Иммунологически активное вещество, способ его получения, биозонд на его основе и способ диагностики состояния здоровья с применением биозонда, фармацевтическая композиция и способ лечения с использованием фармацевтической композиции

Номер патента: 18848

Опубликовано: 29.11.2013

Автор: Шанин Вадим Юльевич

Есть еще 22 страницы.

Смотреть все страницы или скачать PDF файл.

Формула / Реферат

1. Биотехнологический продукт, представляющий собой иммунологически активный дегидратированный белковый субстрат с нарушенными внутренними гидрофильными связями, полученный из исходной ткани органа индивида, характеризующийся органной и видовой антигенной схожестью с белком исходной ткани, при этом лишенный индивидуальных антигенных свойств этой ткани и проявляющий к ней свойства антигена и аутоантигена, обладающий специфической активностью в отношении антител-аутоантител, находящихся в биологических жидкостях других индивидов одного биологического вида, при этом продукт содержит макромолекулы белкового субстрата в интервале молекулярного веса 10-90 кДа, в котором при денатурирующем электрофорезе выявляются специфичные участки в виде по меньшей мере двух мажорных полос, соответствующих значениям шкалы молекулярной массы из интервала 9,0-11,0 и 59-61 кДа.

2. Биотехнологический продукт по п.1, характеризующийся тем, что содержит по меньшей мере один иммуноактивный сингенный эпитоп исходного органа и вида индивида с антигенными-аутоантигенными свойствами.

3. Биотехнологический продукт по п.1, характеризующийся наличием при проведении высокоэффективной жидкостной хроматографии двух или трех доминирующих фракций щелочных компонентов, слабо взаимодействующих с анионной колонкой при значении рН 7,2, и различающихся по заряду кислых мажорных компонентов, элюируемых в середине и в конце процесса хроматографии, и проявляющихся на кривой хроматографии в виде пиков, соответствующих диапазонам значений 33,5±2,5 и 52,5±2,5 mAU для двух доминирующих фракций щелочных компонентов или соответствующих диапазонам значений 17±2,5; 33,5±2,5; 52,5±2,5 для трех доминирующих фракций щелочных компонентов.

4. Способ получения иммунологически активного биотехнологического продукта, включающий забор исходной ткани, ее типирование, многократное замораживание при температуре (-24)-(-28)°С и оттаивание, при этом оттаивание осуществляют воздействием СВЧ-излучения на частоте 2450-2500 МГц с удалением образующейся в процессе оттаивания влаги до снижения массы исходной ткани на 30-60%, полученную в результате такой обработки исходную ткань, характеризующуюся сингенностью к видовым и органным антигенным кодам исходной ткани и лишенную индивидуальных антигенных свойств исходной ткани индивида, измельчают, гомогенизируют, обеззараживают и экстрагируют по Грассе, полученный супернатант подвергают стандартизации по белку от 20-25 мг на 1 мл и лиофильно высушивают.

5. Способ по п.4, характеризующийся тем, что обеззараживание ткани осуществляют путем добавления в гомогенат ткани 0,5% водного раствора формалина до 5-10% от общего объема исходного материала с последующим смешением и экспозицией смеси в течение 4-6 ч.

6. Способ по п.4, характеризующийся тем, что СВЧ-воздействие осуществляют при мощности источника излучения 600-1000 Вт в течение времени, которое задают из расчета 10-50 с на 100 г массы исходной ткани, при этом в процессе СВЧ-воздействия указанные параметры устанавливают исходя из условия предотвращения нагрева исходной ткани до температуры 41°С.

7. Способ по п.4, характеризующийся тем, что СВЧ-воздействие осуществляют в течение времени, при котором кристаллизовавшаяся на поверхности замороженной ткани вода переходит в жидкое состояние.

8. Применение биотехнологического продукта по п.1 в качестве маркера ткани внутренних, транзиторных или трансплантированных органов индивида.

9. Биозонд, включающий твердую фазу с нанесенным на ее поверхность биотехнологическим продуктом по п.1.

10. Биозонд по п.9, характеризующийся тем, что биотехнологический продукт на твердую фазу нанесен в виде серии из разведений в интервале концентраций от 12,5 до 200 мкг сухого вещества на 1 мл физиологического раствора.

11. Биозонд по п.10, характеризующийся тем, что на твердую фазу нанесен набор серий биотехнологических продуктов, полученных из разных тканей органов индивида.

12. Способ диагностики состояния ткани внутреннего органа индивида, включающий забор пробы образца биологической жидкости индивида, обеспечение контакта биологической жидкости с биотехнологическим продуктом по п.1 или биозондом по п.9 в серии из разведений образца исследуемой жидкости в пределах значений титра от 1:4 до 1:2048, определение в титрах произошедших взаимодействий между антителами и/или аутоантителами, находящимися в разведенном образце биологической жидкости индивида и биотехнологического продукта по п.1, при этом вывод о состоянии ткани внутреннего органа индивида делают по предельному позитивному результату взаимодействия в серии разведений образца исследуемой жидкости, при этом, если взаимодействие выявлено в пределах разведения исследуемого образца в пределах значений [1:4-1:8], делают вывод о здоровом состоянии ткани; в пределах значений [1:16-1:32] делают вывод о наличии несущественных повреждений ткани, в пределах значений [1:64-1:128] делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для хронического воспаления, в пределах значений [1:256-1:512] делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для острого воспаления, в пределах значений [1:1024-1:2048] делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для лизиса и/или отторжения ткани.

13. Фармацевтическая композиция, представляющая собой раствор, включающий биотехнологический продукт по п.1 и приемлемый растворитель, при этом для парентерального введения 1 мл раствора содержит 100 мкг вещества.

14. Способ лечения заболеваний тканей органов индивида, вызванных неконтролируемым ростом клеток ткани злокачественной или доброкачественной природы, включающий введение индивиду парентерально по Безредке фармакологической композиции по п.13, содержащей биотехнологический продукт по п.1, начиная с дозы 50 мкг вещества с последующим увеличением до количества, обеспечивающего сенсибилизацию организма и получение ответной реакции иммунной системы организма индивида, о которой судят по образованию противотканевых антител-аутоантител к вводимому веществу по п.1, при этом введение фармакологической композиции осуществляют при мониторинге уровня образования антител-аутоантител в биологических жидкостях пациента, забор которых осуществляют после каждого введения композиции, количество введений ограничивают при достижении уровня титров антител-аутоантител, лежащего в интервале значений от 1:256 до 1:512.

Текст

Смотреть все

ИММУНОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ,БИОЗОНД НА ЕГО ОСНОВЕ И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СОСТОЯНИЯ ЗДОРОВЬЯ С ПРИМЕНЕНИЕМ БИОЗОНДА, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ Заявляемая группа изобретений относится к биотехнологии, может быть использована в различных отраслях медицины для диагностики состояния тканей органов индивида, лечения заболеваний этих тканей, которые характеризуются неконтролируемым ростом клеток ткани и требуют прекращения роста, путем их локального лизиса внутри организма при осуществлении обязательного контроля при лечении одним и тем же веществом, которое может являться основой для проведения лабораторного тестирования и фармацевтической композиции. Заявляемые технические решения базируются на создании нового класса веществ, обладающих иммунной активностью, получаемых из ткани внутреннего, транзиторного или трансплантированного органа, новообразования организма индивида, обладающих специфической активностью в отношении антител/аутоантител и характеризующихся наличием свойств, позволяющих выявлять лабораторным методом состояние ткани внутренних органов у индивида путем выявления реакции антиген-антитело, аутоантиген-аутоантитело, происходимой между веществом и биологической жидкостью, забранной у индивида, имеющих парциальную органную и видовую сингенность,которая позволяет вызывать ответ иммунной системы организма индивида при парентеральном введении, приводящий к локальному лизису ткани, имеющей органную и видовую тропность к вводимому веществу.EP-A1-1722229 ШАНИН ВАДИМ ЮЛЬЕВИЧ (RU) Область техники, к которой относится изобретение Заявляемая группа изобретений относится к биотехнологии, может быть использована в медицине,ветеринарии, лабораторной диагностике, иммунологии, в частности для диагностики состояния ткани индивида, ранней диагностики заболеваний тканей индивида, а также для лечения заболеваний тканей органов индивида, которые можно охарактеризовать неконтролируемым ростом клеток ткани (в том числе, ткани опухолей злокачественной или доброкачественной природы, интактно развивающихся в организме). Уровень техники В последнее время активно проводятся исследования аутоантител, их роли в качестве предсказателей развивающихся в организме процессов. Известны публикации, в которых рассматривается связь между аутоантителами и онкологическими заболеваниями. Известны публикации, в которых по наличию определенных аутоантител у больных с атеросклерозом предсказывают риск инсульта, изучаются и предсказатели тромбоза или невынашивания беременности у больных с антифосфолипидным синдромом. Проводятся научные исследования по поиску аутоантител в качестве маркеров других заболеваний. Из уровня техники известны иммунологически активные вещества и способы их получения из тканей и органов млекопитающих, а также известны технические решения, связанные с диагностикой и лечением различных заболеваний. Поскольку аутоантитела являются "зеркальным отражением" аутоантигенов, которые характерны для тех или иных органов и тканей, то их количество и совокупность отражают общую картину. Известно, что у здоровых людей количество тех или иных аутоантител примерно одинаково. Длительное увеличение или уменьшение их числа свидетельствует о проблемах в соответствующих органах. Таким образом, аутоантитела являются предвестниками не только аутоиммунных заболеваний, но и многих других, в частности сердечно-сосудистых заболеваний, заболеваний желудочнокишечного тракта, почек, печени, легких и др. В частности, известна фармацевтическая композиция для лечения иммунных заболеваний, содержащая белковое или небелковое вещество, обладающее активностью в модулировании сигнальной трансдукции, опосредованной AILIM, и фармацевтически приемлемый носитель (заявка на изобретение РФ 2001114516, МПК: A61K 39/395). Вещество обладает активностью в ингибировании пролиферации AILIM-экспрессирующих клеток или в ингибировании продукции цитокина AILIMэкспрессирующими клетками. Цитокином является интерферон, который является цитокином, продуцируемым Т-клетками Th1-типа, или интерлейкин 4, который является цитокином, продуцируемым Тклетками Th2-типа. Белковое вещество может быть выбрано из группы, состоящей из антитела, которое связывается с AILIM или его частью; полипептида, содержащего полностью или частично внеклеточный район AILIM; слитого полипептида, содержащего полностью или частично внеклеточный район AILIM и полностью или частично константный район тяжелой цепи иммуноглобулина; и полипептида, который связывается с AILIM. Небелковое вещество может являться ДНК, РНК или химически синтезируемым соединением. Вещество может быть использовано для лечения или профилактики артроза, гепатита, для лечения или профилактики реакции трансплантат против хозяина и иммунного отторжения, сопровождающего реакцию трансплантат против хозяина или трансплантацию ткани или органа. Вещество может быть использовано также для предотвращения иммунного ответа, запускаемого чужеродным антигеном или аутоантигеном. Однако заявленная фармацевтическая композиция имеет другую направленность в лечении иммунных заболеваний и относится к другому классу веществ (вещества, предотвращающие иммунный ответ антигенов или аутоантигенов, воздействуя на передачу сигнала (сигнальная трансдукция, имеет другие цели лечения и лечебного воздействия, не может являться одновременно субстанцией, пригодной для диагностики и лечения, а также не предполагает индивидуализации диагностики и лечения, не может использовать микропробы ткани индивида для получения вещества. Известен способ оценки риска развития и предрасположенности к развитию патологии, ассоциированной с присутствием аутоантител против epcr (заявка на изобретение РФ 2006132064, МПК:G01N 33/564). Способ заключается в определении присутствия высоких уровней аутоантител против эндотелиального рецептора PC/активированного PC (EPCR) в образце, взятого у индивидуума, и предусматривает количественную оценку аутоантител против EPCR in vitro в указанном образце, в качестве которого может быть использована проба сыворотки или плазмы крови. Способ дополнительно предусматривает сравнение уровней анти-EPCR аутоантител, определенных в образце с нормой. Количественная оценка указанных анти-EPCR аутоантител может быть осуществлена с помощью иммуноанализа с использованием маркера или с помощью ELISA-анализа, предусматривающего иммобилизацию на твердом носителе полипептида, содержащего аминокислотную последовательность EPCR или ее фрагмент,включающий по меньшей мере один эпитоп, который может распознаваться анти-EPCR аутоантителом; инкубирование иммобилизованного полипептида с образцом, который, как предполагается, содержит анти-EPCR аутоантитела и который был взят от указанного индивидуума, в течение периода времени,достаточного для связывания антител с иммобилизованным полипептидом, и образования комплексов тителом, конъюгированным с ферментом, где "второе" антитело способно связываться с указанными анти-EPCR аутоантителами. В качестве указанного полипептида может использоваться полипептид, содержащий аминокислотную последовательность полноразмерного EPCR, или аминокислотную последовательность фрагмента EPCR, включающего по меньшей мере один эпитоп, который может распознаваться анти-EPCR антителом. В качестве полипептида может быть использован гибридный белок, содержащий область А, состоящую из полипептида, содержащего аминокислотную последовательностьEPCR или ее фрагмент, включающий по меньшей мере один эпитоп, который может распознаваться анти-EPCR антителом; или область В, состоящую из полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, используемую для выделения или очистки указанного гибридного белка, и/или аминокислотную последовательность, используемую для иммобилизации указанного гибридного белка на твердом носителе. Указанным полипептидом может быть гибридный белок, аминокислотная последовательность которого представлена в SEQ ID NO:3. Аминокислотная последовательность может быть выбрана изArg-метки; His-метки; FLAG-метки; Strep-метки; эпитопа, который может распознаваться антителом;SBP-метки; 3-метки; кальмодулинсвязывающего пептида; домена, связывающегося с целлюлозой; хитинсвязывающего домена; глутатион-3-трансферазной метки; белка, связывающегося с мальтозой; NusA,TrxA, DsbA, Avi-метки; Ala-His-Gly-His-Arg-Pro (SEQ ID NO:4) (2, 4 и 8 копий), Pro-Ile-His-Asp-His-AspHis-Pro-His-Leu-Val-Ile-His-Ser (SEQ ID NO:5), Gly-Met-Thr-Cys-X-X-Cys (SEQ ID NO:6) (6 повторов), галактозидазы и VSV-гликопротеина. Указанное "второе" антитело, специфичное к иммуноглобулину определенного изотипа, выбрано из антитела против человеческого IgG, антитела против человеческогоIgM, антитела против человеческого IqA и их смесей. Присутствие высоких уровней аутоантител ассоциируется с патологией аутоиммунного заболевания (антифосфолипидный синдром, системная красная волчанка, ревматоидный артрит и аутоиммунный васкулит), сосудистого заболевания (артериальное сосудистое заболевание, венозное сосудистое заболевание, тромбоз капиллярных кровеносных сосудов, инфаркт миокарда, инсульт головного мозга, преходящее нарушение мозгового кровообращения, ишемия конечностей, атеросклероз, аневризма, венозный тромбоз и эмболия легких) и осложнений беременности (выкидыш, внутриутробная смерть плода, преждевременные роды, замедленное внутриутробное развития, эклампсия и преэклампсия). Однако заявленное техническое решение используется только в качестве диагностики определенных нозологических форм заболеваний или совокупностей нескольких заболеваний. Также известное техническое решение не может рассматриваться как группа изобретений, представляющих универсальный метод и средство, используемые как для диагностики, так и для лечения, для контроля за ходом лечения, для скрининга здоровья по профилю здоровья, для выявления пациентов с риском развития неблагоприятных реакций и прогноза перед проведением массовых вакцинаций и (или) проведения лечения иммуноактивными веществами. При этом в нем не представлена шкала оценки результата, позволяющая судить о стадии или течении заболеваний исследуемых тканей. Заявляемая методика может выдавать заключения о болезни и/или болезнях, но не дает заключения о состоянии здоровья тканей органов индивида и прямо не может оценить уровни их повреждения. Рассматриваемое техническое решение не способно быть строго персонифицированным и индивидуализированным, т.е. неприменимо для ситуации, когда индивидуум сам может быть источником (донором) ткани и эта ткань может быть использована как средство диагностики и лечения у него самого(Индивидуум X1 - донор = Индивидуум X1 - пациент). Кроме того, рассматриваемое решение не может быть использовано у индивидов того же биологического вида, в этом случае любой представитель вида может быть донором, а другие пациентами (Индивидуум X1 - донор = Индивидуум Xn - пациент Индивидуум, где X1 - один индивидуум, а Xn - другие индивидуумы того же вида). Кроме того, рассматриваемое изобретение не может использоваться для лечения онкопатологии. Известны также способы иммуноанализа (Международная заявка на изобретение WO 2006126008,заявка на изобретение РФ 2007149281, патент Великобритании 2426581, МПК: G01N 33/564; G01N 33/574; G01N 33/564; G01N 33/574), согласно которым выявляют болезненное состояние или предрасположенность к заболеванию у млекопитающих. Способы основаны на выявлении антитела в тестируемом образце, содержащем жидкость организма указанного млекопитающего, где указанное антитело является биологическим маркером болезненного состояния или предрасположенности к заболеванию. Способ включает в себя контактирование указанного тестируемого образца с множеством различных количеств антигена, специфичного в отношении указанного антитела, выявление величины специфического связывания указанного антитела и указанного антигена, построение графика или вычисление кривой зависимости величины указанного специфического связывания от количества антигена для каждого количества антигена, и определение наличия или отсутствия указанного болезненного состояния или предрасположенности к заболеванию на основе величины специфического связывания указанного антитела и указанного антигена для каждой отдельной используемой концентрации антигена. Антитело может представлять собой аутоантитело, специфичное в отношении белка-маркера опухоли, а антиген - белок-маркер опухоли или его антигенный фрагмент или эпитоп. Белок-маркер опухоли представляет собой MUC1, MUC16, c-myc, EGRF, р 53, ras, BRCA1, BRCA2, АРС, HER2, PSA, CEA,CA19.9, NY-ESO-1, 4-5, CAGE, PSMA, PSCA, EpCam, цитокератин, рековерин, калликреин, аннексин,-2 018848AFP, GRP78, СА 125, маммоглобин или raf. Способ может быть использован в диагностике, прогнозировании или мониторинге рака, где вывод делают по результатам сравнения уровня аутоантител у обследуемых индивидов со значениями, принятыми за норму. Способ может быть также применен в выборе противоракового лечения для конкретного пациента-человека, где способ осуществляют с применением панели из двух или более антигенов, соответствующих разным белкам-маркерам опухоли, для определения относительной величины иммунной реакции пациента на каждый из указанных разных белковмаркеров опухоли, где белок- или белки-маркеры опухоли, которые вызывают наиболее сильную иммунную реакцию или значительные реакции у пациента, отбирают для разработки основы для противоракового лечения указанного пациента. Противораковое лечение представляет собой вакцинацию, а белок- или белки-маркеры опухоли, которые вызывают наиболее сильную иммунную реакцию или значительные реакции у пациента, отбирают для разработки основы для противораковой вакцины для указанного пациента. Антитело может представлять собой аутоантитело, характерное для аутоиммунного заболевания или связанное с аутоиммунным заболеванием (ревматоидный артрит, системную красную волчанку(SLE), первичный билиарный цирроз (РВС), аутоиммунный тиреоидит, тиреоидит Хашимото, аутоиммунный гастрит, злокачественную анемию, аутоиммунное воспаление надпочечников, болезнь Аддисона, аутоиммунный гипопаратиреоз, аутоиммунный диабет или тяжелую миастению), для заболевания почек или печени, приводящего к недостаточности или отказу органа, или связанное с таким заболеванием, а также для аутоиммунного заболевания или связанное с аутоиммунным заболеванием. Антиген представляет собой природный белок или полипептид, рекомбинантный белок или полинуклеотид, синтетический белок или полипептид, синтетический пептид, пептидомиметик, полисахарид или нуклеиновую кислоту. Однако в перечисленных выше способах представлен механизм иммуноанализа и отсутствует информация о веществе, с помощью которого можно осуществить данный механизм. В техническом решении по заявке на изобретение WO 2006126008 вещество, участвующее в лабораторной реакции, не может одновременно выступать еще и в качестве фармацевтической композиции,когда а) имеются причины, требующие ответа иммунной системы животного организма; б) продуцируемые организмом антитела должны быть антителами не только против нашего вещества, но должны являться аутоантителами против ткани самого организма, приводящим к ее локальному лизису. В данном решении не используются вещества с парциальной сингенностью, когда одно из веществ, участвующих в диагностике, способно быть маркером собственных антител и аутоантител, возникающих при его введении, и ткани органа обследуемого организма, и с теми и с другими поддерживая иммунные реакции в лабораторных условиях, вступая параллельно в специфические реакции антиген-антитело. Кроме того, в описании к данному изобретению имеется определение: "Антитело может представлять собой аутоантитело, специфичное в отношении белка-маркера опухоли, а антиген - белок-маркер опухоли или его антигенный фрагмент или эпитоп" и далее "белок-маркер опухоли который может представлять собойMUC1, MUC16, c-myc, EGRF, p53, ras, BRCA1, BRCA2, АРС, HER2, PSA, CEA, CA19.9, NY-ESO-1, 4-5,CAGE, PSMA, PSCA, EpCam, цитокератин, рековерин, калликреин, аннексии, AFP, GRP78, СА 125, маммоглобин или raf". Недостатком решения является отсутствие веществ, имеющих парциальную сингенность, и если антитело (аутоантитело, специфичное в отношении белка-маркера опухоли, а антиген белок-маркер опухоли или его антигенный фрагмент или эпитоп) также имеет парциально (частично) сингенный участок (эпитоп) в своей структуре к ткани опухоли, он является тестируемым агентом. Также недостатком рассматриваемого способа является то обстоятельство, что вещество-антиген не рассматривается как гликопротеин, в ответ на введение которого организм способен продуцировать антитела, относящиеся, как минимум, к классу иммуноглобулинов М и G, а также вступающие в иммунные реакции,как минимум, с анти-М и анти-G иммуноглобулинами в лабораторных условиях, имеющие парциальную(частичную) сингенность к ткани, из которой оно получается, и лишенные участков, отвечающих за индивидуальные особенности исходной ткани. Известен способ получения веществ из тканей и органов млекопитающих, обладающих аутоиммунной активностью in vitro и in vivo (патент РФ на изобретение 2240807, МПК: A61K 35/12, G01N 33/53). Способ заключается в том, что исходный материал типируют, гомогенизируют с кварцевым песком и 0,9% раствором натрия хлорида в соотношении 1:5, экстрагируют по Грассе с 5-кратным циклом замораживания при -17 С и оттаивают при 37 С, центрифугируют гомогенат и выделяют супернатант,стандартизируют белок в нем спектрометрическим методом 20-22 мг/мл, лиофильно высушивают. При этом дополнительно на этапе четвертого цикла замораживания проводят -квантовую обработку вещества -квантами энергией 0,37 кДж, интегральной дозой 1,8104 гр., в течение 20-25 мин. Полученное заявленным способом вещество сохраняет исходную органную специфичность ткани и оказывается лишенным индивидуальных свойств изоантигенной формы исходного материала донора. Совокупность этих свойств обеспечивает большую точность тканевой идентификации в реакциях in vitro и проявляет свою активность in vivo. Недостатком способа является его сложность при реализации, так как требуется использование спе-3 018848 циального оборудования. В способе применена радиационная (гамма-квантовая) технология, требующая специального регламента использования, лицензирования, специфической аппаратуры, приборов калибрации и контроля. По сравнению с известным в заявляемом способе использована технология СВЧвоздействия, в котором применяются "бытовые" сверхвысокие частоты, для воздействия на ткань, что делает применение технологии дешевле, доступнее и безопаснее, по сравнению с радиационными способами воздействия на ткань прототипа. Кроме этого, в заявляемом способе обработки ткани применяется операция обеззараживания ткани, что делает работу с исходными веществами безопасной, в отличие от способа прототипа. Исходный образец ткани в заявляемом способе до начала типирования и обработки ткани с целью получения вещества может быть законсервирован путем замораживания (до -24 С) и длительно храниться при этой температуре (до 6 месяцев), до момента использования его в качестве сырья для получения вещества без изменения качества получаемого вещества, что также отличает заявляемую технологию от прототипа. Кроме того, получаемое по известному способу вещество имеет индивидуальный набор свойств и структуру, которые могут быть использованы исключительно в лабораторной диагностике и которые не могут быть распространены на лечение заболеваний тканей. Вещества способа прототипа лишены свойств частичной органной и видовой сингенности при сохраненных исходных органных свойствах. Вещества, полученные способом по патенту на изобретение 2240807, имеют исходную органную специфичность ткани, которая лишена индивидуальных свойств изоантигенной формы исходного материала ткани донора. Исходное сырье ткани подвергается разным физическим воздействиям, которые вызывают различные превращения в исходной ткани. Радиационное воздействие гамма-лучами оказывает сшивающий, упорядочивающий и упрочняющий жесткую структуру (межмолекулярные связи) исходного материала эффект, а СВЧ-воздействие влияет на гидрофильные связи внутри тканевых биоструктур, "освобождая свободную воду", находящуюся в ткани, вызывая освобождение гидрофильных связей внутри ткани и мобилизацию свободных молекул воды, приводя к нарастающему дегидратированию ткани. Совокупность этих позиций позволяет говорить о том, что вещества, полученные по способу-прототипу, и заявляемые вещества, получаемые по заявляемой технологии, являются принципиально различными. Установлено, что вещества вышеуказанного способа могут проявлять свою активность в лабораторных условиях реакций непрямой гемагглютинации (РНГА), по которым оценивают состояние аутоиммунитета организма. РНГА, являясь рутинным методом иммунных реакций, в настоящий момент не может рассматриваться стандартизирующим методом при иммунных исследованиях. Однако других способов выявления специфических аутоантител, таких как иммуноферментный анализ, анализ иммунных взаимодействий антиген-антитело (аутоантиген-аутоантитело) на твердых носителях в способе-прототипе, не продемонстрировано, также как и не описаны возможности их использования другими способами. Кроме того, недостатком рассматриваемого технического решения является отсутствие у вещества-прототипа способности к частичному и изолированному лизису ткани. Вещества, описанные в данном патенте, не способны действовать на живую ткань организма, не вызывая его гибели, и поэтому не могут быть использованы для составления фармацевтических композиций, в том числе для лечения рака. Они не являются универсальными для диагностики и лечения (вещество-субстанция не может быть применено для фармацевтического и лабораторного производства). Раскрытие изобретения Задачей группы изобретений является создание новой биотехнологии, которая может быть использована в медицине, ветеринарии, лабораторной диагностике, иммунологии, фармацевтике для общей и индивидуальной, персонифицированной диагностики состояния ткани органа или тканей органов индивида, лечения заболеваний этих тканей, которые можно охарактеризовать неконтролируемым ростом клеток ткани (в том числе ткани опухолей злокачественной или доброкачественной природы, интактно развивающихся в организме) и требующих прекращения такого роста, путем их локального лизиса внутри живого организма при осуществлении обязательного контроля при лечении одним и тем же веществом, которое может являться основой для проведения лабораторного тестирования и фармацевтической композиции. Технический результат заключается в возможности осуществления универсальной комплексной прямой диагностики состояния ткани одного или нескольких внутренних органов индивида, при этом обеспечивается возможность оперативного получения заключения о состоянии здоровья ткани или степени ее поврежденности в живом организме, что, в свою очередь, позволяет судить об общем состоянии здоровья организма индивида, персонифицировав диагностику и лечение. Диагностическое заключение при заявляемой методике формируется быстрее, имеет более точный информационный и прогностический результат, данные лабораторного контроля способны выявлять патологические и морфологические изменения за 24-72 ч до их клинического проявления и развития заболевания внутренних органов. Количественная шкала оценки состояния повреждения ткани внутренних органов позволяет более точно определять уровни патологических расстройств, происходящие внутри этой ткани. Способ получения веществ технически проще, имеет меньшую себестоимость на единицу времени при производстве, безопаснее в производстве, так как исключает радиационные источники облучения, доступнее, позволяет осуществлять консервацию и длительное хранение исходного материала, включает в себя этапы обезза-4 018848 раживания промежуточного продукта, что делает способ безопасным для персонала при работе с ним. Заявляемые технические решения базируются на создании нового класса веществ, обладающих иммунной активностью, получаемых из ткани внутреннего, транзиторного или трансплантированного органа, новообразования (опухоли) организма индивида, обладающих специфической активностью в отношении антител/аутоантител и характеризующихся наличием свойств, позволяющих выявлять лабораторным методом состояние ткани внутренних органов у обследуемого индивида путем выявления реакции антиген-антитело, аутоантиген-аутоантитело, происходимой между веществом и биологической жидкостью, забранной у обследуемого индивида, имеющих парциальную органную и видовую сингенность,которая позволяет вызывать ответ иммунной системы организма индивида при парентеральном введении, приводящий к локальному лизису ткани, имеющей органную и видовую тропность к вводимому веществу. Заявляемое вещество обладает новыми свойствами, проявляет себя как гликопротеин, провоцирующий образование антител внутри организма при парентеральном введении, которые относятся к иммуноглобулинам (М, G), и способное образовывать комплексы антиген-антитело (аутоантигенаутоантитело) с анти-G анти-М иммуноглобулинами. Причем продуцируемые против вещества антитела,за счет свойства парциальной органной сингенности, являются противотканевыми и противоорганными аутоантителами живых тканей организма. Таких свойств у веществ, описываемых в аналогах, нет. Исходным сырьем для получения вещества не могут использоваться ткани любого объекта животного мира,а также источником получения для вещества не может служить любая ткань, находящаяся в живом организме, в неживом организме, в удаленном органе, в пунктате, в транзиторном органе, если в ткани нет признаков биологического лизиса (разложения) и имеется возможность проведения типирования и выделения не менее 1000 мг исходной ткани. В заявляемом изобретении получена группа веществ, имеющих новые свойства, опирающиеся на органную и видовую парциальную сингенность исходной ткани, позволяющие использовать получаемое вещество как основу для диагностического и фармацевтического средств, используемых одновременно. При использовании вещества в качестве фармацевтического средства, его действие реализуется как вакцина, которая способна, вызывая каскад физиологических реакций, в которых участвует иммунная и аутоиммунная системы организма, приводить к локальному изолированному лизису ткани внутри живого организма не приводящее к его гибели. При использовании этого же вещества в качестве диагностического средства в момент лечения (вакцинации) индивида этим же веществом, оно способно выявлять величину ответной реакции организма на его введение (выявлять величину вакцинации веществом),вступая в иммунные реакции в антителами-аутоантителами, образующимися в организме в ответ на его парентеральное введение. Эти свойства вещества позволяют осуществить персонифицированноеиндивидуализированное - лечение, когда исходным сырьем для получения вещества может являться один индивид. Предлагаемый способ получения вещества и его применения позволяет использовать микроколичества исходного материала, что крайне важно для реализации принципов малоинвазивного лечения. Быстрый и точный результат диагностики (до 90 мин), немедленно прогнозируемый уровень состояния здоровья ткани внутренних органов и оцениваемое состояния здоровья организма в период ближайших 24-48 ч, выявление скрытых расстройств здоровья или повреждения внутренних органов, легко доступная и просто реализуемая возможность методики диагностики позволяют применять этот способ для выявления возможных осложнений и нежелательных реакций при проведении массовых вакцинаций другими вакцинами и осуществлять отбор пациентов для этих целей. Технический результат также заключается в специфическом воздействии на изолированную исходную ткань биологического индивида, позволяющем сохранить органную и видовую специфичность исходной ткани, нивелировав ее аллогенные характеристики, и получить новое вещество с парциальной органной и видовой сингенностыо к исходной ткани; получение нового вещества, обладающего иными свойствами, позволяют использовать его для ранней прямой диагностики состояния ткани, из которой оно получено, применяя его в составе лабораторного теста, и локально литически воздействовать на ткань, применяя вещество в составе фармацевтической композиции для парентерального введения, используя свойство органной и видовой сингенности вещества, лишенного аллогенных свойств, для точного, локального контролируемого лизиса этой же ткани, проводя одновременно с этим контроль результата и степени воздействия на эту ткань этим же веществом, включенным в состав лабораторного теста,используемого для контроля лечения. Контролируемость и точность локального воздействия веществом,минимизируя вредное и токсическое влияние, неизбежно возникающее при локальном лизисе ткани внутри живого организма, позволяет персонализировать и индивидуализировать лечение в каждом конкретном случае, осуществлять подбор индивидуальной дозы вещества (количество вещества; количество,время и необходимость повторного введения вещества), не приводящее к гибели организма; в осуществлении лабораторного контроля лечения, проводимого же этим веществом, его способности выявлять антитела-аутоантитела в биологических пробах при проведении лечения за счет того, что вещество обладает высокой чувствительностью, специфичностью, которые обусловлены свойствами его парциальной органной и видовой сингенности к идентичной ткани, из которой оно получено, и способного выявлять минимальные изменения (литические повреждения) ткани, не приводящие к несовместимым с жизнью последствиям внутри организма, значимо не изменяя его общее состояние, прецизионно точно дозируя и оценивая необходимые уровни литического воздействия на ткань. Поставленная задача решается тем, что иммунологически активное вещество (ИАВ) представляет собой белковый субстрат, полученный из супернатанта модифицированной исходной ткани органа индивида, характеризующийся парциальной сингенностью, имеющий полную органную и видовую антигенную схожесть с исходной тканью, лишенный аллогенных антигенных свойств этой ткани, проявляющий свойства и антигена и аутоантигена к ткани, из которой оно получено, и обладающий специфическойактивностью в отношении антител-аутоантител, находящихся в биологических жидкостях других индивидов одного биологического вида. Иммунологически активное вещество содержит макромолекулы белкового субстрата в интервале молекулярного веса 10-90 кДа, в котором при денатурирующем электрофорезе выявляются специфичные участки в виде по меньшей мере двух мажорных полос, соответствующих значениям шкалы молекулярной массы из интервала 9,0-11,0 и 59-61 кДа. Иммунологически активное вещество содержит по меньшей мере один иммунноактивный сингенный эпитоп с антигенными-аутоантигенными свойствами исходного органа и вида индивида. Совокупность свойств ИАВ определяется формулой где tvt - органная совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих схожесть ткани по органным признакам (vt), t - тип ткани;vv - видовая совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих схожесть ткани по видовым признакам (vv), n - вид индивида;avt - органная совокупность различий, совокупность веществ, определяющих отличия ткани по признаку органной принадлежности (avt), t - тип ткани органа;avv - видовая совокупность различий, совокупность различий веществ, определяющих отличия ткани по признаку видовой принадлежности (avv), n - вид индивида. Иммунологически активное вещество характеризуется наличием при проведении высокоэффективной жидкостной хроматографии двух или трех доминирующих фракций щелочных компонентов, слабо взаимодействующих с анионной колонкой при значении рН 7,2, и различающихся по заряду кислых мажорных компонентов, элюируемых в середине и в конце процесса хроматографии, и проявляющиеся на кривой хроматографии в виде пиков, соответствующих диапазонам значений 33,52,5 и 52,52,5 mAU для двух доминирующих фракций щелочных компонентов или соответствующих диапазонам значений 172,5; 33,52,5; 52,52,5 для трех доминирующих фракций щелочных компонентов. Способ получения иммунологически активного вещества включает забор исходной ткани, ее типирование, многократное замораживание при температуре (-24)-(-28)С и оттаивание, при этом оттаивание осуществляют воздействием СВЧ-излучения на частоте 2450-2500 МГц с удалением образующейся в процессе оттаивания влаги до снижения массы исходной ткани на 30-60%, полученную в результате такой обработки исходную ткань, характеризующуюся сингенностью к видовым и органным антигенным кодам исходной ткани и лишенную аллогенных антигенных свойств исходной ткани индивида, измельчают, гомогенизируют, обеззараживают и экстрагируют по Грассе, полученный супернатант подвергают стандартизации по белку от 20-25 мг на 1 мл и лиофильно высушивают. Обеззараживание ткани осуществляют путем добавления в гомогенат ткани 0,5% водного раствора формалина до 5-10% от общего объема исходного материала с последующим смешением и экспозицией смеси в течение 4-6 ч. СВЧвоздействие осуществляют при мощности источника излучения 600-1000 Вт в течение времени, которое задают из расчета 10-50 с на 100 г массы исходной ткани, при этом в процессе СВЧ-воздействия указанные параметры устанавливают, исходя из условия предотвращения нагрева исходной ткани до температуры 41 С. СВЧ-воздействие осуществляют в течение времени, при котором кристаллизовавшаяся на поверхности замороженной ткани вода переходит в жидкое состояние. Иммунологически активное вещество применяют в качестве маркера состояния ткани внутренних,транзиторных или трансплантированных органов индивида. Может быть также изготовлен биозонд, включающий твердую фазу с нанесенным на ее поверхность иммунологически активным веществом. Иммунологически активное вещество нанесено на твердую фазу биозонда в виде серии из разведений в интервале концентраций от 12,5 до 200 мкг сухого вещества на 1 мл физиологического раствора. На твердую фазу биозонда может быть нанесен набор серий иммунологически активных веществ, полученных из разных тканей органов индивида. Способ диагностики состояния ткани внутреннего органа индивида включает забор пробы образца биологической жидкости индивида, обеспечение контакта биологической жидкости с ИАВ по п.1 (см. формулу изобретения) или биозондом по п.11 в серии из разведений образца исследуемой жидкости в пределах значений титра от 1:4 до 1:2048, определение в титрах произошедших взаимодействий между антителами и/или аутоантителами, находящимися в разведенном образце биологической жидкости индивида и иммунологически активным веществом по п.1, при этом вывод о состоянии ткани внутреннего органа индивида делают по предельному позитивному результату взаимодействия в серии разведений образца исследуемой жидкости, при этом, если взаимодействие выявлено в пределах разведения исследуемого образца в пределах значений [1:4-1:8] - делают вывод о здоровом состоянии ткани; в пределах значений [1:16-1:32] - делают вывод о наличии несущественных повреждений ткани, в пределах значений [1:64-1:128] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для хронического воспаления,в пределах значений [1:256-1:512] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для острого воспаления, в пределах значений [1:1024-1:2048] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для лизиса и/или отторжения ткани. Фармацевтическая композиция представляет собой раствор, включающий иммунологически активное вещество по п.1 и приемлемый растворитель, при этом для парентерального введения 1 мл раствора содержит 100 мкг вещества. Способ лечения заболеваний тканей органов индивида, вызванных неконтролируемым ростом клеток ткани злокачественной или доброкачественной природы, включает введение индивиду парентерально по Безредке фармакологической композиции по п.15, содержащей вещество по п.1, начиная с дозы 50 мкг вещества с последующим увеличением до количества, обеспечивающего сенсибилизацию организма и получение ответной реакции иммунной системы организма индивида, о которой судят по образованию противотканевых антител-аутоантител к вводимому веществу по п.1, при этом введение фармакологической композиции осуществляют при мониторинге уровня образования антител-аутоантител в биологических жидкостях пациента, забор которых осуществляют после каждого введения композиции, количество введений ограничивают при достижении уровня титров антител-аутоантител, лежащего в интервале значений от 1:256 до 1:512. Краткое описание чертежей Группа изобретений поясняется чертежами, на которых представлены электронограммы ультраструктуры ткани печени животных в контрольном образце и в экспериментальной группе, а именно: на фиг. 1 представлена электронограмма ультраструктуры ткани печени морской свинки в контрольном образце с увеличением 8000; на фиг. 2 - электронограмма участка локального повреждения печени морской свинки (результат произошедшего воздействия веществом на локальный участок ткани печени морской свинки), возникшего после прекращения действия заявляемого вещества, увеличение 7500; на фиг. 3-6 - электронограммы ультраструктуры тканей печени морских свинок, подвергшихся воздействию исследуемым веществом, одна из которых пала через 100 ч эксперимента, увеличение 8000(фиг. 3), другая - через 72 ч после начала эксперимента после повторного введения исследуемого вещества, увеличение 5600 (фиг. 4), третья - через 72 ч после начала эксперимента после повторного введения исследуемого вещества, увеличение 8200 (фиг. 5), четвертая - через 132 ч после начала эксперимента, и получившая 2-кратное введение исследуемого вещества, увеличение 8000 (фиг. 6); на фиг. 7 представлены результаты ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) вещества, полученного по способу п.1 из печени человека; на фиг. 8 - результаты ВЭЖХ вещества, полученного по способу п.1 из почек человека; на фиг. 9 - представлены результаты электрофореза образцов заявляемых веществ по п.1, полученные способом по п.6; на фиг. 10 - результаты иммуннодот-анализа; на фиг. 11 - результаты ИФА (иммуноферментный анализ), демонстрирующие зависимость значений оптической плотности от разведения антигена (вещества - печени), при длине волны 490 нм; на фиг. 12 - результат реакции РНГА, демонстрирующий возможность выявления противотканевых аутоантител рядом веществ, полученных из тканей разных органов, в разведениях сыворотки крови человека. Причинно-следственная связь признаков формулы с достигаемым результатом Для раскрытия механизма влияния новых признаков, выявленных у веществ, получаемых по данной заявке, позволяющих использовать их согласно заявляемой формуле, подтвержденных ходом дальнейших исследований и экспериментов. Ниже представлен ход системного анализа с формальнологическими выкладками, позволяющими реализовать их практически и перенести полученные результаты на заявляемый объект. Приведены также теоретические предпосылки и системный анализ антигенных участков тканевых белков, имеющих возможность проявлять парциальную сингенность. Антигены, свойственные только данному организму, называют аллоантигенами (греч. аллос - другой). К ним относятся антигены тканевой совместимости - продукты генов главного комплекса тканевой совместимости МНС (Major Histocompatibility Complex), свойственные каждому индивидууму. Антигены разных лиц, не имеющие отличий, называют сингенными. Органы и ткани помимо других антигенов обладают специфичными для них органными и тканевыми антигенами. Антигенным сходством обладают одноименные ткани биологических видов, например, человека и животных. Существуют стадиоспецифические антигены, появляющиеся и исчезающие на отдельных стадиях развития тканей или клеток. Каждая клетка содержит антигены, характерные для наружной мембраны, цитоплазмы, ядра и других компонентов. Неполные антигены встречаются в природе довольно часто. Неполные антитела обнаруже-7 018848 ны против эшерихий, бруцелл, сальмонелл и других микроорганизмов; против эритроцитов и иных клеток. Согласно классификации антигенов различают экзогенные (поступающие извне организма) и эндогенные (образующиеся внутри организма) антигены. Для рассматриваемого случая выбраны эндогенные антигены. Антигены подразделяются на полные и неполные (гаптены). Полный антиген включает в себя белок-носитель и детерминантную группу, они могут индуцировать образование антител и лоббировать с ними. Известно свойство неполного антигена, лишенного белка-носителя, реагировать с антителами, но эти вещества не могут стимулировать их образование внутри организма. Неполные антигены (в том числе гаптены), попадая в организм, могут соединяться с белком организма и становиться полными антигенами. Антигены каждого организма в норме не вызывают в нем иммунологических реакций, поскольку организм к ним толерантен. Однако при определенных условиях они приобретают признаки чужеродности и становятся аутоантигенами, а возникшую против них реакцию называют аутоиммунной. Клетки злокачественных опухолей представляют собой варианты нормальных клеток организма с антигенной структурой, фактически не отличающейся от антигенной структуры организма. Им свойственны антигены тех тканей, из которых они произошли, а также антигены, специфичные для опухоли и составляющие малую долю всех антигенов клетки. В ходе канцерогенеза происходит дедифференцировка клеток, поэтому может происходить утрата некоторых антигенов, появление антигенов, свойственных незрелым клеткам, вплоть до эмбриональных (фетопротеины). Антигены, свойственные только опухоли,специфичны только для данного вида опухоли, а нередко для опухоли у данного лица. Опухоли, индуцированные вирусами, могут иметь вирусные антигены, одинаковые у всех опухолей, индуцированных данным вирусом. Под влиянием антител у растущей опухолиможет меняться ее антигенный состав. Белковая структура особи содержит как минимум три относительно устойчивых и информационно значимых антигенных участков, которые кодируют видовую, индивидуальную и органную специфичность. Распознавание белковой чужеродности внутри организма происходит путем оценки участков белковых структур, несущих информацию об органной, видовой и индивидуальной совместимости ткани. Проведенный анализ полученных данных согласно заявляемому изобретению и анализ реакций организма подтвердили наличие как минимум трех участков, кодирующих видовую, органную и индивидуальную особенность в структуре белка. Автором доказано, что изменения этих участков позволяют получить новые вещества, которые способны выявлять органо- и видоспецифичные участки белковых структур в биологических жидкостях индивидуумов, вступая с ними в иммунные реакции, а внутреннему звену иммунитета выявлять - "видеть", маркировать идентичную ткань, приводя к ее лизису, в случае поступления этого вещества в организм. Результат проведенных исследований доказывает, что сложная структура белкового субстрата несет информацию о том, кому принадлежит этот белковый объект (человеку, животному или относится к миру простейших организмов). Помимо этого белок имеет сведения о том, какой ткани он принадлежал, так как в нем содержатся сведения его органной принадлежности. Также белок несет уникальный код индивидуума, позволяющий точно распознать, какому именно индивидууму он принадлежит. Теоретические основы и ход анализа сопровождались введением следующих системных утверждений, дающих основания для его проведения. Органная совокупность схожести (vt) - схожесть функционально идентичных тканей органов, где(vt) - признаки органных схожестей этих тканей. Например, ткань печени функционально схожа у животных и человека, так как выполняет схожие функции. Ткань печени морфологически схожа, так как может быть схоже структурно разделена на гепатоциты - 60-70%, желчевыводящие протоки и пути - 1218%, сосуды - 20-25%, строма - 2-3% и у человека и у животного, причем проценты структуры будут варьировать с незначительными погрешностями от основного представительства структуры входящих в ткань органа клеток. Все ткани однотипных органов у разных видов объединены единой анатомоморфологической структурой, физиологическим и функциональным предназначением. Такие же рассуждения будут справедливы для тканей других органов: желудка, кишечника, головного мозга, сердца, желез и т.д. Видовая совокупность схожести (vv) - схожесть строения клеток, тканей и органов у особей одного вида, a (vv) - признаки видовой схожести этих тканей. Межвидовая схожесть строения и функций печени, сердца, легких, желез и т.д. между людьми, между собаками, между лошадьми и т.д. Индивидуально-типологическая совокупность схожести клеток внутри одного организма (vi) - схожесть белковых структур различных органов внутри одного единого живого организма, где (vi) - признаки индивидуальности тканей в одном организме. Исходя из введенных совокупностей схожести, информационный образ ткани будет представлять слагаемое введенных совокупностей и его можно представить формулой в виде: где С - информационный образ ткани, исходя из совокупностей их схожести. Совокупности разности (различия, отличия): Видовая совокупность различий (avv) - различия в строении ткани у особей различных видов, при(avv) - признаки видовых различий сравниваемых тканей, например отличия в строении человека и лошади. Органная совокупность различий (avt) - различия в морфологическом, структурно клеточном, тканевом и функциональном строении разных органов, a (avt) - признаки определяющие органные различия,например ткань печени имеет отличии от ткани желудка, сердца и т.д. Индивидуальная совокупность различий (avi) - различия в индивидуальных особенностях организмов особей одного вида, где (avi) - признаки индивидуальных различий между идентичными тканями у индивидов одного вида, например, отличия особей по группам крови, количеству пигмента и т.д. Исходя из введенных совокупностей различий, информационный образ ткани будет представлять слагаемое введенных совокупностей, и его можно представить формулой в виде: где С - информационный образ ткани, исходя из совокупностей их различий. Безусловно, можно ввести еще ряд совокупностей схожести и различий между анализируемыми объектами по другим признакам (видовым, половым, возрастным и т.д.). Однако эти совокупности не несут значимого влияния на предмет анализа, не могут существенно повлиять на общий ход рассуждений, и поэтому их значения были исключены из анализа. Далее представлен системный анализ информационных образов и типирование произвольно выбранных тканей трех объектов: (первый объект - морская свинка (печень), второй объект - человек И.(печень), третий объект - человек П. (печень. Нивелируя в анализе значимые различия характеристик этих тканей (структурных, морфологических, функциональных и т.д.), выбраны и объединены интересующие видовые и индивидуальные совокупности по признакам схожести и различий. В ходе математического моделирования информационного образа тканей объектов при проведении анализа применены сравнения схожести и различий объектов, которые описаны представленной выше формулой. Ниже приведены результирующие выводы и следующие из них постулаты (без промежуточных рассуждений). Первый постулат. Ткань печени животного (морской свинки) схожа с тканью печени человека (первый объект схож со вторым и третьим объектами), так как печень всех исследуемых объектов несет схожие функции и имеет принципиально схожее строение у всех млекопитающих. Общей закономерностью является схожесть строения белковых структур тканей схожих органов у разных видов и внутри каждого вида - схожесть органов по совокупности признаков, функциональной нагрузки и строению у особей между и внутри видов. Таким образом, три анализируемых объекта ткани имеют общую схожую совокупность, схожи по совокупности признаков, отражающих их функциональное предназначение и строение органов. Ткани имеют некий общий признак - общий информационный код, отраженный в белковом строении и характеризующий его сущность - "печень". Второй постулат. Отличия тканей трех исследуемых объектов имеются по видовой принадлежности кода. Причем образцы ткани (печени) первого объекта отличаются от образцов и второго, и третьего объектов (различия в строении организмов морской свинки и человека, индивидуумов И. и П.). Анализируемые нами биообъекты (второй и третий) относятся к одному виду - человек, а первый объект относится к другому виду - животное. Общая закономерность - различия белковых структур тканей органов у разных видов. Таким образом, анализируемые объекты имеют общую совокупность различий органов и тканей,видовые различия между объектами. Ткани объектов разделены видовым информационным кодом, присущим каждому виду живой фауны, в нашем примере человек и животное. Такими различиями наделены белковые структуры тканей внутри видов, разделение несет информационно значимые различия типированного объекта по видовой принадлежности ткани. Белковые структуры тканей одного биологического вида при попадании внутрь другого биологического вида будут идентифицированы и уничтожены аутоиммунной системой как чужеродные по видовому признаку. Третий постулат. При сравнении трех образцов анализируемых тканей печени, животного и людей выявлено, что они отличаются от тканей других органов (ткани желудка, сердца, легких, желез) по функциональному предназначению, строению и др. Это аксиома, не требующая доказательств, а значит, имеется совокупность различий белковых структур клеток органов и тканей внутри одного организма. Таким образом, анализируемые объекты имеют общую совокупность различий органов и тканей,различия тканей между органами одного организма. Ткани органов разделены органным информационным кодом, присущим каждому органу и ткани внутри организма. Такими различиями наделены белковые структуры тканей и органов внутри каждого живого организма, разделение несет информационно значимые различия типированного объекта по тканевой и органной принадлежности. Белковые структуры тканей различных органов, вне своего клеточного пула могут распознаваться и уничтожаться системой аутоиммунитета. Четвертый постулат. Два образца - ткань печени И. и ткань печени П. - имеют схожие видовые и органные характеристики, но имеют внутривидовые и органные отличия по индивидуальнотипологическому признаку. Макроорганизмы и индивидуумы И. и П. различаются по совокупности и набору генетических и информационных признаков, присущих каждому из индивидуумов в отдельности. Имеется схожесть признаков видового и органного кодов образцов и совокупность различий между белковыми структурам органов по уникальным индивидуально-типологическим признакам, каждой особи в отдельности, внутри одного биологического вида или подвида. Таким образом, анализируемые объекты имеют общую совокупность схожести внутривидовой и органно-тканевой белковой структуры, но имеют различия тканей на уровне индивидуальнотипологических отличий между организмами. Ткани органов разделены уникальным индивидуальнотипологическим кодом, присущим каждому организму в отдельности. Такими различиями наделены все белковые структуры тканей и органов внутри каждого индивидуума, каждой особи внутри каждого биологического вида или подвида, независимо от его положения на биологической иерархической лестнице. Разделение несет информационно значимые различия белковых структур типируемых объектов по уникальному индивидуальному генетическому коду, позволяющему определять, своя или чужая белковая структура находится внутри организма. Организм идентифицирует такие отличия и может отторгать такие объекты, несмотря на схожесть видового и органного кодов белковых структур (реакции отторжения трансплантатов). Пятый постулат. Если провести сравнение трех образцов анализируемых тканей (печени) с образцом ткани желудка, как было сделано в третьем постулате, забранного у одного из исследуемых организмов, то возможно выделить еще одну важную деталь. Опираясь на введенное нами дополнениедопущение, что образец ткани желудка мог принадлежать или принадлежит одному из анализируемых организмов, то несмотря на разность в структурных отличиях и кодах белка, характеризующего ткань печени и ткань желудка, при органной или видовой разнице между образцами, одному из индивидуумов,тому, кому она принадлежала ранее и впоследствии была забрана для исследования, ткань не будет чужеродной. Она "своя" несмотря на разность органного белкового кода. Она "своя" по индивидуальнотипологическому белковому коду и по коду вида, какому принадлежит этот организм. Это общность информационного индивидуально-типологического кода белковой структуры тканей различных органов внутри одного организма. Такие ткани, имея различный органный код, не дифференцируются системой аутоиммунитета как "чужие", не уничтожаются и не утилизируются, несмотря на имеющуюся органную разность и непохожесть функционального предназначения исходного белкового субстрата. Таким образом, анализируемые объекты имеют совокупность различий органов и тканей, различия тканей органов внутри одного организма, во всех трех анализируемых случаях, но в одном случае ткани,имея различия по органному коду, имеют единый уникальный индивидуально-типологический код, присущий одному организму. Ткани органов разделены органным информационным кодом, присущим каждому органу и ткани, если они находятся внутри одного организма, то они имеют совпадающий уникальный индивидуально-типологический видовой код, принадлежащий этому организму. Такими сходствами наделены белковые структуры тканей и органов внутри одного живого организма, разделение несет информационно значимые различия типированного объекта по тканевой и органной принадлежности, но имеет полностью идентичный уникальный код организма - одного "хозяина" и не распознается системой аутоиммунитета как "чужой", не влияет на их отторжение и не уничтожается. Таким образом, организм реагирует на внезапно "переродившуюся", мутировавшую под внешним воздействием белковую структуру, приводящую к образованию опухолевой раковой ткани. Она - эта ткань, "не чужая", она своя собственная, ее уникальный индивидуально типологический код, код хозяина-индивидуума сохранен и совпадает с ним. Изменения коснулись органного - структурного кода ткани,ткань стала "чужой органу", изменилось функциональное предназначение этой ткани, которое уже не позволяет клетке выполнять прежние функции, а лишенная функционального предназначения и нагрузок такая (не отторгнутая и не утилизированная) клетка начинает интенсивно поддерживаться и развиваться внутри этого организма. Начинается новый процесс, усиливается рост и развитие такой "своей" ткани,которая "не зная" границ тканевых и органных пулов со временем захватывает весь организм хозяина,вызывая его неизбежную гибель. Проведенный нами анализ позволяет сделать следующие выводы: антигенный образ, определяющий информационную мозаику признаков ткани (С), можно представлять математическим выражением,используя анализ совокупностей признаков сходств и различий ткани. Используя предлагаемую формулу, можно описать ткань печени (t) конкретной (N) морской свинки(n). Если ткань принадлежит одному виду (n), одному типу (t) ткани и одному организму (N), то формула информационного образа ткани будет иметь следующий вид: где С - информационный образ ткани, исходя из совокупностей их схожести и различий их признаков, присущих одному виду, одному типу ткани, находящейся в одном организме. Если мы имеем другую ткань с формулой, которую можем описать аналогичным образом, то фор- 10018848 мула информационного образа ткани будет иметь следующий вид: где С - информационный образ другой ткани, исходя из совокупностей их схожести и различий их признаков, присущих одному виду, одному типу ткани, находящейся в организме конкретного индивида. Таким образом, рассматриваемые математические выражения, характеризующие ткани, идентичны и полностью совпадают, следовательно, и информационные образы сравниваемых тканей, характеризуемые этими выражениями, идентичны, а значит, совпадают и антигенные наборы признаков ткани - ткани сингенные. Если мы рассмотрим другую формулу информационного образа ткани, имеющую вид где t1 - ткань другого органа, то мы можем утверждать, используя схожую модель рассуждений,приведенную выше, что изменен признак совокупностей органных различий и сходств (vt, avt), а значит,ткань аллогена данному организму. Если рассматривать другую формулу информационного образа ткани, имеющую вид где значения совокупностей изменены (нивелированы признаки индивидуальных сходств и различий) настолько, что значения в формуле могут быть приравнены к нулевому значению, то мы можем утверждать, что это информационный образ, характеризующий другую субстанцию и это математическое выражение относится к другому веществу, имеющему полные наборы совокупностей органных и видовых признаков сходств и различий ткани, но лишенному признаков индивидуальности конкретного организма. Можно утверждать, что вещества, определяющие антигенную характеристику такой субстанции, имеют полное совпадение совокупностей сходств и различий признаков органных и видовых характеристик первоначального вещества, полученного из ткани конкретного индивида, т.е. имеется частичная (парциальная) сингенность описываемых тканей по совокупности признаков органной и видовой схожести и различий. Вещество, имеющее такую исходную формулу, не идентично сравниваемому, это другое вещество. Таким образом, можно, опираясь на описания совокупностей сходств и различий тканей, привести заключения системного анализа к общей практике и сделать вывод о том, что: 1) имеются антигенные отличия в строении белковых структур тканей особей различных видов; 2) имеются антигенные отличия между белковыми структурами ткани органов внутри организма; 3) имеются антигенные отличия в строении белковых структур тканей особей одного вида. Они могут полностью нивелировать "похожесть" строения белковой структуры этого вида в целом; 4) уникальный индивидуально-типологический антигенный код организма, присутствующий в каждой белковой структуре ткани целостного организма, нивелирует разность структурных различий белка по органному признаку, делая похожей для системы аутоиммунитета все коды белковых структур, не совпадающих по признаку единства и функционального предназначения ткани. Правильность проведенного системного анализа и приведенных логических постулатов подтверждена практически. Заявляемый способ позволяет получать вещества, которые можно описывать формулой где С - антигенный набор признаков вещества, определяющий информационный образ ткани, исходя из совокупностей признаков схожести и различий;vt - органная совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих схожесть ткани по органным признакам (vt), где t - тип ткани;vv - видовая совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих признаки схожести тканей внутри одного вида (vv), где n - вид индивида;vi - индивидуальная совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих признаки схожести ткани по индивидуально-типологическим характеристикам (vi), где N - индивид;avt - органная совокупность различий, совокупность веществ, определяющих признаки отличия ткани по органной принадлежности (avt);avv - видовая совокупность различий, совокупность различий веществ, определяющаяся признаками отличий ткани по видовой принадлежности (avv);avi - индивидуальная совокупность различии, совокупность веществ, определяющих признаки отличия ткани по индивидуально-типологическим характеристикам (avi). Заявляемые вещества определяются антигенным набором признаков исходной ткани, но отвечают требованиям формулы в которой значения индивидуальных совокупностей признаков схожести и различий исходной тка- 11018848 ни Navi и Nvi модифицированы заявляемым способом, не проявляют своих свойств и имеют значения,равные нулю, при сохранении полных значений совокупностей признаков сходств и различий исходной ткани по органным и видовым характеристикам. В заявляемых веществах индивидуальнотипологические свойства исходного вещества нивелированы (минимизированы) настолько, насколько свойства этих веществ могут определять признаки индивидуально-типологических сходств и различий этой ткани в живом организме, который способен их распознавать как "свои". Сущность группы изобретений заключается в получении новых иммунологически активных веществ (ИАВ), проявляющих новые свойства, которые можно описывать формулой и которые ложатся в основу диагностики состояния тканей и их лечения. Вся группа веществ, которые могут быть описаны по формуле совокупности сходства и различий, могут быть использованы для целей данного технического решения. Все ИАВ, получаемые по заявляемой технологии, сохраняют совокупность признаков органной и видовой схожести и различий ткани (органную и видовую сингенность), той ткани, из которой они получаются, и могут проявлять одновременно свойства прямого антигена ткани или прямого аутоантигена к идентичной ткани в зависимости от способов его использования и применения. В лабораторных реакциях ИАВ проявляет свойства прямого аутоантигена идентичной ткани, маркером которой оно является, и способно выявлять уровень противотканевых аутоантител, в биологических жидкостях организма индивида. В организме того же вида при парентеральном введении ИАВ проявляет свойство прямого антигена идентичной ткани, маркером которой оно является, приводящее к каскаду иммунных и аутоиммунных реакций, которые ведут к выработке в ответ на его введение в организм антител, которые являются в то же время аутоантителами к идентичной ткани, расположенной в живом организме индивида, приводящее к опосредованному повреждению и лизису этой ткани в живом организме индивида за счет воздействия на нее образовавшихся антител-аутоантител. Описываемое иммунологически активное вещество (ИАВ) обладает свойствами "неполного" антигена ткани индивида, из которого оно получено. Заявляемые варианты вещества относятся к биотехнологически создаваемым веществам, они имеют белковую природу, способны индуцировать образование высокоспецифических противоорганных противотканевых антител (аутоантител) при парентеральном введении, не являясь полным антигеном исходной ткани, из которой оно получено. В его коде отсутствует участок, отвечающий за индивидуальную совместимость ткани. В то же время за счет сингенности органного и видового кода антител-аутоантител индивида-донора или индивида того же вида, вещества способны вступают с ним иммунные реакции в лабораторных условиях. Таким образом, вещество имеет полный набор кодов, отвечающих за органную и видовую принадлежность антигена (оно сингенно исходной ткани по набору органных и видовых признаков), но отлично от него тем, что в кодах вещества отсутствует набор признаков аллогении - индивидуальной гистосовместимости совместимости. Заявляемый способ получения ИАВ обеспечивает достижение перечисленных выше характеристик. Полученные нами ИАВ проявляют свойства антигена и аутоантигена в различных условиях их применения. ИАВ приобретают аллогенные свойства и идентифицируются иммунной системой индивида этого же вида, или иммунной системой организма донора ткани, как чужеродные и против них вырабатываются антитела-аутоантитела, которые способны разрушать идентичную ткань. ИАВ в лабораторных реакциях проявляют свойства аутоантигена и способны выявлять уровень противотканевых аутоантител в биологических жидкостях организма индивида, и они же способны проявлять свойства прямого антигена ткани при парентеральном введении в организм того же вида, приводя реакцию организма к каскаду иммунных и аутоиммунных превращений, которые ведут к выработке в ответ на его введение в организм антител, являющихся в то же время аутоантителами к идентичной ткани, имеющимися в живом организме индивида. Именно нарастающий уровень аутоантител индивида ведет к повреждению и лизису антигенноидентичной (органносингенной) ткани в живом организме индивида. Осуществление изобретения Вещества по заявляемому способу могут быть получены из ткани любого органа (кроме крови) организма любого вида, из ткани транзиторного органа (плаценты), из видоизменной (опухолевой), но интактно развивающейся ткани у индивидуума (донора) и использованы в качестве диагностического вещества или в составе фармакологической композиции, у того же индивида или индивидов такого же биологического вида, для диагностики состояния здоровья ткани, из которой оно получено, для лечения(путем лизиса) участка или всей ткани, находящейся в организме, для контроля за степенью лизиса ткани и оценки результатов лечения этим же веществом. Более подробно этапы способа получения ИАВ раскрыты в табл. 1. Примеры получения веществ по п.1 формулы из тканей различных органов и видов приведены в табл. 2. При введении в организм фармакологическая композиция на основе ИАВ вызывает каскад иммунологических ответов организма индивидуума, приводящий к контролируемому повреждению ткани и клеток этой же ткани внутри организма индивида, изолированному лизису клеток ткани, характеризующийся тем, что ИАВ, входящее в состав фармакологической композиции, способны вызывать цепь иммунологических ответных реакций со стороны иммунной системы организма, при котором образовываются антитела на введенную фармакологическую композицию, которые, являясь антителами против введенного антигена, являются одновременно и высокоспецифичными аутоантителами к той ткани, из которой получено ИАВ, или маркером которой является ИАВ, входящее в состав фармакологической композиции. Фармакологическая композиция, содержащая вещество по п.1, проявляет свойства, которые приводят к последовательному и изолированному лизису ткани, под действием образующихся специфических антител-аутоантител, возникающих в организме в ответ на его введение. Данные свойства заявляемых веществ могут быть использованы для лечения в качестве противоопухолевого средства при онкологической патологии, когда требуется удаление из организма опухолевой ткани. Фармакологическая композиция, содержащая ИАВ, способна маркировать и повреждать ткань, которая до введения вещества, росла и развивалась без контроля со стороны иммунной системы этого организма, была интактна, т.е. не участвовала в иммунных реакциях, имела неконтролируемый рост, не лизировалась, не отторгалась и не утилизировалась организмом самостоятельно и не могла быть выявлена способами иммунного лабораторного контроля. Это же вещество, примененное для целей диагностики, способно выявлять такую ткань в организме (быть онкомаркером) и одновременно быть веществом, которое в лабораторных условиях способно оценивать степень повреждения этой же ткани, т.е. может быть использовано для целей контроля за уровнем литических процессов, происходящих в организме, позволяющих оценивать степень отторжения ткани. Способ диагностики состояния здоровья ткани (тканей) внутреннего органа индивида основан на количественном определении аутоантител, вырабатываемых организмом к исследуемой ткани обследуемого органа или органов. Способ включает исследование пробы образца биологической жидкости индивида и определение количества образовавшихся в биологической жидкости после контакта с ИАВ антител (аутоантител) к исследуемой ткани внутреннего органа (тканям внутренних органов) (противотканевых антител (аутоантител по величине произошедших взаимодействий между аутоантителами, находящимися в образце биологической жидкости индивида и ИАВ, являющимся маркером ткани. Состояние здоровья ткани (тканей) внутренних органов определяют путем сравнения цифровых значений (уровней),выявленных в образце противотканевых антител (аутоантител), с предложенной шкалой уровня здоровья или повреждения ткани. Для целей диагностики могут использоваться качественная и количественная реакции. Причем когда выполняется количественная реакция (иммуноферментная), то выявляется максимально возможное число произошедших взаимодействий антиген-антитело, аутоантиген (аутоантитело) в контролируемой лабораторной реакции, до полного извлечения антител (аутоантител) из образца биологической жидкости и определяется абсолютный уровень антител-аутоантител в образце. Когда проводится качественная иммунная реакция, то регистрируется минимальное (хотя бы одно) взаимодействие антиген-антитело (аутоантиген-аутоантитело) в максимальном разведении (титре) образца биологической пробы (в жидких средах, например, РИГА) или реакция на твердом носителе, когда произошедшее взаимодействие антиген-антитело (аутоантиген-аутоантитело) может быть обнаружено на твердом носителе, например, по изменению цвета, свидетельствующей о произошедшей реакции. Качественная реакция на наличие (отсутствие) выявляемых антител (аутоантител) учитывается следующим образом: если в исходном образце или в полученном разведении (титре) образца происходит хотя бы одно взаимодействие антиген-антитело, которое может быть зарегистрировано в ходе лабораторного исследования, то считается, что образец имеет данные антитела (аутоантитела) и реакция позитивна. В случае, когда в полученном разведении (титре) образца не происходит хотя бы одного взаимодействия антиген-антитело, которое не регистрируется в ходе лабораторного исследования, то считается,что образец не имеет данные антитела (аутоантитела) и реакция негативна. Количественная реакция на наличие (отсутствие) уровня выявляемых антител (аутоантител) осуществляется в реакциях, при которых выявляется общее количество (уровень) антител-аутоантител, может быть оценен и учтен в абсолютных значениях, и непосредственно в исходном образце биологической жидкости без разведения, в физических величинах (мкг/мл, мкг/л т.д.). Качественная реакция может быть также оценена количественно. Тогда должна учитываться последняя позитивная качественная реакция антиген-антитело (аутоантиген-аутоантитело), произошедшая в максимальном разведении исходного образца. В случаях, когда работа производится с разведениями (титрами) исходного образца, производится учет конечной позитивной качественной реакции, произошедшей в максимальном разведении (титре) исходного образца. Тогда позитивная реакция, произошедшая в этом разведении (титре), должна быть отнесена к тому множеству шкалы, в котором выявлена (произошла) эта реакция. Шкала приведена ниже в табл. 2. Совпадение полученных показателей в реакции образца с одним из значений множеств шкалы счи- 17018848 тается совпадением с этим множеством, а количество выявленных аутоантител, соответствующих уровню выявленного множества (пример 1, приведен ниже). Полученный титр определяет количественное содержание (уровень) антител-аутоантител в разведенном образце и может свидетельствовать об исходном уровне выявляемых антител-аутоантител в неразведенном образце. После получения результата и его сравнения со шкалой уровней здоровья ткани дается заключение об исходном состоянии здоровья и степени повреждения ткани. Шкала уровней здоровья ткани - шкала, имеющая цифровое ранжирование (градацию уровней разведения (титров от нулевого значения (образец не разведен) до максимального уровня разведения (максимально до 1:2048), образец разведен в 2048 раз и имеет единицы измерения, соответствующие и кратные степени разведения. Совпадение титра произошедшей реакции с границами титров шкалы считается совпадением множеств разведений (титров) исходного образца. Внутри шкалы выделены множества цифровых значений разведений, соответствующих степени разведения исходного исследуемого образца. Если при учете качественной реакции выявлено отсутствие реакции антиген-антитело (аутоантигенаутоантитело) в исследуемом разведении, то результат считается негативным, делается вывод об отсутствии антител-аутоантител в этом разведении. Множества разведений исходного образца определяются пограничными цифрами внутри шкалы. Минимальные количественные показатели взаимодействий антиген-антитело, аутоантиген-аутоантитело,принадлежат множеству 4-кратных разведений образца до титра 1:4 и составляют множество [0-1:4] (не разведенный образец, разведение образца в 2-3-4 раза). Последовательности множеств значений разведения в шкале определяют цифровые показатели, выявленные в иммунных реакциях и которые могут быть связаны или ассоциированы с разведениями (титрами) образца биологической жидкости. Эти множества значений принадлежат множествам разведений исходного образца. Множества значений находятся в пределах разведения (титров) исследуемого образца и представляют пять основных множеств разведений исходного образца исследуемой жидкости, с помощью которой можно выявить уровень антител-аутоантител и определить состояние исследуемой ткани. Эти множества представлены ниже в виде шкалы в табл. 3. Таблица 3 Шкала множеств разведений исходного образца, уровней выявленных антител-аутоантител и состояния ткани Таким образом, внутри шкалы выделяются пять основных множеств разведений исходного вещества, по которым определяют уровни выявляемых антител-аутоантител и определяют состояние исследуемой ткани. Получаемые результаты сравнивают со шкалой, определяя множество, которому они принадлежат, а выявив нужное множество, определяют полученное значение результата, делают заключение об уровне антител-аутоантител к ткани в исследуемом образце. Множества определяют выявляемые уровни антител-аутоантител. После определения уровня аутоантител в образце можно делать вывод о состоянии здоровья или степени повреждения ткани индивида. При уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1:4-1:8], говорят о здоровом состоянии ткани; при уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1:16-1:32], - результат свидетельствует об уровне антител-аутоантител выше нормы, может свидетельствовать о хроническом патологическом процессе вне обострения или недавнем неблагоприятном воздействии на ткань. Состояние здоровья ткани в этом случае может трактоваться как вариант индивидуальной нормы; при уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1:64-1:128], - результат свидетельствует об обострении хронического патологического процесса ткани или начинающемся процессе острого повреждения ткани, прямом цитотоксическом воздействии инородным агентом на ткань или совокупностью этих факторов. Состояние здоровья ткани должно трактоваться как повреждение и патология; при уровне выяв- 18018848 ленных аутоантител, принадлежащих множеству [1:256-1:512], - результат свидетельствует о тяжелом остром патологическом процессе, происходящим во внутреннем органе и тяжелом повреждении ткани этого органа, состояние здоровья ткани трактуется как заболевание, требуется лечение ткани; при уровне выявляемых аутоантител, принадлежащих множеству [1:1024-1:2948], - результат свидетельствует о начавшемся полном или частичном лизисе ткани, ее гибели и отторжении. Остро возникший и (или) поддерживаемый уровень аутоантител, принадлежащий этому множеству, как правило, не совместим с жизнью всего организма. Состояние здоровья ткани органа и организма должно быть расценено как критическое. Совпадение полученных показателей в реакции разведений образца с одним из значений множеств шкалы считается совпадением с этим множеством, а количество выявленных аутоантител - соответствующим уровню выявленного множества. Отсутствие результата при качественной реакции, или обнаружение результатов реакции в биологической жидкости, равных нулю, свидетельствует о тканевой органной и (или) видовой асингенности образца и использованного маркера, реакция считается негативной и свидетельствует об отсутствии выявляемых антител (аутоантител) в исследуемом образце. Если при проведении качественной реакции в неразведенном образце результат негативен, уровень антител-аутоантител не определяется, то результат реакции считается равным нулю, считают, что антител-аутоантител в пробе биологической жидкости нет. В этом случае считают, что ткань индивида: вариант 1) практически не имеет повреждений, а процесс образования клеток превалирует над их деструкцией; вариант 2) ткань частично или полностью изменила свою антигенную структуру, что может быть в случаях образования NEO-ткани и идет онкопроцесс; вариант 3) в образцах биологических жидкостей организма индивида присутствуют вещества, блокирующие образование противотканевых антител-аутоантител (был прием или введение лекарственных препаратов, блокирующих или уменьшающих реакции образования антител-аутоантител или отторжения трансплантата). При любом из трех вариантов в организме индивида возникает состояние ткани, названное автором"тканевой аутоиммунный вираж", состояние здоровья ткани в этом случае требует углубленной клиникоморфологической диагностики (биопсия, углубленное аппаратное обследование). После получения результатов углубленной диагностики может быть дано определение состояния здоровья или заболевания ткани внутреннего, трансплантируемого или транзиторного органа. При исследовании пробы образца биологической жидкости индивида, при анализе которой использовались одновременно несколько маркеров, где в качестве маркера использованы сразу несколько ИАВ,полученных из разных тканей, следует оценивать результат взаимодействия по каждому из применяемых ИАВ, полученных из разных тканей, и биологической жидкостью образца. Результат взаимодействия по каждому веществу учитывается отдельно, и заключение о состоянии здоровья по каждой ткани проводится отдельно. Совокупность результатов в пробе и результат, полученный по каждому веществу, определяет профиль состояния здоровья тканей, входящих в пробу. По результату пробы может быть дано заключение об общем состоянии здоровья не только ткани, органа, но организма индивида (в случае если использовано достаточное количество ИАВ). Заключение о состоянии здоровья индивида делается исходя из полученных результатов и предложенной шкалы, но каждому органу. При исследовании пробы образца биологической жидкости индивида, при анализе которой использовались одновременно несколько маркеров, где в качестве маркера использованы сразу несколько ИАВ,полученных из разных тканей, в случаях: 1) выявления высоких титров уровней антител-аутоантител во всей пробе биологической жидкости (титр 1:64 и выше по каждому из анализируемых веществ); 2) при получении результатов проб, где в серии использованы варианты веществ по п.1 и результаты по каждому из них (все значения уровней-титров высокие или все низкие), считают, что в организме имеется ряд биологически и (или) иммуноактивных веществ, приводящих к срыву иммунологической толерантности и (или) гиперсенсибилизации организма веществами, способными приводить к дисфункции иммунной системы (состояния тканей при аллергических заболеваниях, ряде аутоиммунных заболеваний (аутоиммунный тиреоидит и т.д.), лечении фармакологическими композициями, содержащими высокие дозы лекарственной субстанции, влияющей на иммунные реакции (глюкокортикоидные гормоны, иммунодепрессанты, цитостатические вещества и т.д.). Количественное определение уровня антител (аутоантител) осуществляют с помощью реакции иммуноферментного анализа, результат учитывают в полученных абсолютном цифровом выражении или условно принятых единицах. Значения шкалы могут отличаться и принимать абсолютные цифровые выражения в различных единицах измерения, если используются различные варианты, методики или аппараты для иммунных реакций. Тогда цифровые, количественные значения, выявленные другим способом в иммунных реакциях,должны быть сравнены с количественным значением антител-аутоантител в титре разведения образца шкалой уровней разведения образца, а затем интерпретированы. Качественной высокочувствительной реакцией, позволяющей проводить выявление с помощью веществ по п.1 минимальных уровней специфических антител (аутоантител) к тканям в образцах биологических жидкостей, являются реакции иммуноферментного анализа. Результат учитывают как позитивный или негативный, а количественные пересчеты проводят при помощи предложенной шкалы. В твердофазных методиках иммуноанализа, позволяющих выявлять происходящие реакции антиген-антитело(аутоантиген-аутоантитело), могут использоваться варианты вещества по п.1, полученные способом по п.2. Использование для реализации реакции твердых носителей позволяет существенно упростить проведение анализа. Возможно использовать следующие типы носителей: 1) трубки (например, стеклянные,полистирольные, полипропиленовые); 2) гранулы (например, активированного полистирола); 3) мелкие частицы (например, полиакриламида, целлюлозы, сефарозы); 4) микропланшеты или полоски (например,полистирольные); 5) дипстики, карточки, стержни (например, полистирольные); 6) электроды (например,платиновые, углеродные); 7) пленки или волокна (например, стеклянные, кварцевые). Если система включает электрод, то ее можно назвать био- или иммуносенсором (биочипом). Пример реализации иммуноДОТ анализа на нитроцеллюлозной мембране приведен ниже. Заявляемое ИАВ может быть использовано для индивидуализированного (персонифицированного) лечения заболеваний тканей органов индивида, которое можно охарактеризовать неконтролируемым ростом клеток ткани (в том числе ткани опухолей злокачественной или доброкачественной природы),требующих прекращения развития процесса роста и образования клеток такой же ткани, из которой получено ИАВ; требующий полного или частичного лизиса и удаления из организма ткани или ее клеток,включающий сенсибилизацию организма нарастающим титром фармакологической композиции с целью вызвать ответную реакцию иммунной системы организма по образованию противотканевых антителаутоантител, содержащей ИАВ, полученным из ткани этого же индивида, и вводимого этому же индивиду парентерально по Безредка, контролируя этим же средством уровни образования антител-аутоантител в биологических жидкостях пациента, соблюдая меры предосторожности и профилактики нежелательных повреждений других тканей, направленные на предотвращение образования в биологических жидкостях организма уровней титров антител-аутоантител, превышающих значения множества [1:256-1:512] в лабораторном контроле. Патогенетический механизм действия предложенного метода лечения заключается в направленной активации иммунной (аутоиммунной) системы и продуцировании высокоспецифичных антител, которые, имея антигенно идентичные (сингенные) участки (органно-видовые) и аллогенный участок организма индивида в своем строении, в ответ на введение фармакологической композиции, содержащей ИАВ, являются противотканевыми - аутоантителами. Образованные организмом аутоантитела имеют противотканевые свойства и способны изолированно и направленно повреждать ту ткань, с которой имеют полностью сингенные участки - эпитопы, в которых зашифрованы органные, видовые и индивидуальные свойства ткани индивида. Эти аутоантитела не могут быть выделены из организма и применены для лечения у другого индивида того же биологического вида, но могут быть определены в его биологических жидкостях с помощью ИАВ, лишенного аллогенных свойств исходной ткани индивида (донора) этого же биологического вида, когда в диагностической системе способно происходить выявление аутоантител, только по сингенным участкам органной и видовой специфичности. Эти свойства фармакологической композиции, содержащей ИАВ, являются ключевыми при проведении лечебного воздействия на ткань, так как позволяют проводить лечение и контролировать его результат одним и тем же ИАВ,которое в случае его введения в организм пациента является основной действующей субстанцией, и являющееся основным компонентом диагностической лабораторной системы, позволяющей дозировать и контролировать ход лечебного процесса. Это возможно, во-первых, потому, что отсутствие аллогенного кода гистосовместимости в ИАВ способно вызывать образование антител в организме другого индивида того же вида, так как его организм расценивает введенное ИАВ как прямой чужеродный антиген, против которого начинает вырабатывать антитела и запускает иммунные реакции антиген-антитело. Во-вторых, полная схожесть (исходная органная и видовая сингенность ткани) антигенных органных и видовых характеристик (кодов) ткани, из которых получено ИАВ и которыми обладает это ИАВ,требует от иммунной системы организма выработки строго идентичных органному и видовому антигенному набору ткани характеристик, которые реализуются в выработке антител, в ответ на введенное вещество. В-третьих, антитела, имеющие идентичные органные и видовые характеристики ИАВ, в то же время идентичны набору антигенных характеристик ткани организма индивида. Вследствие чего вырабатывающиеся антитела способны воздействовать на такую же ткань внутри организма, которая опосредованно начинает вступать в иммунную реакцию под воздействием антител, которые фактически становятся аутоантителами к собственной ткани организма индивида. В-четвертых, образовавшиеся в организме антитела-аутоантитела высокоспецифичны только той ткани, из которой они получены, сингенны только одной ткани по органному и видовому набору антигенных свойств. Другие органные сингении (совпадения по органному коду) в ИАВ исключены. Следовательно, ответ иммунной системы, в котором образование антител с иной антигенной структурой, способной повреждать другие ткани организма, также исключен. Антитела-аутоантитела взаимодействуют прецизионно точно, и только с той тканью, из которой они получены (органная и видовая сингения). Повреждения других тканей организма исключены. Для лечебного воздействия на ткань организма необходимо следующее: 1) получение образца ткани, к которой будет применяться лечебное воздействие, и получение ИАВ заявляемым способом; 2) создание фармакологической композиции, в состав которой будет входить ИАВ - маркер ткани,полученное заявляемым способом из организма пациента, или ИАВ, полученное заявляемым способом из ткани другого пациента (донора) этого же биологического вида, если выявлено, что антигенные характеристики ткани донора и будущего пациента совпадают; 3) активация иммунной и аутоиммунной системы организма пациента путем введения фармакологической композиции, содержащей ИАВ способом, применяемым при введении чужеродных сывороток(модифицированный способ Безредка A.M.). Перед началом лечения проводят обследование пациента. Если состояние здоровья пациента позволяет начать проведение лечения (лабораторные исследования, согласно заявляемой методике, не выявили расстройства здоровья индивида или повреждения других тканей), то перед началом постановки проб и первичном введении фармакологической композиции, содержащей ИАВ, необходимо провести премедикацию (0,05-0,1 мг/кг массы тела глюкортикоидного вещества ввести в/м за 30-45 мин до постановки проб, и наладить внутривенную инфузию изотонического раствора любого кристаллоида, так чтобы к началу пробы его было введено не менее 0,1 мл/кг массы тела). Пункция вены должна сопровождаться обязательным забором крови (не менее 3,0 мл) для анализов на определение состояния здоровья веществами по п.1, способом по п.8. Содержание уровня антител(аутоантител) к ткани организма индивида, к которой применяется лечение, в первичной пробе может быть отрицательным или принадлежать множеству значений [0-1:4]. Если не составлена готовая форма фармакологической композиции и не предусмотрена иная инструкция по введению, необходимо стерильно взять 1 мг сухого лиофилизированного ИАВ, полученного по заявляемому способу, развести 1 мг вещества в 1 мл 0,9% физиологического раствора. Отобрать 0,25 мл полученного раствора и растворить в 4,75 мл 0,9% физиологического раствора, получив концентрацию 50 мкг/мл. Отобрать 0,1 мл раствора и развести до объема 10 мл, получив концентрацию 0,5 мкг/мл. Разведенное таким образом вещество в количестве 0,1 мл вводят внутрикожно в предплечье (верхняя треть внутренней поверхности) для оценки чувствительности организма к препарату. Через 30 мин оценивают чувствительность измерением диаметра папулы. Если диаметр папулы на месте введения не более 1 см, то еще 0,1 мл разведенной сыворотки вводят подкожно. При отсутствии реакции через 30 мин дозу вещества растворяют таким образом, чтобы концентрация раствора не превышала 0,50 мкг в 1,0 мл (например, 50 мкг-1 мл раствора вещества по п.1 растворяют в 100 мл 0,9% физиологического раствора). Подготовленную фармакологическую композицию для инфузии медленно (20-40 кап/мин,1-2 мл/мин) вводят внутривенно из расчета не более 0,01 мкг/кг массы тела. При проведении инфузии проводят контроль (мониторирование) состояния жизненно важных функций организма (дыхание, пульс,АД). При первых признаках изменений числа дыхательных движений, числа сердечных сокращений,изменении артериального давления, беспокойстве пациента, дискомфорте - ведение вещества прекращают и симптомы купируют введением глюкокортикоидных веществ, антигистаминных веществ. Возникновение вышеописанных симптомов расценивают как реакцию взаимодействия, произошедшую между иммунной системой организма и веществом. Пациент должен быть оставлен под стационарным наблюдением не менее чем на 24 ч после процедуры введения вещества. По показаниям, но не реже чем через 12-24-48 ч после введения, проводят анализ биологической жидкости (сыворотки крови), оценивая состояние здоровья тканей внутренних органов и наличие повреждений ткани индивида, по поводу которой проводится лечение. При этом оценку состояния здоровья тканей также проводят по заявляемому способу. В частности, при получении анализов проб биологической жидкости, в которых выявлены значения уровней множеств аутоантител при титрах [1:4-1:8]; [1:161:32], лечебное воздействия считается реализуемым достаточно. В этом случае проводится наблюдение за организмом индивида-пациента и тканью, на которую оказывается воздействие до получения требуемого результата, проводятся повторные сеансы введения ИАВ. Если выявлены значения уровней множеств аутоантител [1:64-1:128], то считают, что лечебное воздействие высокоэффективно, повторные сеансы введения вещества прекращают. Проводят наблюдение за пациентом. При уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1:256-1:512], - лечебное воздействие считают чрезмерным и принимают меры к снижению множества значений уровней аутоантител, вводя глюкокортикоидные гормоны, десенсибилизирующие и антигистаминные лекарства, проводят инфузионную терапию растворами кристаллоидов из расчета 15-20 мл/кг, применяют методы детоксикации, вплоть до проведения плазмафереза, до нормализации множества значений уровней аутоантител в пробах биологических жидкостей. Превышение значений уровней аутоантител, принадлежащих множеству [1:1024-1:2048], не допустимо и может сопровождаться гибелью всего организма. Если диаметр папулы через 30 мин после первичного введения разведенной фармакологической композиции, содержащей ИАВ внутрикожно более 1 см, тогда выполняются следующие действия: в/в введение 1-2 мг/ кг глюкокортикоидного гормона (преднизолон), последовательно с интервалом в 30 мин проводится подкожное введение разведенной фармакологической композиции, содержащей вещество по п.1, в количестве 0,2, 0,5, 1,0, 2,0, 5,0 мл, далее проводится внутривенная инфузия, как было описано выше. При появлении реакции на какую-либо дробную дозу сыворотки вводят 2 мг/кг массы тела глюкокортикоидного гормона (преднизолон) в/в и проводят анализ пробы биологической жидкости на уровень аутоантител. Разработанная технология позволяет получать новые иммунологически активные вещества, специфичные для типированной ткани практически любого органа человека или животного. Они представляют собой вещества белковой природы, а именно иммуноглобулины, относящиеся в основном к классу М. Обнаружено, что ИАВ являются специфическими аутоантигенами к типируемой ткани, характеризующимися признаками белковых структур иммуноглобулинов класса G (Ig M), участвующими в срочных реакциях в сыворотке крови, имеющими высокую индивидуальную, органную и видовую специфичность, циркулирующими постоянно в сыворотке крови и имеющими количественную зависимость от процессов жизнедеятельности и состояния исследуемой ткани. Количество выявляемых в сыворотке аутоантител ткани может варьироваться, имея линейную зависимость от морфологического состояния субстрата. Причем уровни выявляемых аутоантител характеризуют не только уровень обменных процессов в ткани или органе, но и отражают состояние их повреждения под действием экзо и эндогенных факторов, влияющих на эту ткань или орган. Увеличение количества определяемых аутоантител в сыворотке крови может последовательно характеризовать состояние здоровья исследуемой ткани. Заявляемая методика позволяет дифференцировать уровни практического здоровья, состояния хронического или латентного повреждения органов, состояния острого повреждения органов и их вовлечения в патологический процесс, прогнозировать угрозы аутоиммунного поражения и отторжения тканей органов. Таким образом, исследование способно выявить состояние организма: латентно текущую болезнь, предстоящую грозящую катастрофу здоровья или критическое положение ткани. Определение аутоантител в сыворотке крови открывает новые перспективы для лабораторной диагностики состояния органов и тканей человека и животных, позволяющих напрямую оценивать состояние здоровья или поражения органов и тканей в исследуемой пробе. Заявляемая группа технических решений позволяет создать полную линейку диагностических наборов для количественной оценки уровня аутоиммунных маркеров в сыворотке крови тканей органов животных и человека способом ИФА, для определения аутоиммунного статуса органов всего организма. Проведение анализа по определению аутоиммунного статуса тканей и органов позволит напрямую судить о состоянии здоровья, угрозах и степени заболевания внутренних органов, отслеживать динамику выздоровления всего организма или его отдельных органов. Данная методика является новым дополнением к уже имеющимся способам диагностики. Отличительной особенностью данного лабораторного метода является не косвенная (опосредованная через продукты жизнедеятельности и функции органов) оценка их морфологического состояния, а прямое количественное определение аутоантител, вырабатываемых организмом к исследуемому органу или ткани. Циркулирующие аутоантитела в сыворотке крови определяются к каждому органу и имеют свои количественные значения. Число выявляемых аутоантител в сыворотке крови к исследуемым органам или тканям в организме может рассматриваться как новая биологическая константа, характеризующая аутоиммунную систему организма, с присущей и варьирующейся у человека и животных характеристикой. Для подтверждения возможности реализации группы изобретений и достижения заявленного технического результата было установлено и использовано более 20 таких новых биологических характеристик, позволяющих оценивать аутоиммунный профиль органов в организме человека и более 70 показателей, позволяющих характеризовать аутоиммунное состояние здоровья животного. Согласно заявляемому способу был получен ряд из 20 иммунологически активных веществ, которые были использованы для диагностики заболеваний внутренних органов человека и животных путем прямого лабораторного контроля за состоянием внутренних органов, определяемых в сыворотке крови. Вещества были адаптированы к проведению иммуноферментного анализа сыворотки крови и были способны выявлять дисфункции органов на ранних стадиях. В процессе проведения исследований полученных ИАВ был разработан и унифицирован способ трактовки результатов лабораторных тестов. Ниже представлено описание проведенных экспериментов и результатов экспериментов, подтверждающих наличие парциальной (частичной) органной и видовой сингенности иммуноактивного вещества с описанием их свойств. В процессе исследований были проверены следующие предположения. Если заявляемое ИАВ имеет полностью сохраненные антигенные характеристики исходного органа и видовой код исходной ткани (частичная, парциальная сингенность), из которой оно было получено, то особенностью вещества будет являться "неполнота" исходного антигенного кода присущей всей ткани,из которой это вещество получено. Эта "неполнота" и будет определять частичную сингенность. Причем у ИАВ, получаемого заявляемым способом, при полностью сохраненных свойствах антигенных характе- 22018848 ристик ткани органа, индивидуальные антигенные свойства этой же исходной ткани должны быть нивелированы настолько, что оно будет способно вступать в иммунную реакцию антиген-антитело, аутоантиген-аутоантитело в биологических жидкостях, взятых у различных индивидуумов одного биологического вида, только со специфическими аутоантителами органа, без вступления в неспецифические реакции,которые могут провоцироваться особенностями индивидуальных различий в пробах у разных субъектов. Если вещество способно будет влиять на активность иммунной и аутоиммунной систем организма, то только через каскад иммунных и аутоиммунных реакций, которые будут продуцировать антитела (аутоантитела) в ответ на введение ИАВ опосредованно, влияя повышенными уровнями противоорганных аутоантител на саму ткань. Антитела к веществу, имеющему частичную органную сингенность, которые образуются в ответ на его введение, будут идентичны ткани органа, из которого получено это вещество. Продуцирование антител иммунной системой организма, в ответ на введение ИАВ, имеет строгие закономерности. Антитела по своему информационному коду идентичны ткани органа, из которой получено вещество. Продуцируемые организмом антитела являются антителами против вещества. Но вещество имеет полную антигенную схожесть (органную сингенность) с тканью органа, из которого оно получено. Поэтому продуцируемые антитела будут иметь свойства уже аутоантитела к ткани органа организма, с тканью которой схоже ИАВ, из которого оно получено. Значит, продуцируемые иммунной системой антитела в ответ на введение вещества будут иметь противоорганные, противотканевые характеристики и свойства. Эти противоорганные аутоантитела будут иметь индивидуальный код организма, что позволяет им не вступать в перекрестные иммунные реакции и не повреждать клетки тканей других органов индивида, а оказывать только противоорганное противотканевое повреждающее действие. В качестве объекта исследования выступало ИАВ, полученное заявляемым способом из ткани печени морской свинки. При этом для получения ИАВ был осуществлен забор исходной ткани, ее типирование, консервация замораживанием, после чего исходную ткань подвергали многократному процессу замораживания и оттаивания. Оттаивание ткани осуществляли воздействием СВЧ-излучения с удалением образующейся в процессе оттаивания влаги. Ткань дегидратировали на 43% (до достижения параметров остаточной влажности 57%). СВЧ-воздействие осуществляли при частоте длины волны 2450-2500 МГц мощностью источника излучения 700-900 Вт в течение времени 20 с, при котором кристаллизовавшаяся на поверхности замороженной ткани вода переходила в жидкое состояние. Полученную в результате такой обработки исходную ткань измельчали, гомогенизировали, обеззараживали путем добавления в гомогенат ткани 0,5% водного раствора формалина до 5-10% от общего объема исходного материала с последующим смешением и экспозицией смеси в течение 4 ч и экстрагировали по Грассе, полученный супернатант подвергали стандартизации по белку от 20-25 мг на 1 мл и лиофильно высушивали. Полученный таким образом экспериментальный материал в виде субстанции ИАВ парентерально вводили лабораторным животным - морским свинкам и лабораторным крысам, отобранным случайным образом, не имеющим сингенных инбредных линий. В эксперименте участвовало 27 здоровых животных(14 морских свинок (350-450 г) и 13 лабораторных крыс (250-400 г. Эксперимент проводили на молодых (2-3 месяцев) апатогенных животных. Животные содержались в соответствии с правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для научных целей. По окончании эксперимента животных забивали методом цервикальной дислокации с соблюдением "Правил работ с использованием экспериментальных животных", утвержденных приказом МЗ России. В группе морских свинок определили контроль, группу из 3 животных, у одного из которых был осуществлен забор ткани печени, из которой было получено заявляемым способом ИАВ. Эта ткань также исследовалась электронной микроскопией и была принята за ультраструктурный контрольный образец и эталон неповрежденной ткани нормальной печени животного, с которым сравнивались экспериментальные образцы. Образцы тканей печени фиксировали в 2,3% растворе глютаральдегида на 0,1 М какодилатном буфере в течение 1 ч с дофиксацией в 1% OsO4 по G. Palade (1952). После дегидратации препарат заливали в эпоксидные смолы методом A. Spurr (1969). Ткань контрастировали в кусочках 0,5% раствора уранилацетата и на сеточках по F. Reynolds (1963). Срезы готовили на ультратоме LKB. Препараты исследовали на микроскопе Hitachi HU-12 А при ускоряющем напряжении 75 кВ. У всех животных забиралась кровь для исследования сыворотки на уровень противоорганных противопеченочных аутоантител и противотканевых аутоантител к тканям сердца, легких, мозга и почек. Ниже приведена табл. 4 усредненных значений исходных титров аутоантител к тканям внутренних органов в подгруппах экспериментальных животных - тканям сердца, легких, печени и почек. Таблица 4 Для выявления уровня противотканевых противоорганных аутоантител у крыс проводились классические серологические иммунологические реакции, а также использовались методы иммунных реак- 23018848 ций, в которых позитивные реакции выявлялись колорометрически и могли быть приведены к качественным или количественным показателям в зависимости от текущей лабораторной задачи. Реакции проводились по традиционной методике, в которой в качестве маркера использовалось ИАВ, полученное заявляемым способом. Для интерпретации значений титров были использованы ранее приведенные рекомендации. Следует сделать общее заключение, что уровень титров аутоантител к обследуемым тканям внутренних органов экспериментальных животных не выходит за рамки физиологической нормы. Внутренние органы не имеют лабораторных данных, позволяющих расценивать их как поврежденные или больные. Далее всем животным экспериментальной группы (11 морских свинок и 12 крыс) было введено заявляемое ИАВ в начальной расчетной дозе 0,01 мкг. Через 4-6 ч двигательная и пищевая активность всех животных уменьшилась, в экспериментальной подгруппе крыс расстройства возникли на 1-1,5 ч раньше. Через 12-18 ч двигательная и пищевая активность морских свинок стала восстанавливаться до исходной. Все животные пережили первичную дозу введенного вещества в течение минимум 48 ч. В экспериментальной группе крыс двигательная и пищевая активность полностью не восстановилась через 24 ч, двое животных пали, 10 животных пережили 48 ч. Через 48 ч 6 морским свинкам и 7 крысам введена повторно расчетная полная доза исследуемого вещества по ранее разработанной схеме после премедикации преднизолоном. Через 24 ч после повторного введения вещества (72 ч эксперимента) в экспериментальной подгруппе морских свинок пало 2 животных, 4 животных перенесли введение препарата повторно. Двое из пяти животных, которым было осуществлено введение вещества 72 ч назад, вновь снизили двигательную и пищевую активность, трое животных, которым не проводилось повторное введение препарата, не проявляли расстройства здоровья,снижение двигательной и пищевой активности в сравнении с контрольной группой. Через 120 ч в экспериментальной подгруппе морских свинок оставались живыми 8 животных (пало животное, получившее 1-кратно введение вещества 100 ч назад). Двое животных из числа получивших повторное введение вещества имели болезненный вид: не двигались и не питались. Они пали в течение ближайших 12-16 ч. Через 168 ч (7 суток) пали все свинки, получившие повторное введение вещества, и одна свинка, получившая 1-кратное введение вещества в первые 24 ч эксперимента. Через 48 ч в экспериментальной подгруппе лабораторных крыс, через 1-2 ч после введения препарата повторно погибло 3 животных, остальные пали через 6-8 ч после повторного введения вещества. Павшие животные были вскрыты и у них исследованы внутренние органы. У всех животных обнаружены признаки, которые характеризовали реакцию организма крысы на токсико-аллергическую форму шока (анафилаксический шок). Экспериментальные животные (3 крысы), которым не проводилось повторное введение вещества, также пали в течение 72-80 ч эксперимента. Таким образом, в экспериментальной группе крыс погибли все животные, которым осуществлялось введение вещества. Повторное введение вещества резко усугубило состояние экспериментального животного и привело к его гибели в течение максимально 6 ч после повторного введения. Живыми остались через 240 ч (через 10 суток) все животные из контрольных групп (крыса и морские свинки) и две свинки из экспериментальной подгруппы,получившие 1-кратное ведение вещества в первые сутки эксперимента. Животные из экспериментальной группы морских свинок, пережившие 1-кратное введение вещества, были забиты и у них было произведено исследование внутренних органов. При вскрытии были обнаружены локальные зоны поражения печеночной ткани у обоих животных. Они имели звездчатую форму рубцовой ткани с зоной умеренного воспаления. Эти участки из стромы печени были подвергнуты обычной и электронной микроскопии. На фиг. 1-6 представлены электронограммы ультраструктуры ткани печени животных в контрольном образце и в экспериментальной группе. В качестве основного контрольного образца ткани приведена одна из типичных микроэлектронограмм образца ткани интактной печени морской свинки. На фиг. 1 представлена ультраструктура печени морской свинки в контрольном образце с 8000-кратным увеличением. На фиг. 1 видны жировые капли (Ж); просвет синусоида (С); пространство Диссе (Д); паренхиматозные печеночные клетки (П); ядро лииоцита (Я); митохондрии (М). Печночные клетки (гепатоциты) составляют около 50-60% массы печени морской свинки. Они имеют полиморфную полигональную форму и диаметр, равный приблизительно 30-50 мкм. Это одно-двух ядерные, реже многоядерные клетки, которые делятся путм митоза. Продолжительность жизни гепатоцитов у экспериментальных животных составляет около 150 дней. Гепатоцит граничит с синусоидом и пространством Диссе, с жлчным канальцем и соседними гепатоцитами. В контроле - неповрежденная ткань печени животного - паренхиматозные печеночные клетки гепатоциты четко выражены, имеют контурирующие округлые ядра и хорошую конденсацию хроматина. Мембраны контурированы, структурны, хорошо очерчены. Ядро звездчатой клетки (липоцита) имеет овальную форму и хорошо структурированную ядерную мембрану. Цитоплазма имеет хорошо различимые выросты и отложения в виде жировых "пятен". Цитоплазма заполнена электронно-плотными гранулами с неоднородной плотностью. На фиг. 1 различимы митохондрии и структурный участок эндотелиальной клетки (синусоид). Были получены разведения заявляемого ИАВ 0,1 мкг-10 мл. Полученный раствор вещества вводил- 24018848 ся животным из расчета полной дозы 0,01 мкг на каждые 100 г массы тела животного дробно, подкожно и внутримышечно с интервалом 30 мин, начиная с дозы 0,01 мкг. В качестве премедикации применяли преднизолон 5 мг внутримышечно за 1 ч до введения вещества всем животным без учета массы тела и вида животного. Кровь животного забирали до введения вещества и далее повторно через сутки, определяя значения уровней аутоантител к ткани печени, сердца и легких. Наблюдение за животными проводили в период всего действия, оказываемого веществом на животное, после введения начальной дозы. При микроскопическом исследовании были выявлены участки склероза ткани, ограниченные зоной воспаления. При углубленном электронно-микроскопическом исследовании была получена картина повреждения, возникающая в ткани при парентеральном введении заявляемого вещества, которое носит не обратимый характер и полностью лишает ткань типичных клеток. На фиг. 2 представлена электронограмма участка локального повреждения печени морской свинки, прижизненно возникшего под действием ИАВ из ткани печени морской свинки (увеличение 7500). На фиг. 2 виден результат повреждающего действия заявляемого ИАВ на идентичную ткань печени морской свинки другой особи. Такие изменения ткани могли возникнуть под действием только высокоспецифичного агента, имеющего практически полное генетическое сродство с тканью. Причем изменения носят прижизненный характер и ткань, лишенная специфических участков (паренхимы печени),склерозируется. Ткань печени, пережившая повреждающее действие заявляемым ИАВ, представляет собой цитоскелет из эндотелиальных клеток ткани печени, не содержащий гепатоцитов, содержащий остатки мембран и содержимого звездчатых клеток, полностью утративших жировые капли, напоминающих собой структуры фибробластов и миофибробластов, т.е. рубцовую ткань печени. С учетом того, что препарат для исследования забран у живого животного, не имевшего признаков заболевания, а точнее пережившее повреждение, можно с уверенностью говорить о том, что исследуемое ИАВ из ткани печени морской свинки, при парентеральном введении оказывает изолированное воздействие на ткань печени. Причем при вскрытии экспериментального животного не обнаружены выраженные изменения других внутренних органов, которые бы выходили за рамки принятых норм. Это обстоятельство еще раз подтверждает утверждения о том, что исследуемое вещество оказывает изолированное воздействие только на специфичную ткань, ту, из которой оно получено. В ходе эксперимента все трупы животных экспериментальной подгруппы морских свинок поэтапно вскрывали и проводили патоморфологическое и патологоанатомическое исследование. Результаты вскрытия не имели выраженных отличий. Животные пали от поражения ткани печени. При вскрытии обнаруживались признаки острого некроза ткани печени, острой дистрофии, гепатита, билиарного цирроза, желтухи. Все животные потеряли от 10 до 25% исходного веса. Ниже представлен типичный результат и заключение патоморфологического и патологоанатомического исследования трупа экспериментального животного - морской свинки, павшей после введения ИАВ. Обнаружены единичные кровоизлияния слизистой и брюшины, выпота в плевральной полости нет,умеренный отек внутренних органов, набухание и отек лимфатических узлов портальной зоны, кровоизлияния в лимфоузлы, лимонный цвет склер и слизистых. Селезенка увеличена, плотная на ощупь с плотной полнокровной пульпой; цвет под капсулой лилово-бурый, на разрезе красно-бурый. Печень отечна,кровенаполнена, мозаичный рисунок на фоне общего краснобуро-коричневого цвета, имеются небольшие ограниченные участки оранжево-желто-белого цвета, края закруглены. Обнаруживается фибринозное воспаление капсулы печени с обильным отложением фибрина на участках поверхности печени, изменившей цвет, в виде студневидных легко отделяющихся масс. Сама печень при этом увеличена в объеме, дряблой консистенции. Желчный пузырь с тягучей темной красно-коричневой желчью. Почки отечны, капсула легко снимается, корковое вещество - темно-красное, мозговое - серо-красное. В мочевом пузыре содержится моча насыщенно желтого цвета. Сердце имеет округлую форму, плотно-эластичное,на разрезе красно-бурого цвета, сгустки крови в полостях. Миокард красного цвета, клапаны не изменены, без кровоизлияний. Легкие - розовые, несколько полнокровны, с приподнятыми над поверхностью плотными участками, без кровоизлияний под плеврой. В бронхах небольшое количество слизи. Слизистая оболочка желудка не изменена. Слизистая тонкого отдела кишечника покрыта слоем густой слизи. Головной мозг влажный, извилины хорошо контурируются, дифференцируется белое и серое вещество мозга. Патологоанатомические диагнозы: желтуха; региональный геморрагический лимфаденит; острый гепатит; признаки билиарного цирроза. Экспериментальное заключение: первичное острое изолированное повреждение ткани печени, вторичные изменения тканей внутренних органов. Лабораторные данные оценки уровней аутоантител к тканям внутренних органов в образце сыворотки крови морской свинки, павшей через 70 ч от начала эксперимента и получившей 2-кратное введение исследуемого вещества, представлены в табл. 5. Из табл. 5 видно, что титры аутоантител к ткани сердца и легких выше нормы, также как и значения титров аутоантител к ткани почек, что может свидетельствовать об остром повреждении или заболевании внутренних органов. Но прежде всего, обращает на себя внимание титр аутоантител к ткани печени,который свидетельствует о прямом остром и тяжелом ее повреждении и лизисе. Следует отметить, что в качестве маркера лабораторного агента в иммунной реакции использовано исследуемое вещество. Далее представлены результаты этапной электронной микроскопии ткани печени, подвергшейся воздействию исследуемого вещества. Препараты ткани печени для электронной микроскопии готовили по выше описанной методике. Исследования ткани печени проводились этапно у павших животных. На фиг. 3 представлена электронограмма ультраструктуры ткани печени морской свинки, подвергшейся 2-кратному введению исследуемого вещества, и павшей через 100 ч начала эксперимента. Увеличение 8000. Приводим данные исследования ткани печени экспериментального животного (морской свинки),подвергшейся и павшей через 100 ч после начала эксперимента (ткань печени при 8000-кратном увеличении электронным микроскопом). На фиг. 3 виден результат повреждающего действия агента (исследуемого вещества по п.1). Видна возникающая баллонная дистрофия печеночных клеток, лизис и повреждения клеточных мембран, разрушение и гибель ядерного аппарата, цитоплазмы и клеточных элементов, с полным или частичным выходом продуктов лизиса в межуточную ткань и внутренние среды органа и организма. Заявляемое ИАВ оказывает специфическое повреждающее воздействие на ткань печени. Такие изменения могут приводить к последующей деструкции ткани, нарушению клеточных отношений внутри ткани, с возможностью склерозирования поврежденных участков. На электронограмме (фиг. 4, увеличение 5600) другого препарата видно повреждение, возникшее в ткани печени морской свинки, павшей через 72 ч начала эксперимента после повторного введения исследуемого вещества. На фиг. 4 видно скопление ядерного хроматина и участки разрыва, повреждения клеточных мембран. На следующем препарате, полученном из ткани печени морской свинки, также павшей через 72 ч начала эксперимента после повторного введения исследуемого вещества (фиг. 5 - электронограмма с 8200-кратным увеличением), видны зоны скопления филаментов, мозаично упорядоченной формы, характеризующие цитоплазмическую конденсацию белковых структур, коллагенизация пространства Диссе, разрозненные участки филаментов и ядра хроматина, расположенные за пределами клеточной мембраны, капли жира и картина баллонной дистрофии печеночных клеток, конгломерат клеток-теней, дистрофически измененных клеток паренхимы. Ультраструктурный анализ клеток-теней показал, что первым признаком деструкции являлось разрушение ядерной мембраны, затем возникал лизис хроматина при еще относительно сохранной цитоплазме, трансформация цитоплазмы и последовательная ее дистрофия, с формированием картины баллонной дистрофии гепатоцита. Такая стадийность повреждения печеночных клеток видна на фиг. 5. Таким образом, визуализируются гепатоциты различных размеров, отсутствуют их полиморфные и сердцевидные формы. Все гепатоциты имеют круглоовальную форму, что может свидетельствовать о повышении внутриклеточного давления в ответ на возникшее повреждение внутриклеточной структуры и клеточных элементов. Этими обстоятельствами может обуславливаться и различная степень концентрации хроматина внутри клетки. Видны повреждения клеточных мембран. Мембраны имеют различную толщину, что также свидетельствует об их участии в процессе повреждения клетки. Часть гепатоцитов имеет признаки баллонной дистрофии, а в ряде клеток виден лизис их цитоплазмы. Ядра звездчатых клеток деформированы, их мембраны неоднородны и повреждены, цитоплазма неоднородна. Капли жира и ядра хроматина в межуточной ткани. Отсутствия ядер внутри подавляющего количества гептоцитов. Картина свидетельствует об этапности повреждения ткани, что в свою очередь позволяет говорить о возможности осуществлять этапное и дозированное воздействие на процессы лизиса ткани, возможности оценивать и эффективно влиять на силу и величину наносимого повреждения. На фиг. 6 приведена электронограмма ультраструктуры ткани печени морской свинки, павшей через 132 ч после начала эксперимента и получившая 2-кратную дозу исследуемого вещества. Электронограмма сделана при 8000-кратном увеличении. На фиг. 6 видно уплотнение межуточной ткани, пространства Диссе, уплотнение внутриклеточных структур и цитоплазмы, склерозирование гепатоцита. Разрыв мембраны липотоцита и выраженные участки ее утолщения, наряду с конденсацией и уплотнением внутренней структуры звездчатой клетки, может характеризоваться как начавшийся процесс склерозирования ткани, подвергавшейся дистрофии и некрозу. Это может свидетельствовать о прижизненно начавшихся процессах внутри органа, ведущих к восстановлению жизнеспособности ткани после повре- 26018848 ждения, локальности повреждения. Таким образом, можно сделать вывод о том, что введение исследуемого заявляемого вещества, полученного из ткани печени морской свинки, приводит к изолированному повреждению паренхимы ткани печени экспериментального животного морской свинки, без повреждения других внутренних тканей организма животного. Повреждение, наносимое веществом, носит изолированный, но необратимый характер, может регулироваться по силе и объему повреждения. Экспериментальное животное способно переносить введение вещества. Экспериментальная подгруппа, объединявшая лабораторных крыс, тяжелее перенесла введение исследуемого вещества. Среди животных этой подгруппы, выживших особей, перенесших 2-кратное введение вещества, не было. Все животные пали, не пережив 50 ч эксперимента. Через 120 ч эксперимента в экспериментальной подгруппе лабораторных крыс осталось живым единственное животное (контрольное). Контрольное животное наблюдалось до 10 суток и не имело признаков заболевания или изменений образа жизни. Ниже представлен типичный результат и заключение патоморфологического и патологоанатомического исследования трупов экспериментальных животных - крыс. Обнаружены кровоизлияния слизистых и брюшины, транссудат красного цвета в плевральной полости, выраженный отек внутренних органов, набухание и отек лимфатических узлов, которые имеют сглаженность строения и серо-розовый или серо-желтый цвет, кровоизлияния в лимфоузлы, лимонный цвет склер и слизистых. Селезенка гиперплазирована: плотная, с круглыми краями, напряженной капсулой, с выбухающей плотной пульпой; цвет под капсулой лиловый, на разрезе красно-бурый. Печень припухшая, плотная, ломкая, оранжево-коричневого цвета, края закруглены. Желчный пузырь переполнен тягучей темной красно-коричневой желчью. Почки дряблые, набухшие, капсула легко снимается, края разреза не сходятся, корковое вещество - темно-красное, мозговое - серо-красное. В мочевом пузыре содержится моча густого красного с бурым оттенком цвета, не просветляющаяся при отстаивании, то есть окрашенная гемоглобином. Слизистая оболочка мочевого пузыря набухшая, с кровоизлияниями. Сердце имеет округлую форму и рыхлые бледно-красные сгустки в полостях. Миокард серо-розовый с желтоватыми участками, тусклый, легко раздавливается ручкой скальпеля; под эпикардом - кровоизлияния. Легкие - розовые, крепитирующие, с приподнятыми над поверхностью плотными участками красными и белыми с геморрагическим ободком; с диффузными кровоизлияниями под пульмональной плеврой; с небольшими очагами эмфиземы. В бронхах содержится густая розовая пена. Слизистая оболочка желудка усеяна окрашенными в черный цвет кровоизлияниями. Слизистая тонкого отдела кишечника утолщена, гиперемирована, покрыта слоем густой желтоватой слизи. Головной мозг слегка набухший, влажный,извилины сглажены. Патологоанатомические диагнозы: геморрагический диатез, гиперплазия селезенки, серозногеморрагический лимфаденит, острый гепатит, желтуха, анемия, белковый нефроз, гемоглобинурия, острый альтеративный миокардит, геморрагическая пневмония, катаральный энтерит, отек мозга. Экспериментальное заключение: острое токсико-аллергическое поражение тканей внутренних органов, с преимущественным поражением легких, печени, почек. Лабораторные данные оценки уровней аутоантител (значения титров аутоантител) к тканям внутренних органов в образце сыворотки крови лабораторной крысы - самца, посмертно забранной через 50 ч после начала эксперимента, и павшего через 2 ч после повторного введения заявляемого вещества, представлены в табл. 6. Таблица 6 Анализ значений титров аутоантител к тканям внутренних органов экспериментальной крысы позволяет сделать заключение об остром тяжелом общем поражении тканей внутренних органов, не совместимых с жизнью. Электронная микроскопия ткани печени крыс не проводилась. Совокупность полученных данных обследования, наблюдения и лабораторных исследований позволяют сделать следующее заключение. Исследуемое вещество оказывает тяжелое общее воздействие на организм экспериментального животного другого вида, приводя к несовместимым с жизнью последствиям и повреждениям внутренних органов. Поражающее действие вещества основано на типичной анафилактической реакции, приводящей к шоку и гибели животного, развивающейся в ответ на его введение, как высокочужеродного антигена. Преимущественным местом повреждения являются органы жизнеобеспечения организма экспериментального животного. Имеющееся поражение печени экспериментального животного не может убедительно свидетельствовать о локально наносимом повреждении только этой ткани. Проведенные исследования и эксперименты свидетельствуют о том, что: заявляемое ИАВ лишено аллогенных свойств исходной ткани органа за счет чего оказывает высокоспецифическое действие на иммунную (аутоиммунную) систему организма, проявляющееся в том, что иммунная система организма способна продуцировать антитела в ответ на его введение; заявляемое ИАВ имеет хотя бы один антигенный (частично или парциально сингенный, органносингенный) участок в своей композиции, который вызывает изолированный высокоспецифический ответ иммунной (аутоиммунной) системы организма того же вида, проявляющийся в том, что происходит лизис аналогичной ткани внутри живого организма, в ответ на его парентеральное введение (иммунизацию); заявляемое ИАВ вызывает высокоспецифический ответ иммунной (аутоиммунной) системы в организмах индивидов других видов, проявляющийся в том, что происходит анафилактическая шоковая реакция живого организма в ответ на его парентеральное введение (иммунизацию), приводящая к гибели организма как реакция на введение чужеродного антигена; заявляемое ИАВ имеет хотя бы один антигенный (сингенный) участок в своей композиции, который способен выявлять высокоспецифические антитела (аутоантитела) против ткани живого организма,циркулирующие во внутренних биологических жидкостях организма (в том числе сыворотке крови) того же вида, в лабораторных иммунных реакциях, образуя комплексы антиген-антитело; происходящий изолированный лизис аналогичной ткани внутри живого организма в ответ на парентеральное введение (иммунизацию) заявляемого вещества обусловлен нарастающим титром частично сингенных веществу противотканевых, противоорганных антител (аутоантител). Таким образом, заявляемое вещество характеризуется следующей совокупностью свойств: способностью вызывать иммунный ответ, вызывать изолированный лизис типичных клеток той ткани, к которой оно принадлежит и (или) из которой оно получено, не вызывая повреждения не типичной ткани(стромы ткани органа) и других органов в живом организме. Заявляемая совокупность свойств позволяет использовать заявляемое ИАВ в качестве маркера при осуществлении лабораторного контроля за: уровнем повреждения ткани путем выявления уровня продуцируемых организмом аутоантител к веществу и являющихся противотканевыми аутоантителами организма к такой же ткани; состоянием здоровья индивидуума путем выявления повреждений тканей внутренних органов путем лабораторного определения уровня продуцируемых организмом противотканевых аутоантител при болезни и в состоянии здоровья. Пример 1. Выявление маркера ткани печени человека с помощью иммуноферментного анализа. Выявление антител на маркер вещества ткани печени человека в сыворотке крови с помощью иммуноферментного анализа. Наличие специфических аутоантител (класса IgM) к ткани печени человека в сыворотке крови человека было протестировано и установлено с помощью проведения иммуноферментного анализа. Проведены серии экспериментов с веществом, полученным из ткани печени человека. На фиг. 11 представлены кривые полученных данных. При ИФА выявлены специфические аутоантитела к ткани печени человека класса IgM. Пример 2. Использование веществ по п.1, полученных способом по п.2, для оценки уровня антителаутоантител тканей органов в РНГА (реакции непрямой гемокоагуляции). Реакция непрямой гемокоагуляции проводится по классической методике. Для сенсибилизации формализированных эритроцитов барана выбираются вещества по п.1, полученные способом по п.2. В приводимом примере использованы вещества, полученные из тканей сердца, печени, почек, желудка,ткани сосудов плаценты и хориона. Результат произошедшего взаимодействия веществ по п.1, полученных способом по п.2, и противоорганных антител-аутоантител в разведениях сыворотки крови пациента оценивали визуально через 90 мин после постановки реакции. Результат вносили в протокол. Исходили из следующих положений:+ - положительный результат, оценивается визуально по характерной форме "зонтик";- пограничный результат, "не зонтик и не кольцо";- негативный результат, оценивается визуально по характерной форме "кольцо". Для исследования была отобрана сыворотка крови пациента, после проведения исследования выявлен титр аутоантител к тканям исследованных органов (фиг. 12). Результат обобщен протоколом, который приведен в табл. 7. Таблица 7 Протокол уровней антител-аутоантител к тканям в реакции РНГА Пациент О., возраст 36 лет, диагноз: беременность 40 нед., гестоз средней степени В протоколе имеются высокие титры антител-аутоантител к ткани плаценты (хорион и сосуды). Плацента - транзиторный орган, который отторгается при родах. У обследуемого беременность 40 недель. Заключение: зрелая плацента, идет ее отторжение. Пациент вступил в роды. У данного пациента началась родовая деятельность через 6 ч после проведения анализа. Пример 3. ВЭЖХ анализ веществ по п.1, полученных способом по п.2, из ткани печени и почек человека. Были проведены исследования преподготовленных лиофилизированных образцов веществ по п.1,полученных способом по п.2, из тканей различных органов. Образцы растворяли в 25 мМ Tris-HCl буфере (рН 7.2) до концентрации 0,5 мг/мл, дополнительно обессоливали на колонке PD-10 (содержащейSephadex G-25). ВЭЖХ анализ проводили с помощью хроматографической системы SmartLine 5000(Knauer) на колонке TSK Bioassist-Q (550 мм), в следующих условиях: буфер - 25 mM Tris-HCl (рН 7.2); линейный градиент -01 М NaCl в течение 60 мин; скорость - 0,5 мл/мин; детекция фотометрическая на длине волны 280 нм; объем наносимого образца - 1 мл. В процессе исследования было обнаружено, что характерным для всех образцов веществ по п.1, получаемых способом по п.2, является наличие 2-3 доминирующих фракций щелочных компонентов, слабо взаимодействующих с анионной колонкой при использованном значении рН, а также различающихся по заряду кислых мажорных компонентов, элюируемых в середине и в конце хроматографии, при устойчивых цифрах ранжирования пиков в диапазонах 172,5; 33,52,5 и 52,52,5 mAU (фиг. 7 и 8; почки и печень, графики ВЭЖХ). Пример 4. Электрофоретический анализ веществ по п.1, полученных способом по п.6. Для электрофореза отобраны образцы веществ по п.1, полученные способом по п.6, из ткани желудка кролика, ткани желудка человека, ткани печени человека, ткани ночек человека, ткани мозга человека, ткани яичек человека. Образцы расположены для электрофореза в порядке, приведенном выше,слева направо, и справа на фиг. 8, приведена шкала оценки в атомных единицах массы (кДа). Электрофоретический анализ образцов веществ, осуществляли стандартным методом в 12,5%-ном полиакрилаламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия, по окончании электрофореза гели окрашивали с помощью азотнокислого серебра. Полученный анализ выявил наличие характерных для всех образцов,по меньшей мере, двух мажорных полос с Мм примерно 10 и 60 кДа (фиг. 9).

МПК / Метки

МПК: G01N 33/53, A61P 35/00

Метки: иммунологически, вещество, применением, состояния, использованием, основе, биозонд, фармацевтической, биозонда, лечения, фармацевтическая, композиции, получения, диагностики, способ, активное, здоровья, композиция

Код ссылки

<a href="http://easpatents.com/30-18848-immunologicheski-aktivnoe-veshhestvo-sposob-ego-polucheniya-biozond-na-ego-osnove-i-sposob-diagnostiki-sostoyaniya-zdorovya-s-primeneniem-biozonda-farmacevticheskaya-kompoziciya-i.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Иммунологически активное вещество, способ его получения, биозонд на его основе и способ диагностики состояния здоровья с применением биозонда, фармацевтическая композиция и способ лечения с использованием фармацевтической композиции</a>

Похожие патенты