества любого соединения, или комбинации соединений, или композиции, которые раскрыты выше. Предпочтительный способ включает введение комбинации по меньшей мере двух соединений, выбранных из соединения А,соединения В, соединения С, соединения D, соединения Е, соединения F и соединения G или их солей или пролекарств лекарственных средств. В этом отношении особой целью данного изобретения является способ лечения CMT1A у больного,включая введение больному эффективного количества соединения или комбинации соединений, которые раскрыты выше. Любой из различных вариантов применения или способов лечения, раскрытых в данном описании,может также включать необязательную стадию выявления пациента, как страдающего CMT или связанными с ней расстройствами, в частности CMT1 А, так и распознавание индивидуума с риском развитияCMT или связанных с ней расстройств, в частности CMT1 А. В этом отношении дополнительной целью данного изобретения является способ лечения CMT, в частности CMT1A, причем способ включает (1) оценку, страдает ли больной CMT, в частности CMT1A,и (2) лечение больного, страдающего CMT, в частности CMT1A, эффективным количеством комбинации соединений, которые описаны выше. Определение, страдает ли больной CMT, в частности CMT1A, может быть проведено посредством различных тестов, известных per se в данной области, таких как анализы ДНК. Такой диагноз может быть поставлен, например, посредством оценки экспрессии или функцииPMP22 у пациента (в образце от пациента) до и во время терапии. Дополнительной целью данного изобретения является композиция, включающая PMP22 или фрагмент PMP22 в качестве иммуногена для вакцинации пациентов. Дополнительной целью данного изобретения является вакцина, включающая анти-PMP22 антитело или фрагмент или производное такого антитела. Изобретение может быть применено для лечения CMT или связанных с ней расстройств у любых млекопитающих, в частности людей, страдающих более предпочтительно CMT1A. Краткое описание чертежей Фиг. 1. Воздействие выбранных лекарственных средств на уровень экспрессии PMP22 мРНК. Фиг. 2. Воздействие выбранных лекарственных средств на уровень экспрессии PMP22 мРНК. Фиг. 3. Воздействие выбранных лекарственных средств в различных дозах на уровень экспрессииPMP22 мРНК. Фиг. 4. Воздействие выбранных лекарственных средств на уровень экспрессии белка PMP22. Фиг. 5. Воздействие комбинации пилокарпина и налтрексона на уровень экспрессии белка PMP22. Фиг. 6. Результаты оценки движения самок крыс в Bar-тесте на всем протяжении изучения вида лечения, представленные в форме трендов (направлений): А - метимазол; В - пилокарпин. Фиг. 7. Среднее значение показателей работоспособности bar-теста, зарегистрированное в данном тесте после 16 недель лечения: А - метимазол; В - пилокарпин. Фиг. 8: Электрофизиологическое определение амплитуды потенциалов чувствительного нерва у крыс, страдающих CMT, пролеченных лекарственными средствами в течение 20 недель: А - метимазол; В - пилокарпин. Подробное описание изобретения Настоящее изобретение предоставляет новые терапевтические подходы для лечения CMT или связанных с ней расстройств. Изобретение раскрывает новое применение лекарственных средств или комбинаций лекарственных средств, которые позволяют эффективно корректировать такие заболевания, и может быть применено для любого млекопитающего. В контексте настоящего изобретения термин "расстройства, связанные с CMT" обозначает другие заболевания, связанные с аномальной экспрессией протеинов миелина, которые включают PMP22. Многообразие данных заболеваний обусловлено многообразием ролей PMP22.PMP22 является, прежде всего, основным компонентом миелина, экспрессируемым в компактном участке, по существу, всех миелиновых волокон периферической нервной системы. Протеин PMP22 взаимодействует с другим структурным протеином Р 0 миелина, и вследствие этого измененное соотношение протеинов PMP22/Р 0 может влиять на компактность миелиновых оболочек (Vallat et al., 1996;D'Urso et al., 1999). Как продемонстрировано исследованиями in vitro, протеин PMP22 также задействован в регуляции распределения клеток Rho-зависимым образом и, таким образом, может воздействовать на образование оболочки аксона (Brancolini et al., 1999). Более того, PMP22 формирует комплексы с интегринами 64 и мог бы быть связующим звеном во взаимодействии шванновских клеток с экстрацеллюллярной матрицей (Amici et al., 2006; Amici et al., 2007). Более того, повышенный уровень белкаPMP22 может изменять Arf6-регулируемый плазменно-мембранный эндосомальный путь рециркуляции и приводить к накоплению PMP22 в поздних эндосомах (Chies et al., 2003). Было также продемонстрировано, что сверхэкспрессируемый протеин PMP22 нарушает сортинг внутриклеточного белка и перегружает механизм деградации белка в шванновских клетках (Notterpek et al., 1997; Tobler et al., 2002; Fortunet al., 2003; Fortun et al., 2006; Fortun et al., 2007; Khajavi et al., 2007). В результате, PMP22 непосредственно задействован в регулировании клеточной пролиферации и запрограммированной смерти клеток(Sancho et al., 2001; Atanasoski et al., 2002), и было показано, что мутантный протеин PMP22 вызывает значительную реорганизацию и аберрантную экспрессию аксональных ионных каналов (Ulzheimer et al.,2004; DevauxScherer, 2005). PMP22 также экспрессируется в некоторых частях головного мозга человека (Ohsawa Y. et al., 2006). Очевидна его роль в нарушениях настроения (Le-Niculescu Н. et al., 2008) и в шизофрении (Dracheva S. et al., 2006). PMP22 играет роль в создании гематоэнцефалитического барьера(Roux K.J. et al., 2004), который часто поврежден при рассеянном склерозе и нейродегенеративных заболеваниях. Следовательно, термин "расстройство, связанное с CMT" обозначает болезнь Альцгеймера (AD),сенильную деменцию типа AD (SDAT), болезнь Паркинсона, деменцию с тельцами Леви, сосудистую деменцию, аутизм, умеренные когнитивные нарушения (MCI), возрастное нарушение памяти (AAMI) и проблему, связанную со старением, постэнцефалитический паркинсонизм, шизофрению, депрессию, биполярное заболевание и другие нарушения настроения, заболевание Гентингтона, заболевания двигательных нейронов, включая боковой амиотрофический склероз (ALS), рассеяный склероз, идиопатические нейропатии, диабетическую нейропатию, токсическую нейропатию, включая нейропатию, индуцированную лечением лекарственными средствами, нейропатии, вызванные ВИЧ, радиацией, тяжелыми металлами и состояниями дефицита витаминов, прионовые нейродегенерации, включая болезнь Крейтцфельдта-Якоба (CJD), губчатую энцефалопатию крупного рогатого скота (BSE), GSS, FFI, синдром Куру и синдром Альперса. В предпочтительном варианте осуществления расстройство, связанное с CMT, обозначает нейропатию, такую как демиелинизирующие нейропатии, включая HNPP (наследственная нейропатия с предрасположенностью к параличу от сдавления нерва), CMT1 В, CMT1 С, CMT1D, CMT1 Х, CMT2 А, CMT2 В,CMT2D, CMT2 Е, CMT2-Р 0, тяжелые демиелинизирующие нейропатии DSS (синдром Дежерина-Сотта),CHN (врожденная гипомиелинизирующая нейропатия), CMT4 А, CMT4 В 1, CMT4 В 2, CMT4D, CMT4F,-6 019402CMT4, AR-CMT2 А, HSN1. Как используется в данном описании, "лечение" расстройства включает терапию, предотвращение,профилактику, торможение развития или уменьшение боли, обусловленной расстройством. Термин "лечение" включает, в частности, регулирование прогрессирования заболевания и сопровождающих симптомов. Также термин "соединение" обозначает химические соединения, как конкретно названо в заявке, а также любую фармацевтическую композицию с приемлемой солью, гидратом, сложным эфиром, эфиром, изомерами, рацематами, конъюгатами, пролекарствами лекарственных средств. Термин "антитело" обозначает моноклональное или поликлональное антитело. Термин "фрагмент" обозначает, без ограничения, цепь иммуноглобулина, Fab- или Fab'-фрагмент или участок CDR. Производное антитела включает одноцепочечное антитело, гуманизированное антитело, химерное антитело и т.д. Фрагменты антитела или производные будут сохранять эпитопную специфичность антитела. Также термин "комбинация" обозначает лечение, в котором по меньшей мере два лекарственных средства вводятся пациенту совместно, чтобы вызвать биологический эффект. В комбинированной терапии по меньшей мере два лекарственных средства могут быть введены вместе или раздельно, в одно и то же время или последовательно. Также по меньшей мере два лекарственных средства могут быть введены через различные пути введения и протоколы. Изобретение показывает, что функциональность белка (протеинов) периферического миелина может быть модулирована с помощью лекарственных средств, воздействующих на мускариновые рецепторы, ГАМК-В-рецепторы, рецепторы стероидных гормонов, опиоидные рецепторы, сорбитовые сигнальные пути или активацию ERK (киназу, регулирующую внутриклеточные сигналы), ингибиторов ЦОГ,ингибиторов передачи сигналов тиреоидными гормонами и/или ингибирующих pAkt-киназу, позволяя,тем самым, разработать новые терапевтические подходы лечения CMT и связанных с ней расстройств. Более того, изобретение раскрывает идентификацию и активность конкретных лекарственных средств, которые либо в комбинации (комбинациях), либо отдельно модулируют вышеуказанные пути и могут быть применены в лечении указанных заболеваний. Более конкретно, изобретение показывает, что соединение А, соединение В, соединение С, соединение D, соединение Е, соединение F и соединение G либо в комбинации (комбинациях), либо отдельно,предпочтительно в комбинации, могут быть применены в лечении CMT или связанных с ней расстройств.D-сорбит (соединение А). Данное лекарственное средство, C6H14O6, является компонентом промывания мочевого пузыря, слабительных и гиперосмотических классов. Оно было одобрено для применения i) при промывании мочевого пузыря (у взрослых) для предупреждения инфекции при оперативном вмешательстве на предстательной железе или оперативных вмешательствах на других отделах мочевыводящих путей; ii) отравлениях (у взрослых), когда его смешивают с активированным углем; и iii) при запорах (у взрослых), действуя как гиперосмотическое слабительное: оно действует посредством задержки жидкости в толстой кишке, что помогает усилить деятельность мускулатуры кишечника. Намеченный метаболический путь при заболевании CMT1 А. Киназа, регулирующая внутриклеточные сигналы (ERK) и Akt-пути, регулирует экспрессию генаPMP22 противоположным образом: транскрипция гена PMP22 повышается посредством активированного PI3K/pAkt:/GSK-3-сигнального пути и подавляется посредством Ras/MEK/ERK-киназного каскада. Соединение A способно активировать киназы ERK/JNK/p38 и, вероятно, уменьшает экспрессию генаPMP22 посредством модулирования активности ERK-киназы (Bogoyevitch et al., 1995; Galvez et al., 2003). Неправильно упакованные в результате сверхэкспрессии гена PMP22 агрегаты белка PMP22 являются неотъемлемым фенотипическим признаком CMT1 А шванновских клеток и могут воздействовать на динамику внутриклеточной мембраны, сортинг и деградацию белка. Таким образом, D-сорбит, как клеточный осмолитик, который обладает шапероновой активностью, может дополнительно подавлять пагубное воздействие сверхэкспрессируемого гена PMP22 благодаря нарастающей производительности внутриклеточного механизма, связанного с укладкой и клиренсом белка (Fortun et al., 2005; Fortun et al.,2006; WelchBrown, 1996). Соединение A может также оказывать усиленное воздействие посредством стимуляции мускариновых рецепторов 2 типа, с которыми соединение A специфически связывается. Это приводит к уменьшению экспрессии PMP22. В результате, соединение A подавляет апоптоз и окислительный стресс посредством ингибирования обратной связи альдоредуктазного пути. D-сорбит продуцируется в альдозоредуктазном метаболическом пути. Ослабление гена альдоредуктазы подавляет апоптоз и окислительный стресс в клетках крыс(Nambu H. et al., 2008). Баклофен (соединение B). Данное лекарственное средство, C10H12ClNO2, было одобрено для смягчения признаков и симптомов обратимой спастичности, обусловленной рассеяным склерозом, в частности для облегчения спазмов мышц-сгибателей и сопутствующей боли, клонуса и мышечной ригидности, и для лечения с помощью интратекального введения тяжелой спастичности спинномозгового происхождения у пациентов, не реагирующих или не переносящих терапию посредством перорального введения. Соединение В является прямым агонистом ГАМК-В-рецепторов. Его точный механизм действия полностью не известен. Оно подвергает ингибированию как моносинаптические, так и полисинаптические рефлексы на спинальном уровне, возможно, посредством гиперполяризации афферентных окончаний, хотя активность может также возникать и в супраспинальных областях и способствовать его клиническому эффекту. Намеченный метаболический путь при заболевании CMT1 А. Было показано, что ГАМК-В-рецептор активирует киназы ERK1/2 посредством поддерживающего белка, взаимодействующего с GPCR (GISP) и, таким образом, может негативно регулировать PI3K-AktGSK-3-сигнальный путь и активность рецепторов стероидных гормонов, участвующих в позитивной транскрипционной регуляции гена PMP22 в шванновских клетках (Kantamneni et al., 2007; Lange et al.,2007; Miller et al., 2007; Tu et al., 2007). Дополнительно, ГАМК-В-рецепторы могут в процессе развития контекстно-зависимым образом уменьшать активность ГАМК-А-рецепторов, которые также признаны позитивными модуляторами экспрессии PMP22 (Obrietanvan den Pol, 1998). Пилокарпин (соединение C). Данное лекарственное средство, C11H16N2O2, было одобрено для лечения i) симптомов ксеростомии в результате гипофункции слюнных желез, вызванной радиотерапией рака области головы и шеи; иii) лечения симптомов ксеростомии у пациентов с синдромом Шегрена. Агонист мускариновых рецепторов, он вызывает сокращение гладкомышечных волокон (пищеварительный тракт, глаз, бронхи), стимулирует потовую, слюнную, бронхиальную и желудочную секреции. Более того, он проявляет сложное сердечно-сосудистое действие, стимулируя оба парасимпатомиметические (вазодилятация) ганглиомиметические пути. Намеченный метаболический путь при заболевании CMT1 А. Авторы изобретения продемонстрировали, что пилокарпин, агонист мускариновых рецепторов,уменьшает экспрессию белка PMP22 в шванновских клетках in vitro. Мускариновые рецепторы способны модулировать Akt- и Erk-пути в различных клеточных условиях и, таким образом, могли бы участвовать в тонком управлении переключения двух данных сигнальных путей, участвующих в позитивной и негативной транскрипционной регуляции белка PMP22 соответственно. Авторы изобретения предполагают,что стимуляция мускариновых рецепторов пилокарпином ведет, вероятно, через сложный набор молекулярных механизмов, к смещению внутриклеточного равновесия активности Erk/Akt к более выраженному Erk-прохождению сигнала, ингибируя экспрессию гена PMP22. Например, мускариновые рецепторы могут селективно блокировать прохождение сигнала с помощью IGF-1, опосредованного функциональным модулем pAkt/GSK-3 путем стимуляции дефосфорилирования тирозином IRS-1, который отсоединяет IRS-1 от стимулированного IGF-1-рецептора (Batty et al., 2004; Stirnweiss et al., 2006). Налтрексон (соединение D). Данное лекарственное средство, C20H23NO4, было одобрено для лечения алкогольной зависимости и для блокирования действия экзогенно введенных опиоидов. Данное лекарственное средство антагонистически связывается с опиоидными мю-рецепторами,предотвращая, тем самым, связывание традиционных опиатных (героин, морфин) средств и индуцирование опиоидных нейронных реакций. Оно заметно ослабляет или полностью блокирует, обратимо, субъективные эффекты внутривенно вводимых опиоидов. При совместном введении с морфином, на постоянной основе, оно блокирует физическую зависимость к морфину, героину и другим опиоидам. У больных, физически зависимых от опиоидов, оно будет ускорять абстинентные симптомы. Механизм действия при алкоголизме не понятен; однако вовлечение эндогенной опиоидной системы подсказано данными доклинических исследований. Он конкурентно связывается с такими рецепторами и может блокировать действие эндогенных опиоидов. Намеченный метаболический путь при заболевании CMT1 А. Киназа, регулирующая внутриклеточные сигналы (ERK), и Akt-пути регулируют экспрессию генаPMP22 противоположным образом: транскрипция гена PMP22 повышается посредством активированного PI3K/pAkt/GSK-3-сигнального пути и подавляется посредством Ras/MEK/ERK-киназного каскада. Соединение С, посредством негативной регуляции -опиоидных рецепторов, может блокировать активность pAkt-киназы и, вследствие этого, уменьшает транскрипцию гена PMP22. Шванновские клетки экспрессируют, хотя и на низких уровнях, все типы опиоидных и-рецепторов и их естественные лиганды продинорфин и проэнкефалин, - наблюдение, показывающее,что аутокринное опиоидное прохождение сигнала могло бы играть важную роль в биологии данных глиальных клеток. Прохождение сигнала через опиоидные рецепторы является чрезвычайно сложным и варьирует между вариантами применения острых и хронических агонистов. Авторы изобретения высказывают предположение, что налтрексон может ослаблять активацию pAkt-киназы и понижающую регуляциюErk-киназно-опосредованного прохождения сигнала, вызываемых, как это было продемонстрировано для некоторых нейрональных клеток, посредством острого применения морфина (MullerUnterwald, 2004). Киназа, регулирующая внутриклеточные сигналы (ERK), и Akt-пути регулируют экспрессию генаPMP22 противоположным образом: транскрипция гена PMP22 повышается посредством активированного PI3K/pAkt/GSK-3-сигнального пути и подавляется посредством Ras/MEK/ERK-киназного каскада. Соединение С, посредством негативной регуляции -опиоидных рецепторов, может блокировать активность pAkt-киназы и усиливает проведение сигнала посредством Erk-киназы, уменьшая, вследствие этого, транскрипцию гена PMP22. Метимазол (соединение Е). Данное лекарственное средство было одобрено для лечения гипертиреоза, зоба, болезни Грейвса и псориаза. Метимазол связывает и блокирует активность тиреоидной пероксидазы, энзима, задающего скорость в синтезе тиреоидных гормонов, который превращает йодид в йод. Таким образом, метимазол эффективно ингибирует продукцию новых тиреоидных гормонов. Намеченный метаболический путь при заболевании CMT1 А. Несмотря на то что шванновские клетки не экспрессируют рецепторы тиреоидных гормонов в здоровом зрелом седалищном нерве, разрушение нормального аксонально-глиального взаимодействия в поврежденных периферических нервах быстро вызывает экспрессию данных рецепторов в шванновских клетках, показывая важность передачи сигналов тиреоидными гормонами для индуцируемой репарации повреждения ПНС (Walter, 1993). Данное предложение дополнительно поддерживается наблюдением,что травмированные седалищные нервы экспрессируют не только тиреоидные рецепторы, но также энзимы, задействованные в метаболизме тиреоидных гормонов - деиодиназу 2 типа, превращающую тироксин (Т 4) в трийодтиронин (Т 3), и деиодиназу 3 типа, ответственную за деградацию тиреоидных гормонов (Walter et al., 1995; Li et al., 2001). Поскольку сверхэкспрессия гена PMP22 в шванновских клетках разрушает нормальное аксонально-глиальное взаимодействие в поврежденных периферических нервах пациентов, страдающих CMT, передача сигналов тиреоидными рецепторами может также играть важную роль в прогрессировании болезни Шарко-Мари-Тусса. Трийодтиронин Т 3 является сильным активатором экспрессии EGR2 в шванновских клетках; поскольку фактор транскрипции EGR2 признан главным позитивным регулятором программы промиелинизирующей транскрипции в шванновских клетках, передача сигнала через рецепторы тиреоидных гормонов могла бы влиять на транскрипцию гена PMP22 (Mercier et al., 2001). Авторы изобретения полагают, что метимазол может уменьшать транскрипцию гена PMP22 посредством ослабления передачи сигналов тиреоидными гормонами в поврежденных шванновских клетках. Мифепристон (соединение F). Данное лекарственное средство, C29H35NO2, было одобрено для медицинского прерывания маточной беременности в пределах 49-дневной беременности. Антигестационное действие соединения F обусловлено конкурентным взаимодействием с прогестероном в участках прогестероновых рецепторов. Основываясь на исследованиях с различными пероральными дозами у некоторых видов животных (мышь, крыса, кролик и обезьяна), соединение ингибирует активность эндогенного или экзогенного прогестерона. Намеченный метаболический путь при заболевании CMT1 А. Соединение F представляет собой антагонист прогестерона и глюкокортикоидных рецепторов, которые являются позитивными регуляторами транскрипции PMP22. Несмотря на то что соединение F было разработано как антагонист прогестероновых рецепторов,оно также признано антагонистом рецепторов глюкокортикоидных гормонов; дополнительно, оно демонстрирует также слабую антиандрогенную активность и не связывается с эстрогеновыми рецепторами или с минералкортикоидными рецепторами. Транскрипция белка PMP22 позитивно регулируется некоторыми ядерными рецепторами, включая рецепторы стероидных гормонов, экспрессируемых в шванновских клетках (Robert et al., 2001;Schumacher et al., 2001). Авторы изобретения высказывают предположение, что мифепристон, неспецифический антагонист,понижающий активность одновременно прогестероновых и глюкокортикоидных рецепторов, может являться более мощным негативным модулятором транскрипции PMP22 и, таким образом, более многообещающим кандидатом для разработки CMT1A-релевантных лекарственных средств, чем испытанный ранее специфический антагонист прогестероновых рецепторов, который продемонстрировал довольно маргинальный терапевтический эффект, особенно в примерах долговременного лечения (Sereda et al.,2003; Meyer zu Horste et al., 2007); данное заключение поддерживается также недавно опубликованными данными, показавшими, что глюкокортикоидные рецепторы в шванновских клетках экспрессируются по меньшей мере в 50 раз сильнее, чем прогестероновые рецепторы (Grayer et al., 2006). Кетопрофен (соединение G). Кетопрофен был одобрен для лечения ревматоидного артрита и остеоартрита. Соединение G представляет собой нестероидное противовоспалительное лекарственное средство, которое блокирует активность как циклооксигеназы-1 (СОХ-1) (ЦОГ-1), так и циклооксигеназы-2 (СОХ-2) (ЦОГ-2) и благодаря данному эффекту ингибирует синтез простагландинов и лейкотриенов. Намеченный метаболический путь при заболевании CMT1 А. Ранее было продемонстрировано, что шванновские клетки экспрессируют некоторые виды функционального простагландина ЕР, простациклина IP, тромбоксана, цистеиниловых лейкотриенов и рецепторов лейкотриена В 4, обладают индуцируемой ЦОГ-2 активностью и способны продуцировать простагландин Е 2, тромбоксан А 2 и лейкотриен LTC4 (Constable et al., 1999; Muja et al., 2001; Woodhamset al., 2007). Простагландины - через их сходные с GPCR рецепторы - могли бы усиливать активностьAkt-сигнального пути, который стимулирует экспрессию относящихся к миелину протеинов, включаяPMP22. Например, недавно полученные данные подсказывают, что простагландин PGE2 активно задействован в метаболизме -катенина, после эффектора pAkt передачи сигнала и активатора программы промиелинизирующей транскрипции в шванновских клетках (Ogata et al., 2004). Было продемонстрировано, что при активации ЕР-рецепторов посредством PGE2, Gs-субъединица связывается с комплексомAxin/GSK-3 и уменьшает GSK-3-опосредованное фосфорилирование и деградацию -катенина. Одновременно, связывание PGE2 с ЕР-рецепторами вызывает высвобождение G-субъединиц, которые непосредственно стимулируют Akt-протеин через фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) (Castellone et al.,2006). Таким образом, ЦОГ-ингибитор кетопрофен (соединение G) может уменьшать транскрипцию генаPMP22 посредством супрессии аутокринного прохождения сигнала через простагландиновые рецепторы в шванновских клетках, которые потенцируют активность -катенина. В дополнение, изобретение относится к применению следующих соединений, либо в комбинации(комбинациях), либо отдельно, или для лечения CMT или связанных с ней расстройств: ацетазоламида; аминоглютетимида; азтреонама; баклофена; балзаразида; бикалутамида; бромокриптина; буметанида; буспирона; ципрофлоксацина; клонидина; циклоспорина А; дисульфирама; эксеместана; фелбамата; фенофибрата; финастерида; флумазенила; флунитразепама; фуросемида; габапентина; галантамина; галоперидола; ибупрофена; изопротеренола; L-карнитина; лиотиронина (Т 3); лозартана; локсапина; метапротеренола; метараминола; метформина; метимазола; метилэргоновина; метопирона; метопролола; мифепристона; монтелукаста; надолола; налтрексона; налоксона; норфлоксацина; пентазоцина; феноксибензамина; фенилбутирата; пилокарпина; пиоглитазона; празозина; ралоксифена; рифампина; симвастатина; спиронолактона; тамоксифена; трилостана; вальпроевой кислоты; карбамазепина; кетопрофена; флубипрофена; диклофенака; мелоксикама; D-сорбита; такролимуса; диазепама; дутастерида; индометацина; динопростона; карбахола; эстрадиола; куркумина; лития; рапамицина; бетаина; трегалозы; амилорида; альбутерола. Как обсуждалось выше, изобретение дополнительно демонстрирует, что конкретные клеточные пути могут быть модулированы для эффективного лечения CMT или связанных с ней расстройств. Более конкретно, изобретение демонстрирует, что функциональность PMP22, которая включает его экспрессию, укладку или транспортировку, или белка (протеинов) периферического миелина может быть модулирована с помощью лекарственных средств, воздействующих на мускариновые рецепторы, ГАМК-Врецепторы, рецепторы стероидных гормонов, опиоидные рецепторы, сорбитовые сигнальные пути, сигнальный путь тиреоидных гормонов или активирующих ERK (киназа, регулирующая внутриклеточные сигналы) или ингибирующих pAkt-киназу и/или ингибиторы ЦОГ, позволяя, тем самым, разрабатывать новые терапевтические подходы лечения CMT и связанных с ней расстройств. Такие пути могут быть модулированы либо самостоятельно, либо в комбинации, чтобы предоставить наилучший возможный терапевтический эффект. В целом, виды комбинаций лекарственных средств, нормализующих экспрессию гена PMP22, предлагаются для терапевтического лечения CMT или связанных с ней расстройств:(I) комбинации лекарственных средств, воздействующих на тот же клеточный путь, задействованный в функционировании гена PMP22 и его белка;(II) комбинации лекарственных средств, модулирующих различные сигнальные пути, которые направлены на функционирование гена PMP22 и его белка;(III) комбинации лекарственных средств, модулирующих различные сигнальные пути, которые регулируют функционирование гена PMP22 и его продукта белка. Данные комбинации оказывают дополнительные или синергетические эффекты на транскрипцию гена PMP22 и, вследствие этого, должны обеспечить возможность значительного уменьшения эффективных терапевтических доз выбранных лекарственных средств и минимизировать их нежелательные побочные эффекты. Предпочтительные комбинации лекарственных средств в соответствии с данным изобретением выбраны из антагонистов рецепторов стероидных гормонов и соединения, выбранного из агониста мускариновых рецепторов, агониста ГАМК-В-рецепторов, активатора ERK, ингибитора pAkt-киназы, лекарственного средства, ингибирующего передачу сигналов тиреоидными гормонами, лекарственного средства,воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов, ингибитора ЦОГ; агониста мускариновых рецепторов и соединения, выбранного из агониста ГАМК-В-рецепторов,активатора ERK, ингибитора pAkt-киназы, лекарственного средства, ингибирующего передачу сигналов тиреоидными гормонами, лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути,антагонистов опиоидных рецепторов; ингибитора ЦОГ; агониста ГАМК-В-рецепторов и соединения, выбранного из активатора ERK, ингибитораpAkt-киназы, лекарственного средства, ингибирующего передачу сигналов тиреоидными гормонами,лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов и ингибитора ЦОГ; активатора ERK и соединения, выбранного из ингибитора pAkt-киназы, лекарственного средства,ингибирующего передачу сигналов тиреоидными гормонами, лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов и ЦОГ; ингибитора pAkt-киназы и соединения, выбранного из лекарственного средства, ингибирующего передачу сигналов тиреоидными гормонами; лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов и ингибитора ЦОГ; лекарственного средства, ингибирующего передачу сигналов тиреоидными гормонами, и соединения, выбранного из лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, и антагониста опиоидных рецепторов или ингибитора ЦОГ; лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, и соединения, выбранного из антагониста опиоидных рецепторов или ингибитора ЦОГ; антагониста опиоидных рецепторов и ингибитора ЦОГ. Предпочтительные примеры комбинаций лекарственного средства выбраны из антагонистов рецептора стероидных гормонов и агониста мускариновых рецепторов; антагонистов рецептора стероидных гормонов и агониста ГАМК-В-рецепторов; антагонистов рецепторов стероидных гормонов и активатора ERK; антагонистов рецепторов стероидных гормонов и ингибитора pAkt-киназы; антагонистов рецептора стероидных гормонов и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами; антагониста рецептора стероидных гормонов и ингибитора ЦОГ; агониста мускариновых рецепторов и агониста ГАМК-В-рецепторов; агониста мускариновых рецепторов и активатора ERK; агониста мускариновых рецепторов и ингибитора pAkt-киназы; агониста мускариновых рецепторов и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами; агониста мускариновых рецепторов и ингибитора ЦОГ; агониста ГАМК-В-рецепторов и активатора ERK; агониста ГАМК-В-рецепторов и ингибитора pAkt-киназы; агониста ГАМК-В-рецепторов и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами; агониста ГАМК-В-рецепторов и ингибитора ЦОГ или активатора ERK и ингибитора pAkt-киназы; активатора ERK и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами; активатора ERK и ингибитора ЦОГ или ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами и ингибитора ЦОГ. В конкретном варианте осуществления антагонистом рецептора стероидных гормонов является соединение F, агонистом мускариновых рецепторов является соединение А или соединение С, агонистом ГАМК-В-рецепторов является соединение В или соединение Е, ингибитором pAkt-киназы является соединение D, активатором ERK является соединение А. Конкретный вариант осуществления изобретения состоит в комбинированной терапии для леченияCMT или связанных с ней расстройств, причем указанная комбинированная терапия включает соединение А и, по меньшей мере, второе соединение, выбранное из антагониста рецепторов стероидных гормонов, агониста мускариновых рецепторов, агониста ГАМК-В-рецепторов, активатора ERK, ингибитораpAkt-киназы, антагониста опиоидных рецепторов, ингибитора ЦОГ и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами. Конкретный вариант осуществления изобретения состоит в комбинированной терапии для леченияCMT или связанных с ней расстройств, причем указанная комбинированная терапия включает соединение В и, по меньшей мере, второе соединение, выбранное из антагониста рецепторов стероидных гормонов, агониста мускариновых рецепторов, активатора ERK, ингибитора pAkt-киназы, антагониста опио- 11019402 идных рецепторов, ингибитора ЦОГ и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами. Конкретный вариант осуществления изобретения состоит в комбинированной терапии для леченияCMT или связанных с ней расстройств, причем указанная комбинированная терапия включает соединение С и, по меньшей мере, второе соединение, выбранное из антагониста рецепторов стероидных гормонов, агониста ГАМК-В-рецепторов, активатора ERK, ингибитора pAkt-киназы, антагониста опиоидных рецепторов, лекарственного средства, воздействующего на D-сорбитовые сигнальные пути, ингибитора ЦОГ и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами. Конкретный вариант осуществления изобретения состоит в комбинированной терапии для леченияCMT или связанных с ней расстройств, причем указанная комбинированная терапия включает соединение D и, по меньшей мере, второе соединение, выбранное из антагониста рецепторов стероидных гормонов, агониста мускариновых рецепторов, агониста ГАМК-В-рецепторов, лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, активатора ERK, ингибитора ЦОГ и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами. Конкретный вариант осуществления изобретения состоит в комбинированной терапии для леченияCMT или связанных с ней расстройств, причем указанная комбинированная терапия включает соединение Е и, по меньшей мере, второе соединение, выбранное из антагониста рецепторов стероидных гормонов, агониста мускариновых рецепторов, лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, активатора ERK, ингибитора pAkt-киназы, антагониста опиоидных рецепторов, ингибитора ЦОГ и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами. Конкретный вариант осуществления изобретения состоит в комбинированной терапии для леченияCMT или связанных с ней расстройств, причем указанная комбинированная терапия включает соединение F и, по меньшей мере, второе соединение, выбранное из агониста мускариновых рецепторов, агониста ГАМК-В-рецепторов, активатора ERK, ингибитора pAkt-киназы, лекарственного средства, воздействующего на сорбитовые сигнальные пути, антагониста опиоидных рецепторов, ингибитора ЦОГ и ингибитора передачи сигналов тиреоидными гормонами. Специфические и предпочтительные примеры комбинаций лекарственных средств в качестве активных веществ включает, по меньшей мере: В соответствии с изобретением терапия может быть представлена в виде комбинации лекарственных средств или отдельно и/или в сочетании с любой другой терапией. И она может быть предоставлена дома, в кабинете врача, в клинике, в амбулаторном отделении больницы или в больнице, так что врач может внимательно наблюдать за терапевтическими эффектами и может внести любые необходимые коррективы. Длительность терапии зависит от стадии заболевания, подлежащего лечению, возраста и состояния пациента и того, как пациент реагирует на лечение. Дополнительно, человек, имеющий больший риск развития дополнительного нейропатического расстройства (например, человек, генетически предрасположенный или страдающий, например, диабетом или находящийся на лечении онкологического состояния и т.д.), может получать профилактическое лечение, чтобы облегчить или отсрочить возможную нейропатическую реакцию. Дозировка, частота и способ введения каждого компонента комбинации могут регулироваться независимо друг от друга. Например, одно лекарственное средство может быть введено перорально, в то время как второе лекарственное средство может быть введено внутримышечно. Комбинированная терапия может быть проведена периодически циклами, которые включают периоды покоя, так что организм пациента имеет возможность восстановиться после любых пока еще непредвиденных побочных эффектов. Лекарственные средства также могут быть приготовлены в одной готовой форме, так что одно введение доставляет оба лекарственных средства. Получение готовой формы фармацевтических композиций. Введение каждого лекарственного средства комбинации может проводиться с помощью любого подходящего средства, которое обусловливает достижение концентрации лекарственного средства, который, в сочетании с другим компонентом, способен корректировать действие повышенной экспрессииPMP22 при проникновении в периферические нервы. Несмотря на то что возможно введение активных ингредиентов в комбинации в виде чистого химического вещества, предпочтительно иметь их в виде фармацевтической композиции, упоминаемой также в данном контексте как фармацевтическая готовая форма. Возможные композиции включают композиции, пригодные для перорального, ректального, местного (включая чрескожное, трансбуккальное и сублингвальное) или парентерального (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное и внутрикожное) введения. Более часто данные фармацевтические готовые формы предписываются пациенту в "пакетах для пациента", заключающих в себе ряд дозаторов или других средств для введения отмеренных стандартных доз для применения во время определенного периода лечения в одной упаковке, обычно в блистерной упаковке. Пакеты для пациента имеют преимущество над традиционными рекомендациями, когда фармацевт отделяет снабжение пациента лекарственным средством от оптового снабжения, в том, что пациент всегда имеет доступ к листовке-вкладышу в упаковке с информацией о лекарственном средстве,содержащейся в пакете для пациента, обычно отсутствующей в традиционных рекомендациях. Было показано, что вкладывание листовки-вкладыша в упаковке с информацией о лекарственном средстве повышает согласие пациента с врачебными указаниями. Таким образом, изобретение дополнительно включает фармацевтическую готовую форму, как ранее описано в данном изобретении, в комбинации с упаковочным материалом, пригодным для указанных готовых форм. В таком пакете для пациента о предполагаемом использовании готовой формы для комбинированного лечения можно судить по инструкциям,оборудованию, запасам, переводам и/или другим средствам для содействия наиболее приемлемому применению готовой формы для лечения. Такие меры делают пакет для пациента особенно пригодным и приспособленным для применения для лечения комбинацией настоящего изобретения. Лекарственное средство может содержаться в любом подходящем количестве в любом пригодном веществе-носителе, и оно может присутствовать в количестве 1-99% от общей массы композиции. Композиция может быть предоставлена в лекарственной форме, пригодной для перорального, парентерального (например, внутривенно, внутримышечно), ректального, кожного, назального, вагинального, ингаляционного, кожного (пластырь) или глазного путей введения. Таким образом, композиция может быть в форме, например, таблеток, капсул, пилюль, порошков, гранул, суспензий, эмульсий, растворов, гелей,включая гидрогели, пасты, мази, кремы, пластыри, примочки, осмотические устройства доставки, суппозитории, клизмы, инъецируемые формы, имплантанты, спреи или аэрозоли. Фармацевтические композиции могут быть составлены в соответствии с традиционной фармацевтической практикой (см., например, Remington: The Science и Practice of Pharmacy (20th ed.), ed.J. Swarbrick и J.C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York). В соответствии с изобретением фармацевтические композиции могут быть составлены так, чтобы высвобождать действующее лекарственное средство главным образом непосредственно после введения или в любое заранее предопределенное время или период времени после введения. Готовые формы с регулируемым высвобождением включают (i) готовые формы, которые создают,по существу, постоянную концентрацию лекарственного средства в организме в течение протяженного периода времени; (ii) готовые формы, которые после заранее предопределенного периода отсрочки создают, по существу, постоянную концентрацию лекарственного средства в организме в течение протяженного периода времени; (iii) готовые формы, которые обеспечивают действие лекарственного средства во время заранее предопределенного периода времени путем поддержания относительно постоянного,эффективного уровня лекарственного средства в организме с сопутствующей минимизацией нежелательных побочных эффектов, связанных с колебаниями в плазме уровня действующего лекарственного вещества; (iv) готовые формы, которые локализуют действие лекарственного средства посредством, например, пространственного размещения композиции с регулируемым высвобождением вблизи или в больной ткани или органе; и (v) готовые формы, которые нацеливают действие лекарственного средства посредством применения носителей или химических производных для доставки лекарственного средства к конкретному типу клеток-мишеней. Введение лекарственных средств в виде готовой формы с регулируемым высвобождением является особенно предпочтительным в случаях, когда лекарственное средство, отдельно либо в комбинации, обладает (i) узким терапевтическим индексом (т.е. разницей между концентрацией в плазме, приводящей к опасным побочным эффектам или токсическим реакциям, и концентрацией в плазме, приводящей к слабому терапевтическому воздействию; вообще, терапевтический индекс, TI, определяется как отношение медианной смертельной дозы (LD50) к медианной эффективной дозе (ED50; (ii) узким окном всасывания в желудочно-кишечном тракте или (iii) очень коротким биологическим периодом полувыведения,так что требуется частое введение доз в течение дня для поддержания уровня в плазме на терапевтиче- 13019402 ском уровне. Можно рассматривать любую из ряда концепций для получения регулируемого высвобождения,при котором скорость высвобождения превосходит скорость метаболизма обсуждаемого лекарственного средства. Регулируемое высвобождение может быть получено посредством подходящего отбора различных параметров и ингредиентов готовой формы, включая, например, различные типы композиций с регулируемым высвобождением и покрытий. Таким образом, лекарственное средство составляют с подходящими вспомогательными веществами в фармацевтическую композицию, которая при введении высвобождает лекарственное средство регулируемым образом (композиции монолитной или составной таблетки или капсулы, масляные растворы, суспензии, эмульсии, микрокапсулы, микросферы, наночастицы,пластыри и липосомы). Твердые лекарственные формы для перорального применения. Готовые формы для перорального применения включают таблетки, содержащие действующий ингредиент (ингредиенты) в смеси с нетоксическими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами. Данные вспомогательные вещества могут представлять собой, например, инертные разбавители или наполнители (например, сахарозу, микрокристаллическую целлюлозу, крахмалы, включая картофельный крахмал, карбонат кальция, хлорид натрия, фосфат кальция, сульфат кальция или фосфат натрия); гранулирующие агенты и вещества для улучшения распадаемости таблеток (например, производные целлюлозы, включая микрокристаллическую целлюлозу, крахмалы, включая картофельный крахмал,кроскармеллозу натрия, альгинаты или альгиновую кислоту); связывающие агенты (например, акацию,альгиновую кислоту, альгинат натрия, желатин, крахмал, прежелатинизированный крахмал, микрокристаллическую целлюлозу, карбоксиметилцеллюлозу натрия, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, этилцеллюлозу, поливинилпирролидон или полиэтиленгликоль) и смазывающие агенты, вещества, способствующие скольжению, и антиадгезивы (например, стеариновую кислоту, кремнеземы или тальк). Другие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества могут представлять собой окрашивающие вещества, вкусовые вещества, пластификаторы, увлажнители, буферные агенты и т.п. Таблетки могут быть без оболочки или они могут быть покрыты посредством известных методик,необязательно для отсрочки распадаемости и всасывания в желудочно-кишечном тракте и предоставляя,тем самым, непрерывное действие на протяжении более длительного периода. Покрытие может быть приспособлено для высвобождения активного лекарственного вещества по заранее предопределенной модели (например, для добиться готовой формы с регулируемым высвобождением) или оно может быть приспособлено не высвобождать активное лекарственное вещество до прохождения в желудок (кишечнорастворимая оболочка). Покрытие может представлять собой сахарную глазурь, пленочную оболочку(например, основанную на гидроксипропилметилцеллюлозе, метилцеллюлозе, метилгидроксиэтилцеллюлозе, гидроксипропилцеллюлозе, карбоксиметилцеллюлозе, сополимерах акрилата, полиэтиленгликолях и/или поливинилпирролидоне) или кишечно-растворимую оболочку (например, основанную на сополимере метакриловой кислоты, ацетатфталате целлюлозы, фталате гидроксипропилметилцеллюлозы,ацетатсукцинате гидроксипропилметилцеллюлозы, фталате поливинилацетата, шеллаке и/или этилцеллюлозе). Может быть задействовано вещество, обеспечивающее отсрочку времени, такое как, например,глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат. Композиции твердой таблетки могут включать покрытие, приспособленное для защиты композиции от нежелательных химических изменений (например, химическая деградация перед высвобождением активного лекарственного вещества). Покрытие может быть нанесено на твердую лекарственную форму таким же образом, как описано в Энциклопедии фармацевтической технологии. Два лекарственных средства могут быть смешаны вместе в таблетку или могут быть разделены. Например, первое лекарственное средство заключено во внутренней части таблетки, а второе лекарственное средство находится снаружи, так что значительная часть второго лекарственного средства высвобождается перед высвобождением первого лекарственного средства. Готовые формы для перорального применения могут также быть представлены в виде жевательных таблеток, или в виде твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем (например, картофельным крахмалом, микрокристаллической целлюлозой, карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином), или в виде мягких желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с водой или масляной средой, например жидким парафином или оливковым маслом. Порошки и гранулы могут быть изготовлены с применением ингредиентов, указанных выше под таблетками и капсулами традиционным образом. Композиция с регулируемым высвобождением для перорального применения может, например,быть разработана для высвобождения действующего лекарственного средства посредством регулирования растворения и/или распространения действующего лекарственного вещества. Растворение или распространение с регулируемым высвобождением могут быть достигнуты посредством подходящего покрытия таблетки, капсулы, пилюли или гранулы готовой формы лекарственных средств или посредством включения лекарственного средства в подходящую матрицу. Покрытие с регулируемым высвобождением может включать одно или более вышеуказанных покрывающих веществ и/или, например, шеллак, пчелиный воск, сахарный воск, гидрированное касторовое масло, карнаубский воск, стеариловый спирт, глицерилмоностеарат, глицерилдистеарат, глицерилпальмитостеарат, этилцеллюлозу, акриловые смолы, dl-полимолочную кислоту, ацетат-бутират целлюлозы, поливинилхлорид,поливинилацетат,виноилпирролидон,полиэтилен,полиметакрилат,метилметакрилат,2-гидроксиметакрилат, метакрилатные гидрогели, 1,3-бутиленгликоль, этиленгликольметакрилат и/или полиэтиленгликоли. В матрице готовой формы с регулируемым высвобождением вещество матрицы может также включать, например, гидратированную метилцеллюлозу, карнаубский воск и стеариловый спирт, карбопол 934, силикон, глицерилтристеарат, метилакрилат-метилметакрилат, поливинилхлорид,полиэтилен и/или галоидированный фторуглерод. Композиция с регулируемым высвобождением, содержащая один или более лекарственных средств заявленных комбинаций, также может быть в виде плавучей таблетки или капсулы (т.е. таблетки или капсулы, которые, при пероральном введении, плавают в верхней части желудочного содержимого в течение определенного периода времени). Плавучая таблетка готовой формы лекарственного средства (лекарственных средств) может быть изготовлена посредством гранулирования смеси лекарственного средства (лекарственных средств) с вспомогательными веществами и 20-75% мас./мас. гидроколлоидов, таких как гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза или гидроксипропилметилцеллюлоза. Полученные гранулы затем могут быть сжаты в таблетки. При контакте с желудочным соком таблетка образует главным образом водонепроницаемый гелевый барьер вокруг своей поверхности. Данный гелевый барьер играет роль в поддержании плотности менее чем один, тем самым позволяя таблетке оставаться плавучей в желудочном соке. Жидкости для перорального введения. Порошки, дисперсные порошки или гранулы, пригодные для приготовления водной суспензии посредством добавления воды, являются удобными лекарственными формами для перорального введения. Готовые формы, такие как суспензии, предоставляют действующий ингредиент в смеси с диспергирующим или увлажняющим агентом, суспендирующим агентом и одним или более консервантами. Пригодные суспендирующие агенты представляют собой, например, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, альгинат натрия и т.п. Композиции для парентерального введения. Фармацевтическая композиция может также вводиться парентерально посредством инъекции, инфузии или имплантации (внутривенной, внутримышечной, подкожной или т.п.) в лекарственных формах,готовых формах или посредством пригодных устройств доставки или имплантантов, содержащих традиционные, нетоксические фармацевтически приемлемые носители и вспомогательные вещества. Готовая форма и приготовление таких композиций являются хорошо известными квалифицированным специалистам в области фармацевтической готовой формы. Композиции для парентерального применения могут быть предоставлены в дозированных лекарственных формах (например, в ампулах с разовой дозой) или во флаконах, содержащих несколько доз и в которые может быть добавлен пригодный консервант (см. ниже). Композиция может быть в виде раствора, суспензии, эмульсии, устройства для инфузии или устройства доставки для имплантации или она может быть представлена в виде сухого порошка, являющимся ресуспендированным с водой или другим пригодным носителем перед применением. Помимо действующего лекарственного средства (лекарственных средств), композиция может включать пригодные парентерально приемлемые носители и/или вспомогательные вещества. Действующее лекарственное средство (лекарственные средства) может быть включено в микросферы, микрокапсулы, наночастицы, липосомы или др. для регулируемого высвобождения. Композиция может включать суспендирующие, солюбилизирующие, стабилизирующие, рНкорректирующие агенты и/или диспергирующие агенты. В соответствии с изобретением фармацевтические композиции могут быть в форме, пригодной для стерильной инъекции. Для приготовления такой композиции пригодное действующее лекарственное средство (лекарственные средства) растворяют или суспендируют в парентерально приемлемом жидком носителе. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, имеет место вода, причем вода, доведенная до пригодного рН посредством добавления подходящего количества соляной кислоты, гидроксида натрия или пригодного буфера, 1,3-бутандиола, раствора Рингера и изотонического раствора хлорида натрия. Водная готовая форма может также содержать один или более консервантов (например, метил, этил или н-пропил-п-гидроксибензоат). В случаях, когда один из лекарственных средств только умеренно или слабо растворим в воде, может быть добавлен улучшающий растворение или солюбилизирующий агент, или растворитель может включать 10-60% мас./мас. пропиленгликоля или др. Композиции для парентерального применения с регулируемым высвобождением могут быть в виде водных суспензий, микросфер, микрокапсул, магнитных микросфер, масляных растворов, масляных суспензий или эмульсий. В качестве альтернативы, действующее лекарственное средство (лекарственные средства) может быть включено в биосовместимые носители, липосомы, наночастицы, имплантанты или устройства для инфузий. Веществами для применения в приготовлении микросфер и/или микрокапсул являются, например, биодеградирующие/биоэродируемые полимеры, такие как полигалактин, по- 15019402 ли(изобутилцианоакрилат), поли(2-гидроксиэтил-L-глютамин). Биосовместимыми носителями, которые могут быть применены при составлении парентеральной готовой формы с регулируемым высвобождением, являются углеводы (например, декстраны), протеины (например, альбумин), липопротеины или антитела. Вещества для применения в имплантантах могут быть небиодеградирующими (например, полидиметилсилоксан) или биодеградирующими (например, поли(капролактон), поли(гликолевая кислота) или поли(ортосложные эфиры. Композиции для ректального применения. Для ректального применения пригодные лекарственные формы для композиции включают суппозитории (типа эмульсии или суспензии) и ректальные желатиновые капсулы (растворы или суспензии). В обычной суппозиториальной готовой форме действующее лекарственное средство (лекарственные средства) комбинируют с подходящей фармацевтически приемлемой суппозиториальной основой, такой как масло какао, этерифицированные жирные кислоты, глицеринизированный желатин и различные водорастворимые или дисперсные основы подобно полиэтиленгликолям. Могут быть включены различные добавочные вещества, усиливающие агенты или сурфактанты. Композиции для чрескожного и местного применения. Фармацевтические композиции могут также наноситься местно на кожу для чрескожного всасывания в лекарственных формах или готовых формах, содержащих традиционные нетоксические фармацевтически приемлемые носители и вспомогательные вещества, включая микросферы и липосомы. Готовые формы включают кремы, мази, лосьоны, линименты, гели, гидрогели, растворы, суспензии, наклейки,спреи, пасты, пластыри и другие разновидности систем доставки чрескожных лекарственных средств. Фармацевтически приемлемые носители или вспомогательные вещества могут включать эмульгирующие агенты, антиоксиданты, буферные агенты, консерванты, увлажнители, вещества, способствующие проникновению, хелатобразующие агенты, гелеобразующие агенты, мазевые основы, ароматизирующие вещества и защищающие кожу агенты. Эмульгирующие агенты могут представлять собой природные смолы (например, смола акации или трагакантовая камедь). Консерванты, увлажнители, вещества, способствующие проникновению, могут представлять собой парабены, такие как метил- или пропил-р-гидроксибензоат и бензалконий-хлорид, глицерин,пропиленгликоль, мочевину и т.д. Описанные выше фармацевтические композиции для местного накожного применения могут также применяться в связи с местным применением в части тела или в непосредственной близости к части тела,подлежащей лечению. Композиции могут быть приспособлены для непосредственного нанесения или для нанесения посредством специальных устройств доставки лекарственного средства, таких как повязки или в качестве альтернативы пластыри, прокладки, губки, полоски или другие формы пригодных гибких материалов. Готовые формы с медленным высвобождением. Соединения могут быть применены в готовых формах с медленным высвобождением и/или составлены с агентами, модифицирующими распределение в тканях или биодоступность. Более конкретно, в предпочтительном варианте осуществления комбинация по меньшей мере двух соединений составлена в готовой форме с выделяющим лекарственное средство полимером, или биомолекулами, или мицеллами,или липосомообразующими липидами, или эмульсиями типа масло в воде, или пегилированными или твердыми наночастицами, или микрочастицами для перорального, или парентерального, или интратекального введения, чтобы модифицировать распределение в тканях или биодоступность. Особые примеры таких составных агентов включают PGA, PLGA, циклодекстрины, альбуминовый или протеиновый носители, нано- и микрочастицы, липосомы, эмульсии и PEG. Конъюгаты. В комбинированных терапиях данного изобретения соединения могут быть объединены в фармацевтические композиции различными путями. Они могут быть смешаны вместе как отдельные единицы. Они могут быть составлены раздельно. Они также могут быть связаны, ковалентно или нековалентно, с линкером или без него. В конкретном варианте осуществления по меньшей мере два соединения являются связанными, предпочтительно посредством расщепляемого или нерасщепляемого линкера. Дозировки и длительность лечения. Необходимо принимать во внимание, что лекарственные средства комбинации могут быть введены одновременно, либо в одной и той же, либо в различных фармацевтических готовых формах или последовательно. Если это последовательное введение, отсрочка во введении второго (или дополнительного) действующего ингредиента не должна быть такой, чтобы потерять пользу эффективного воздействия комбинации активных ингредиентов. Минимальное требование для комбинации в соответствии с данным описанием состоит в том, что комбинация должна предназначаться для комбинированного применения с пользой эффективного воздействия комбинации активных ингредиентов. О предполагаемом использовании готовой формы для комбинированного лечения можно судить по оборудованию, запасам,переводам и/или другим средствам для содействия применению комбинации согласно изобретению. Терапевтически эффективные количества двух или более лекарственных средств, которые являются предметом данного изобретения, могут быть применены вместе для приготовления лекарства, применяемого для уменьшения воздействия повышенной экспрессии гена PMP22, предотвращая или уменьшения риск развития заболевания CMT1 А, прекращая или замедляя прогрессирование заболевания CMT1 А,когда оно становится клинически очевидным, и предотвращая или уменьшения риск первого или последующего проявления нейропатического эпизода. Несмотря на то что действующие лекарственные средства настоящего изобретения могут быть введены отдельными дозами, например два или три раза в день, однократная суточная доза каждого лекарственного средства в комбинации является предпочтительной, при этом однократная суточная доза всех лекарственных средств в единой фармацевтической композиции (дозированной лекарственной форме) является наиболее предпочтительной. Введение может проводиться от одного до нескольких раз в день на протяжении от нескольких дней до нескольких лет и может проводиться даже в течение всей жизни пациента. Длительное или, по меньшей мере, периодически повторяемое продолжительное введение будет показано в большинстве случаев. Термин "дозированная лекарственная форма" относится к физически дискретным единицам (таким как капсулы, таблетки или загруженные цилиндры шприца), пригодным в качестве единой дозировки для больных людей, причем каждая единица содержит заранее предопределенное количество действующего вещества или веществ, рассчитанное, чтобы оказывать требуемый терапевтический эффект, совместно с требуемым фармацевтическим носителем. Количество каждого лекарственного средства в комбинации, предпочтительное для разовой дозировки, будет зависеть от нескольких факторов, включая способ введения, массу тела и возраст пациента,тяжесть нейропатического повреждения, вызванного заболеванием CMT1 А, или риск потенциальных побочных эффектов, учитывая общее состояние здоровья человека, подвергаемого лечению. Дополнительно, на применяемую дозировку может воздействовать фармакогеномная (влияние генотипа на фармакокинетический, фармакодинамический профиль или профиль эффективности лекарства) информация о конкретном пациенте. За исключением случаев, отвечающих особо тяжелым случаям болезни CMT, когда могут потребоваться более высокие дозировки, или при лечении детей, когда будут выбираться более низкие дозировки, предпочтительная дозировка каждого лекарственного средства в комбинации будет обычно простираться в пределах диапазона доз, не выше обычно предписываемых для долговременного поддерживающего лечения или с доказанной безопасностью в большой 3 фазе клинических исследований. Например,для соединения F от приблизительно 2 до приблизительно 100 мг/день при пероральном применении. При местном применении должны быть выбраны специальные дозы; для соединения D от приблизительно 1 до приблизительно 20 мг/день при пероральном применении; для соединения В от приблизительно 2 до приблизительно 20 мг/день при пероральном применении. При введении в форме наночастиц или подобных готовых форм могут быть пригодны различные дозы; для соединения Е от приблизительно 125 до приблизительно 500 мг/день при пероральном применении; для соединения С от приблизительно 1 до приблизительно 20 мг/день при пероральном применении; для соединения А от приблизительно 1 до приблизительно 50 г/день при пероральном применении. В случае инъекций должны быть выбраны специальные дозы. Наиболее предпочтительная дозировка будет соответствовать количествам до 1 до 10% от обычно предписываемых для долговременного поддерживающего лечения. Необходимо понимать, что количество фактически введенного лекарственного средства будет определяться врачом, с учетом важных обстоятельств, включая состояние или состояния, подвергаемые лечению, точная композиция, подлежащая введению, возраст, масса и реакция отдельного пациента, тяжесть симптомов у пациента и выбранный путь введения. Вследствие этого, вышеуказанные диапазоны дозировок предназначены обеспечивать основное направление и поддержку идей, изложенных в данном изобретении, но не предназначены для ограничения рамками изобретения. Следующие примеры приводятся для иллюстрирования, а не для ограничения. Примеры 1. Культура клеток. 1.1. Имеющиеся в продаже первичные шванновские клетки крыс. Флаконы с первичной культурой шванновских клеток (SC) крыс (SciencellR1700) размораживают и высевают с плотностью 10000 клеток/см 2 в "Sciencell Schwann cell medium" (основная среда от SciencellR1701) в колбы 75 см 2, предварительно покрытые поли-L-лизином. Среда для культивирования составлена из основной среды, 5% фетальной бычьей сыворотки (3 Н-Biomedical АВ 1701-0025), 1% добавки для роста шванновских клеток (3 Н Biomedical АВ 1701-1752), 1% гентамицина (SigmaG1397) и 10 мкМ форсколина (SigmaF6886) для стимуляции их пролиферации. После достижения заселенности (от 4 до 10 дней, в зависимости от серии клеток) шванновские клетки очищают посредством легкого встряхивания или посредством thy1.1 иммунопэннинга, который позволяет отделить SC от прилипших фибробластов, чтобы создать культуры по меньшей мере 95%-ной чистоты. Затем SC подсчитывают (триптан голубой-способом) и высевают в колбы 75 см 2, предварительно покрытые поли-L-лизином, в такую же SC среду. При заселенности клетки промывают, обрабатывают трипсином (трипсин-ЭДТА разведенный 1, от Invitrogen1540054), разводят в ФСБ без кальция и магния), подсчитывают и высевают в 12-луночный планшет (140000 клеток/лунку) в SciencellSchwann cell medium с 5% FBS, 1% добавки для роста клеток (CGS), 40 мкг/мл гентамицина и 4 мкМ форсколина. 1.2. Приготовленные на заказ первичные шванновские клетки крыс. Культуры первичных шванновских клеток (SC) выделяют из седалищных нервов новорожденных крыс Sprague-Dawley (между Р 0 и Р 2). Всех новорожденных крыс умерщвляют и изолируют в чашке Петри. Вскрытие выполняют в условиях стерильности. Кожу спины отделяют от задней лапы и нижнего торса. Выделяют седалищный нерв и перемещают в чашку для культивирования, содержащую ледяной Leibovitz (L15, Invitrogen11415), дополненный 1% раствором пенициллина/стрептомицина (50 МЕ/мл и 50 мкг/мл соответственно; Invitrogen15070) и 1% бычьего сывороточного альбумина (BSA, Sigma A6003). Оба нерва каждой крысы перемещают в 15 мл трубку, содержащую ледяной L15. Затем среду L15 удаляют и заменяют 2,4 мл DMEM (Invitrogen21969035) с 10 мг/мл коллагеназы (SigmaA6003). Нервы выдерживают в данной среде в течение 30 мин при 37 С. Затем среду удаляют и оба нерва разрушают трипсином (10% трипсин-ЭДТА 10,Invitrogen15400054), разведенном в ФСБ без кальция и магния (Invitrogen2007-03) в течение 20 мин при 37 С. Реакцию останавливают посредством добавления DMEM, содержащего ДНКазу 1 II степени(0,1 мг/мл Roche diagnostic104159) и фетальную телячью сыворотку (FCS 10%, Invitrogen10270). Клеточную суспензию растирают в порошок с 10 мл пипеткой и пропускают через фильтр в 50 мл трубке(фильтрующие элементы Swinnex 13 мм, Millipore, с 20 мкм нейлоновыми сетчатыми фильтрами, Fisher). Клеточную суспензию центрифугируют при 350g в течение 10 мин при комнатной температуре (RT) и осадок суспендируют в DMEM с 10% FCS и 1% пенициллина/стрептомицина. Клетки подсчитывают(триптан голубой-способом) и высевают в Falcon 100 мм планшеты для тканевых культур Primaria с плотностью, равной от 5105 до 106 клеток/чашку. После 1 дня культивирования среду заменяют DMEM, 10% FCS, 1% пенициллином/стрептомицином и 10 мкМ цитозин-b-D-арабинофуранозидом (SigmaC1768). Спустя 48 ч среду удаляют и клетки трижды отмывают DMEM. Затем добавляют среду для роста SC, состоящую изDMEM, 10% FCS, 1% пенициллина/стрептомицина, 2 мкМ форсколина (SigmaF6886), 10 мкг/мл бычьего экстракта гипофиза (РЕХ, Invitrogen13028). Среду заменяют каждые 2-3 дня. После 8 дней культивирования (от 4 до 10 дней, в зависимости от серии клеток) шванновские клетки достигают заселенности, и культуру, содержащую большое количество загрязняющих фибробластов,очищают посредством способа thy1.1 иммунопэннинга. После такого очищения клетки суспендируют в ростовой среде при 10000 клеток/см 2 в колбах 75 см 2, предварительно покрытых поли-L-лизином. При достижении заселенности клетки промывают, обрабатывают трипсином (трипсин-ЭДТА), подсчитывают и высевают в 12-луночные планшеты (100000 клеток/лунку). 1.3. Культивирование лекарственного средства. После высевания клеток в 12-луночные планшеты среду заменяют средой определенного состава,состоящей из смеси DMEM-F12 (Invitrogen21331020), дополненной 1% добавкой N2 (Invitrogen17502), 1% L-глютамином (Invitrogen25030024), 2,5% FBS (Sciencell0025), 0,02 мкг/мл кортикостерона (SigmaС 2505), 4 мкМ форсколина и 50 мкг/мл гентамицина. Факторы роста для стимулирования дифференцировки SC в данную среду не добавляют. Спустя 24 ч среду заменяют средой определенного состава (DMEM-F12), дополненной 1% инсулинтрансферрин-селен-Х (ITS, Invitrogen51300), 16 мкг/мл путресцина (SigmaP5780), 0,02 мкг/мл кортикостерона и 50 мкг/мл гентамицина. На данной стадии ни прогестерон, ни форсколин в среде не присутствуют. Спустя 1 день шванновские клетки стимулируют комбинациями лекарственных средств или отдельных лекарственных средств на протяжении 24 ч (3 лунки/условие). Приготовление каждого соедине- 18019402 ния выполняют только перед его добавлением в культуральную среду. Лекарственные средства добавляют к среде определенного состава, состоящей из DMEM-F12 с 1% инсулин-трансферрин-селен-Х (ITS, Invitrogen51300), 16 мкг/мл путресцина, 0,02 мкг/мл кортикостерона, 10 нМ прогестерона и 50 мкг/мл гентамицина. Отсутствие форсколина во время стимуляции лекарственного средства не допускает аденилатциклазного насыщения. 2. Очищение шванновских клеток посредством Thy1.1 иммунопэннинга. Для предотвращения загрязнения культуры фибробластами шванновские клетки очищают с применением протокола иммунопэннинга клона Thy1.1 (АТСС TIB-103). Предварительно покрытые антителами 100 мм бактериальные чашки Петри изготавливают следующим образом: данные чашки трижды отмывают ФБР и обрабатывают 20 мл 50 мМ раствора ТрисHCl, рН 9,5, с 10 мкг/мл козьих противомышиных IgM MU антител (Jackson ImmunoResearch115-005020) в течение ночи при 4 С; затем трижды промывают ФБР и обрабатывают раствором ФБР с 0,02%BSA и супернатантом, полученным из гибридомной культуры T11D7e2 (АТССTIB-103), содержащей антитело IgM к Thy1.1, в течение 2 ч при комнатной температуре. В завершение, перед добавлением клеточных суспензий чашки трижды отмывают ФБР.SC отделяют трипсином-ЭДТА. Как только большинство клеток оказались в суспензии, трипсин нейтрализуют DMEM - 10% FBS, а клетки центрифугируют. Осадок диссоциированных клеток ресуспендируют в 15 мл среды с 0,02% BSA плотностью 0,66106 клеток в 1 мл (максимум) и перемещают в чашку Петри (приблизительно 6,6 миллионов клеток/10 мл/чашку 100 мм). Клеточную суспензию культивируют в чашке Петри, покрытой Thy1.1, в течение 45 мин при 37 С с легким встряхиванием каждые 15 мин для предотвращения неспецифического связывания. Большинство фибробластных клеток, экспрессирующих Thy1.1, адгезируются на чашке. В конце культивирования клеточную суспензию извлекают и центрифугируют. Теоретически, такая клеточная суспензия содержит только шванновские клетки. Клетки центрифугируют, а клеточный осадок суспендируют в ростовой среде с 10 мкМ форсколина при 16000 клеток/см 2 в колбе 75 см 2, обработанной поли-L-лизином. 3. Количественная обратнотранкриптазная полимеразная цепная реакция (Q-RT-PCR). Количественная RT-PCR применяется для сравнения уровней PMP22 мРНК после лекарственного стимулирования относительно рибосомального L13A мРНК домашнего хозяйства в первичной культуре шванновских клеток крыс. После промывания холодным стерилизованным ФБР общую РНК экстрагируют из каждого образца клеток и очищают от SC, применяя микронабор Qiagen RNeasy (Qiagen74004). Определяют количество нуклеиновых кислот с помощью спектрофотометра Nanodrop, применяя 1 мкл образца РНК. Чистоту РНК определяют посредством аппарата BioAnalyzer (Agilent). РНК обратно транскрибируют в кДНК в соответствии со стандартным протоколом. Матрицы кДНК для PCR-амплификации синтезируют из 200 нг общей РНК, применяя обратную транскриптазу Superscript II (Invitrogen18064-014) в течение 60 мин при 42 С в присутствии олиго (dT), в конечном объеме 20 мкл. кДНК подвергают ПЦР-амплификации, применяя систему "LightCycler 480" (Roche Molecular Systems Inc.). Перед использованием для PCR-амплификации каждую кДНК пятикратно разводят. 2,5 мкл этих кДНК вводят в реакционный раствор PCR (конечный объем 10 мкл). Предварительные испытания доказали, что количественный анализ состоялся в экспоненциальной фазе процесса амплификации для обеих последовательностей и что экспрессия упоминаемого гена в условиях различных культур была одинаковой. Реакцию PCR проводят посредством амплификации 500 нМ прямого праймера PMP22(НМ 017037) крыс,5-GGAAACGCGAATGAGGC-3,и 500 нМ обратного праймера 5-GTTCTGTTTGGTTTGGCTT-3 (амплификация 148-о.п.). Фрагмент 152-о.п. RPL13A рибосомальной(НМ 173340) РНК амплифицируют параллельно в отдельных реакциях для нормализации результатов,применяя 500 нМ прямого праймера 5-CTGCCCTCAAGGTTGTG-3, и 500 нМ обратного праймера 5-CTTCTTCTTCCGGTAATGGAT-3. Для выполнения анализа RT-Q-PCR авторы изобретения применяли FRET-химию.Rp113A-FL-5-TCGGGTGGAAGTACCAGCC, меченных на своем 3'-конце донорной флуорофорной краской (флуоресцеин). 0,15 мкМ зондов Red640 определяли следующим образом:Rp113A-red-5'-TGACAGCTACTCTGGAGGAGAAACGGAA,меченных на своем 5'-конце акцепторной флуорофорной краской (родамин Red 640). Каждая реакция ПЦР включала в себя 2,5 мкл матриц кДНК в конечном объеме 10 мкл набора мастер-микс (Roche04-887301001). Для PCR использовали следующие условия: 10 с при 95 С, 10 с при 63 С, 12 с при 72 С и 30 с при 40 С (сорок циклов амплификации). Относительные уровни экспрессии гена PMP22 оценивали посредством определения соотношения между продуктами, вырабатываемыми меченым геном PMP22 и эндо- 19019402 генным внутренним стандартным RPL13A. 4. Анализ экспрессии белка PMP22 посредством проточной цитометрии (FACS). Спустя 8, 24 и 48 ч после культивирования лекарственных средств супернатант извлекают, центрифугируют и замораживают. SC отделяют трипсином-ЭДТА. Как только большинство клеток оказываются в суспензии, трипсин нейтрализуют, применяя DMEM с 10% FCS. Супернатант с клетками извлекают и центрифугируют. Клеточный осадок перемещают в микротрубки, однократно отмывают в ФБР и фиксируют со специальным раствором (AbCysReagent ABUF09B). 10 мин спустя клетки однократно промывают в ФБР и сохраняют при 4 С. Через 5 дней после фиксации клеток все клеточные средства с различным временем культивирования маркируют, применяя следующий протокол. Клетки центрифугируют при 7000 об/мин в течение 5 мин, а клеточный осадок суспендируют в пермеабилизирующем растворе (AbCysReagent В BUF09B) и метят первичными антителами PMP22(Abcamab61220, 1/50) в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем клетки центрифугируют при 7000 об/мин в течение 5 мин, а осадки клеток однократно промывают в ФБР. Добавляют вторичные антитела, соединенные с Alexa Fluor 488 (козий антикроличий IgG, Molecular ProbesА 11008, 1/100), в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем клетки центрифугируют при 7000 об/мин в течение 5 мин,а осадки клеток однократно промывают в ФБР. Мечение усиливают, добавляя третичные антитела, соединенные с Alexa Fluor 488 (куриный антикозий IgG, Molecular ProbesА 21467, 1/100), в течение 1 ч культивирования при комнатной температуре. Затем клетки однократно промывают в ФБР. Контрольную группу без каких-либо антител (немеченных клеток) создают для определения уровня аутофлуоресценции и настраивают чувствительность фотомультипликаторов. Контрольную группу как с вторичными, так и с третичными антителами, но без первичных антител, создают, чтобы оценить неспецифическое связывание антител. Сбор и анализ данных выполняют с помощью цитометра FACS Array и программного обеспеченияFACS Array (Becton Dickinson) на 5000 клеток. Прямое рассеяние (FSC) коррелирует с клеточным объемом (размером) и анализируют боковое рассеяние (SSC), зависящее от внутренней сложности клеток(зернистость). Для экспрессии PMP22 анализ выполняют во всех клетках и рассчитывают процент позитивных клеток. Позитивными клетками являются клетки с интенсивностью флуоресценции выше, чем у контрольной группы с вторичными антителами. Для определения количества числа SC исследуют клетки в контрольной среде, применяя антитела анти-S100 протеин. Клетки получают в соответствии со следующим протоколом: шванновские клетки метят антителами анти-S100 протеин (DakoS0311, 1/100) в течение 1 ч при комнатной температуре. Данные антитела маркируют в соответствии с протоколом, описанным выше для иммунного окрашивания PMP22, но без культивирования с третичными антителами. 5. Культивирование и активность лекарственного средства. Лекарственные средства культивируют в течение 24 или 48 ч в такой же среде определенного состава, как и описанная выше (3 лунки/условие) без форсколина, чтобы не допустить стимуляции аденилатциклазного насыщения, но в присутствии 10 нМ прогестерона. После культивирования лекарственного средства супернатант извлекают, а шванновские клетки замораживают для анализа RT-Q-PCR. Авторы изобретения определяют активность лекарственного средства в отношении экспрессииPMP22, если она значительно снижает уровни PMP22 по сравнению с контрольной группой. Табл. 1 резюмирует результаты для 20 действующих лекарственных средств, которые вызывают уменьшение экспрессии PMP22. Данные для 18 лекарственных средств, приводящих к значительному уменьшению экспрессии мРНК PMP22 после 24 ч культивирования, иллюстрированы на фиг. 1-3. Эти данные демонстрируют существенное снижение уровней мРНК PMP22, даже при очень низких дозах. 6. Уровень белка PMP22 после 24 ч культивирования. Авторы изобретения исследовали способность некоторых лекарственных средств ингибировать экспрессию белка PMP22 (FACS-анализ). Фиг. 4 описывает результаты для 6 лекарственных средств и демонстрирует, что они способны значительно уменьшать экспрессию белка PMP22 в течение 24 ч после их добавления в среду для культивирования. Результаты действия некоторых отдельных лекарственных средств на уровень белка PMP22 также показаны в табл. 1. На фиг. 5 показано воздействие комбинации пилокарпина и налтрексона на экспрессию белкаPMP22 после 24 ч культивирования. Уровни экспрессии белка сравнили с нелеченными контрольными группами. Было показано, что данные разницы являются статистически значимыми. Табл. 2 резюмирует результаты, полученные для различных комбинаций лекарственных средств в различных концентрациях, на экспрессию белка PMP22. Данные результаты были статистически значимыми и демонстрируют преимущество и благотворное воздействие предложенных комбинаций лекарственных средств. 7. Эксперименты in vivo на животной модели CMT. Авторы изобретения исследовали терапевтические воздействиясоединений на моделях CMT трансгенных крыс - гемизиготных по PMP22 трансгенных крыс, несущих три дополнительные копии мышиного гена PMP22 (Sereda et al., 1996; Grandis et al., 2004). С клинической точки зрения, данная крысиная модель CMT является хорошим приблизительным соответствием заболеванию CMT1 А человека. Взрослые крысы, страдающие CMT, обнаруживают замедление скорости проводимости двигательного нерва со значениями, аналогичными значениям у пациентов, страдающих CMT1 А, т.е. менее чем 50%. После стимуляции седалищного нерва соединение потенциалов действия мышцы демонстрируют уменьшение амплитуд и десинхронизацию. Гистологические и электрофизиологические изменения предшествуют явным клиническим признакам поражения мышц (Sereda et al., 1996, 2003). Потеря аксонов гистологически подтверждается резко выраженной мышечной атрофией, соответствующей симптомам CMT1 А. На протяжении всего исследования использовали трансгенных PMP22 четырехнедельных крыс. Аспекты дизайна исследования (рандомизация, статистика для множественных сравнений, размер образца и т.д.) контролировали в соответствии с рекомендациями, предоставленными в 4-м издании 43-го томаILAR Journal (2002), который предоставляет обзоры в области экспериментальных разработок и статистики биомедицинского исследования. Экспериментальные группы раздельно формируют из молодых крыс обоего пола. Крыс определяют в группы с последующим графиком рандомизации, основываясь на массе тела. В некоторых экспериментах рандомизация основывалась на выполнении крысами bar-теста. Оба пола представлены отдельными контрольными группами, по численности равными или превышающими группы лечения. Крыс длительно лечили лекарственными средствами посредством принудительного кормления или вводя с помощью подкожного осмотического насоса Alzet (DURECT Corporation Cupertino, CA), в зависимости от биодоступности каждого лекарственного средства, в течение 10-20 недель. Для приведения в соответствие доз и растущей массы организма животных взвешивали два раза в неделю. Если для лечебного введения выбран осмотический насос, дозы лекарственного средства рассчитывают, основываясь на измеренной средней массе тела животных, ожидаемой для их возраста, на протяжении периода длительности насоса (6 недель). При необходимости насосы реимплантируют, применяя подходящий протокол анестезии. Поведенческие тесты. Каждые три или четыре недели животных подвергали поведенческому тесту. Каждый тест проводится одним и тем же исследователем в одном и том же помещении и в одно и то же время дня; эту однородность поддерживали на протяжении всего эксперимента. Все лечение являлось слепым для исследователя. "Bar-тест" и "Сила сжатия" главным образом применялись для оценки выполнения на протяжении всего исследования. График bar-теста может изменяться, как и рост животного (для избежания перекосов в результате обучения, например). Анализ силы сжатия позволяет обнаружить тонкие различия в выполнении сжатия, которые, видимо, составляет мышечная сила, состояние чувствительности (например, болевые тактильные ощущения могут изменять измеренные значения силы), поведенческий компонент ("мотивация"). Значения разницы между передними и задними конечностями разнились и весьма зависели от возраста животных. Тест на силу сжатия измеряет силу, с которой животное удерживает захват отдельно своими передними лапами или своими задними лапами. Динамометр размещают с захватом для измерения силы (ForceGauge FG-5000A). Экспериментатор до некоторой степени удерживал крысу, так чтобы она схватила захват своими передними лапами или своими задними лапами, и осторожно тянет крысу назад, пока она не освобождает захват. Силу, измеренную, когда животное освобождает захват, регистрируют. Вычисляют силу на животное двух последовательных испытаний, измеряющих передние лапы, и двух последовательных испытаний, измеряющих задние лапы; отмечали (в N) только максимальный показатель (один для передних лап и один для задних лап).Bar-тест оценивает способность крыс цепляться за фиксированный стержень. PMP22-крысы, которые показывают мышечную слабость, в данном тесте обнаруживают недостаток работоспособности(Sereda et al., 1996). Крысу помещают на ее четырех лапах на середину стержня (диаметр: 2,5 см; длина: 50 см; 30 см над столом). Испытания выполняют последовательно; число и длительность испытаний в экспериментах авторов изобретения зависит от серий животных. Данная вариабельность в тестировании представлена для определения графика, подходящего для наилучшего выявления двигательной неполноценности у крыс, страдающих CMT, в ходе экспериментов. Показатели работоспособности регистрируют каждый сеанс. Количество испытаний, необходимых для удерживания на стержне в течение 60 с (или 30 с для серии 1, сеанс 1 и 2). Время, проведенное на пластине (т.е. время ожидания падения) в каждом испытании, и средняя величина для сеанса. В экспериментальных методиках, где сеанс оканчивается после нахождения крысы на пластине в течение периода продолжительности испытания, т.е. 30 или 60 с, показатель работоспособности периода продолжительности испытания (30 или 60 с) присваивается не завершенному испытанию(например: для серии 8, для животного, которое остается на пластине менее чем 10 с в испытаниях 1, 2 и 3, затем в течение 60 с в испытаниях 4 и 5, 60 с присваивается испытаниям 6-10). Число падений. Оценка общего состояния здоровья. Массы тела, очевидные признаки (внешний вид шерстного покрова, осанка тела, походка, тремор и т.д.) животных отслеживали на протяжении всего эксперимента. При регистрации использовали шкалу оценок: 0 = нормальный, 1 = аномальный. Дополнительные тесты. При соответствии, крыс подвергали электрофизиологической оценке и гистологическому измерению. Результаты. Метимазол улучшал выполнение bar-теста на протяжении всей процедуры лечения (фиг. 6), тогда как соединение РХТ 25, которое присутствует здесь только для сравнения, почти не показывает какоголибо улучшения. Аналогичным образом, пилокарпин улучшал выполнение bar-теста на протяжении всей процедуры лечения (фиг. 6). Показатели двигательной активности в среднем были в 3 раза менее успешны у различных крыс,страдающих CMT, пролеченных плацебо по сравнению с группой дикого типа (WT). Лечение метимазолом или пилокарпином позволяло улучшить состояние животных по данному показателю, показатели становятся статистически значимыми не раньше чем после 8 недель принудительного кормления. Данный эффект становится довольно убедительным после 16 недель лечения (фиг. 7). Животные становились значительно более работоспособными по сравнению с группой плацебо и вновь достигали уровня работоспособности, который более не отличается значительно от уровня работоспособности группы плацебо WT. Было обнаружено, что амплитуда потенциалов, измеренная на дистальном участке хвоста, значительно уменьшена в группе плацебо TG, что может отражать важную гибель аксонов, что, в свою очередь, обусловлено демиелинизацией. Данный электрофизиологический параметр значительно улучшается при лечении метимазолом (фиг. 8), тогда как на скорость проводимости нерва (NCV) оно воздействовало незначительно. Данное наблюдение позволяет авторам изобретения предположить, что действие метимазола может предотвращать гибель аксонов, даже если состояние миелинизации периферических нервов в должной мере не улучшено. Похоже, что воздействие пилокарпина является, по существу, таким же, даже если изза внутригрупповой вариабельности разница между параметром группы плацебо не достигла статистической значимости. При CMT1 А амплитуда (потенциала действия чувствительного нерва (SNAP) была более уменьшенной и длительность SNAP более продолжительной, чем при CMT2. Уменьшение амплитуд комбинированного потенциала действия мышцы (СМАР) и амплитуд SNAP при CMT1 А, вероятно,является результатом комбинированного воздействия демиелинизации и аксональной дисфункции. В конце исследования выполняли морфометрический анализ. Измерение тканей задней конечности выявило, что седалищные нервы и камбаловидные мышцы у самок крыс с CMT, пролеченных плацебо,- 23019402 значительно редуцированы по сравнению с контрольной группой крыс WT. Данные возникшие дефекты полностью корректировались лечением метимазолом: абсолютные массы мышц и нервов являются даже более высокими, чем у контрольной группы крыс WT, в то время как в целом масса тела в группе метимазола по сравнению с группой плацебо в значительной степени уменьшается (данные не продемонстрированы). Эти данные демонстрируют, что, in vivo, соединения данного изобретения позволяют эффективно лечить CMT. Более того, должно быть отмечено, что, как было продемонстрировано, первые дозы, действующие для каждого лекарственного средства, составляют одну четвертую (метимазол) и одну вторую(пилокарпин) доз, эквивалентных дозировкам, применяющимся у человека, по классическим показаниям. 8. Терапевтическая схема, дозировки и пути введения. Ниже описаны дозировки для двух комбинаций (которые отличаются путями введения) для человека.(1) Соединение F и соединение D. 1. Вводимые перорально в виде единой фармацевтической композиции: соединение D от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мг и соединение F от приблизительно 0,2 до приблизительно 50 мг каждый день перорально в течение нескольких месяцев, наиболее предпочтительные дозировки для обоих лекарственных средств в композиции варьируют от 0,1 до 5 мг на единицу (в день). 2. Вводимые одновременно перорально в течение нескольких месяцев: соединение F от приблизительно 5 до приблизительно 200 мг один раз в неделю (наиболее предпочтительная дозировка составляет до 50 мг в неделю), соединение D от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мг ежедневно (наиболее предпочтительная дозировка для данного лекарственного средства составляет от 0,1 до 5 мг/день). 3. Вводимые одновременно в течение нескольких месяцев: соединение D от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мг каждый день перорально (наиболее предпочтительная дозировка для данного лекарственного средства составляет от 0,1 до 5 мг/день) и соединение F в виде кожного пластыря, высвобождающего лекарственное средство предпочтительно со скоростью приблизительно от 0,2 до приблизительно 2 мг/день.(2) Соединение А и соединение F. 1. Вводимая хронически, перорально, дважды или трижды в день, в виде одной фармацевтической композиции в форме капсул или капель, которые необходимо растворять в питье (предпочтительно в молоке): предпочтительно общая суточная дозировка соединения F составляет от приблизительно 0,1 до приблизительно 5 мг и соединение А от приблизительно 1 до приблизительно 50 г. 2. Вводимые одновременно в течение нескольких месяцев: соединение F один раз в неделю от приблизительно 5 до приблизительно 200 мг один раз в неделю (наиболее предпочтительная дозировка составляет до 50 мг в неделю) и соединение А дважды в день в питье, общая суточная дозировка соединения А составляет от приблизительно 1 до приблизительно 50 г. 3. Вводимые последовательно и одновременно для долговременного лечения: во-первых, в виде одного болюса соединение F (приблизительно от 200 до 600 мг) перорально, затем в комбинации одновременно: соединение F в виде кожного пластыря, высвобождающего лекарственное средство (наиболее предпочтительна скорость составляет приблизительно от 0,2 до приблизительно 2 мг/день) и соединение А дважды в день в течение 7 дней в питьевой воде, затем соединение А в течение 14 дней не принимать,затем соединение А в течение 7 дней дважды в день в питьевой воде (предпочтительная общая суточная дозировка соединения А составляет от приблизительно 1 до приблизительно 50 г) и т.д. с перерывами.Дозировки данного лекарственного средства в любой комбинации среди раскрытых в настоящем изобретении могут значительно отличаться в готовых формах, предложенных для лечения мужчин или женщин.Такая же терапевтическая схема, как и соединение F и соединение А (3), но вместо кожного пластыря может быть применено ректальное/вагинальное введение низких доз соединения F. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Композиция, включающая по меньшей мере два соединения, выбранные из D-сорбита; баклофена; пилокарпина; налтрексона; метимазола; мифепристона и кетопрофена или их солей, для лечения болезни Шарко-Мари-Тусса (CMT) или связанных с ней расстройств, выбранных из наследственной нейропатии с предрасположенностью к параличу от сдавления нерва (HNPP), синдрома Дежерина-Сотта(DSS) и врожденной гипомиелинизирующей нейропатии (CHN). 2. Композиция по п.1, где заболевание представляет собой CMT, предпочтительно CMT1 А. 3. Фармацевтическая композиция, включающая одну из следующих комбинаций соединений: мифепристон и метимазол,пилокарпин и баклофен,мифепристон и пилокарпин,мифепристон и баклофен,мифепристон и кетопрофен,мифепристон и налтрексон,пилокарпин и кетопрофен,пилокарпин и налтрексон,баклофен и кетопрофен,кетопрофен и метимазол,сорбит и налтрексол или сорбит и метимазол,или их солей и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. 4. Фармацевтическая композиция по п.3, включающая дополнительное активное соединение. 5. Композиция по любому одному из пп.1-4, где указанные по меньшей мере два соединения являются связанными, ковалентно или нековалентно, с линкером или без него. 6. Композиция по п.5, где соединения являются связанными с расщепляемым или нерасщепляемым линкером. 7. Композиция по любому одному из пп.1-6, где указанные по меньшей мере два соединения содержатся с выделяющими лекарственное средство полимером, биомолекулой, мицеллой или липосомообразующими липидами, или эмульсиями типа масло в воде, или пегилированными или твердыми наночастицами, или микрочастицами для перорального, или парентерального, или интратекального введения,чтобы модифицировать распределение в тканях или биодоступность. 8. Применение комбинации по меньшей мере двух соединений, выбранных из D-сорбита; баклофена; пилокарпина; налтрексона; метимазола; мифепристона и кетопрофена, или их солей для получения лекарственного средства для лечения болезни Шарко-Мари-Тусса или связанных с ней расстройств, выбранных из HNPP, DSS и CHN. 9. Применение по п.8, где указанная комбинация включает мифепристон и метимазол,пилокарпин и баклофен,мифепристон и пилокарпин,мифепристон и баклофен,мифепристон и кетопрофен,мифепристон и налтрексон,пилокарпин и кетопрофен,пилокарпин и налтрексон,баклофен и кетопрофен,баклофен и налтрексон,кетопрофен и метимазол,сорбит и налтрексол или сорбит и метимазол или их соли. 10. Применение по любому из пп.8 или 9, где соединения скомбинированы для группового или раздельного введения, одновременно или последовательно. 11. Применение по п.8, где заболевание представляет собой CMT, предпочтительно CMT1 А. 12. Способ лечения болезни Шарко-Мари-Тусса (CMT) или связанных с ней расстройств, выбранных из наследственной нейропатии с предрасположенностью к параличу от сдавления нерва (HNPP),синдрома Дежерина-Сотта (DSS) и врожденной гипомиелинизирующей нейропатии (CHN) у субъекта,где указанный способ включает одновременное, раздельное или последовательное введение субъекту по меньшей мере двух соединений, выбранных из D-сорбита; баклофена; пилокарпина; налтрексона; метимазола; мифепристона и кетопрофена или их солей. 13. Способ по п.12, в котором способ включает одновременное, раздельное или последовательное введение субъекту по меньшей мере двух следующих соединений: мифепристон и метимазол,пилокарпин и баклофен,мифепристон и пилокарпин,мифепристон и баклофен,мифепристон и кетопрофен,мифепристон и налтрексон,пилокарпин и кетопрофен,пилокарпин и налтрексон,баклофен и кетопрофен,баклофен и налтрексон,кетопрофен и метимазол,сорбит и налтрексол или сорбит и метимазол,или их солей.

МПК / Метки

МПК: A61K 31/047, A61K 31/4178, A61K 31/197, A61K 31/485, A61K 31/567, A61P 25/28, A61K 31/27, A61K 45/06, A61K 31/4164

Метки: композиции, болезни, способ, лечения, шарко-мари-тусса

Код ссылки

<a href="http://easpatents.com/30-19402-kompozicii-i-sposob-lecheniya-bolezni-sharko-mari-tussa.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Композиции и способ лечения болезни шарко-мари-тусса</a>

Похожие патенты