Пиразолпиримидины как антагонисты крф рецепторов.

Есть еще 11 страниц.

Смотреть все страницы или скачать PDF файл.

Формула / Реферат

1. Соединение формулы I

Рисунок 1

включая его стереоизомерные формы и фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, где

R1 представляет собой NR4R5 или OR5;

R2 представляет C1-6-алкил, C1-6-алкилокси или C1-6-алкилтио;

R3 представляет водород, C1-6-алкил, C1-6-алкилсульфонил, C1-6-алкилсульфокси или C1-6-алкилтио;

R4 представляет водород, C1-6-алкил, моно- или ди(С3-6-циклоалкил) метил, С3-6-циклоалкил, С3-6-алкенил, гидрокси-С1-6-алкил, С1-6-алкилкарбонилокси-С1-6-алкил или С1-6-алкилокси-С1-6-алкил;

R5 представляет C1-8-алкил, моно- или ди(С3-6-циклоалкил) метил, ArlCH2, С3-6-алкенил, С1-6-алкилокси-С1-6-алкил, гидрокси-С1-6-алкил, тиенилметил, фуранилметил, С1-6-алкилтио-С1-6-алкил, морфолинил, моно- или ди(C1-6-алкил)амино-С1-6-алкил, ди(C1-6-алкил)амино, С1-6-алкилкарбонил-С1-6-алкил, C1-6-алкил, замещенный имидазолилом; или радикал формулы -Alk-O-CO-Ar1;

или R4 и R5 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать пирролидинил, пиперидинил, гомопиперидинил или морфолинил, необязательно замещенный C1-6-алкилом или C1-6-алкилокси-С1-6-алкилом; и

Аr представляет собой фенил; фенил, имеющий 1, 2 или 3 заместителя, независимо выбираемые из галогена, C1-6-алкила, трифторметила, гидрокси, циано, C1-6-алкилокси, бензилокси, C1-6-алкилтио, нитро, амино и моно- или ди(C1-6-алкил)амино; пиридинил; пиридинил, имеющий 1, 2 или 3 заместителя, независимо выбираемые из галогена, C1-6-алкила, трифторметила, гидроксила, циано, C1-6-алкилокси, бензилокси, C1-6-алкилтио, нитро, амино, моно- или ди(C1-6-алкил)амино, и пиперидинила; и где замещенный фенил может быть необязательно дополнительно замещен одним или более атомами галогена;

Аr1 представляет собой фенил; фенил, имеющий 1, 2 или 3 заместителя, каждый из которых независимо выбран из галогена, C1-6-алкила, C1-6-алкилокси, ди(C1-6-алкил)амино-С1-6-алкила, трифторметила и C1-6-алкила, замещенного морфолинилом; или пиридинил; и

Alk представляет собой C1-6-алкандиил;

при условии, что сюда не входят 5-метил-3-фенил-7-(фенилметокси)пиразол [2,3-а] пиримидин и 2,5-диметил-7-(метиламино)-3-фенилпиразол[2,3-а]пиримидин.

2. Соединение по п.1, где R1 представляет OR5 и R5 представляет C1-6-алкил; или R1 представляет собой NR4R5 и R4 представляет водород, C1-6-алкил, гидрокси-С1-6-алкил, C1-6-алкилкарбонилокси-С1-6-алкил или С3-6-алкенил; R5 представляет C1-8-алкил, С3-6-алкенил, гидрокси-С1-6-алкил, С1-6-алкилокси-С1-6-алкил, фенилметил или С3-6-циклоалкилметил; или R4 и R5 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пирролидинил, пиперидинил, гомопиперидинил или морфолинил, необязательно замещенный C1-6-алкилом или С1-6-алкилокси-С1-6-алкилом; R2 представляет C1-6-алкил; R3 представляет водород, C1-6-алкил или C1-6-алкилтио; и Аr представляет собой фенил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, C1-6-алкила или C1-6-алкилокси; или Аr представляет пиридинил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, амино, нитро, трифторметила, моно- или ди(С1-6-алкил) амино, пиперидинила или C1-6-алкила.

3. Соединение по любому из пп.1 или 2, где R1 представляет собой NR4R5 и R4 представляет C2-4-алкил, гидрокси-С1-2-алкил, С3-4-алкенил или С1-2-алкилкарбонилокси-С2-4-алкил; R5 представляет C2-4-алкил, С3-4-алкенил, гидрокси-С2-4-алкил или циклопропилметил; R2 представляет C1-2-алкил; R3 представляет водород, C1-2-алкил или C1-2-алкилтио.

4. Соединение по любому из пп.1-3, где R1 представляет собой NR4R5 и R4 представляет С3-4-алкил или аллил; R5 представляет С2-4-алкил, аллил или циклопропилметил; R2 представляет метил; R3 представляет метил и Аr представляет фенил, замещенный в 3-, 4-, 6-, 2,4- или 2,4,6-положениях галогеном, C1-6-алкилом или C1-6-алкилокси.

5. Соединение по любому из пп.1-3, где R1 представляет собой NR4R5 и R4 представляет С3-4-алкил или аллил; R5 представляет С3-4-алкил, аллил или циклопропилметил; R2 представляет метил; R3 представляет метил и Аr - 3-пиридинил, замещенный в 4- и/или 6-ом положении метилом или диметиламино.

6. Соединение по п.1, которое представляет собой

3-[6-(диметиламино)-3-пиридинил]-2,5-диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а]пиримидин-7-амин или

3-[6-(диметиламино)-4-метил-3-пиридинил]-2,5-диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а]пиримидин-7-амин,

его стереохимически изомерные формы или фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли.

7. Композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-6.

8. Способ получения композиции по п.7, отличающийся тем, что терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-6 смешивают до получения однородной смеси с фармацевтически приемлемым носителем.

9. Соединение по любому из пп.1-6 для применения в качестве лекарственного средства.

10. Применение соединения формулы I

Рисунок 2

включая его стереоизомеры и фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, где R1, R2, R3 и Аr имеют значения, определенные в п.1, включая соединения 5-метил-3-фенил-7-(фенилметокси)пиразол[2,3-а]пиримидин и 2,5-диметил-7-(метиламино)-3-фенилпиразол[2,3-а]пиримидин, для получения лекарственного средства для лечения физиологических состояний или расстройств, возникающих в результате гиперсекреции рилизинг-фактора кортикотропина (КРФ).

11. Соединение формулы (II'), где радикалы R2, R3 и Аr имеют те же значения, определенные в пп.1-5, а радикал W' представляет собой гидроксил, галоген, мезилокси или тозилокси; его стереохимическая форма или кислотно-аддитивная соль, при условии, что сюда не входят соединения, где Аr представляет незамещенный фенил, и соединения, где Аr представляет 4-хлорфенил, 4-фторфенил или 3-метилфенил, когда W' представляет гидрокси или хлор

Рисунок 3

12. Способ получения соединения по п.1, отличающийся тем, что включает

а) взаимодействие промежуточного соединения формулы (II) с промежуточным соединением формулы (III) в реакционно-инертном растворителе

Рисунок 4

b) O-алкилирование промежуточного соединения формулы (VI) с помощью промежуточного соединения формулы (VII) в реакционно-инертэюь растворителе и в присутствии подходящего основания с получением соединений формулы (I-а), определенных как соединения формулы (I), где R1 представляет собой OR5,

Рисунок 5

где в вышеперечисленных схемах радикалы R1, R2, R3, R5 и Аr имеют значения, определенные в п.1, a W представляет собой соответствующую уходящую группу;

или, при желании, превращение соединений формулы (I) друг в друга с помощью известных реакций; и, дополнительно, при желании, превращение соединений формулы (I) в кислотно-аддитивные соли путем обработки кислотой или, наоборот, превращение кислотно-аддитивной соли в свободное основание путем обработки щелочью; и, при желании, получение его стереохимически изомерных форм.

13. Способ получения соединения формулы (II') по п.11, отличающийся тем, что включает взаимодействие промежуточного соединения формулы (IV) с b -кетоэфиром (V) в реакционно-инертном растворителе с получением в результате соединений формулы (II'-а), определенных как соединения формулы (II'), где W' представляет гидрокси

Рисунок 6

и, необязательно, превращение соединений формулы (II'-а) в соединения формулы (II'-b), определенные как соединения формулы (II'), где W' не является гидрокси;

и где в вышеприведенных схемах реакции радикалы R2, R3 и Аr определены в п.1 и W' представляет гидрокси, галоген, мезилокси или тозилокси;

или, при желании, превращение соединений формулы (II') друг в друга с помощью известных реакций;

и, дополнительно, при желании, превращение соединений формулы (II') в кислотно-аддитивную соль путем обработки кислотой или, наоборот, превращение кислотно-аддитивной соли в свободное основание путем обработки щелочью; и, при желании, получение его стереохимически изомерных форм.

 

Текст

Смотреть все

1 Предпосылки создания изобретения Изобретение относится к пиразолпиримидинам, которые обладают антагонистическими свойствами в отношении рецепторов КРФ, к фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения в качестве активного ингредиента, и их применению при лечении эндокринных, психиатрических и неврологических заболеваний, включая, в основном, стрессовые заболевания. Впервые рилизинг-фактор кортикопропина был выделен из овечьего гипоталамуса и идентифицирован как пептид из 41 аминокислоты(Vale et al., Science 213: 1394-1397, 1981). Затем были выделены последовательности КРФ человека и крысы и было установлено, что они идентичны, но отличаются от овечьего КРФ по 7 из 41 аминокислотного остатка (Rivier et al., Proc.al., EMBO J. 2, 775, 1983). Было обнаружено,что КРФ вызывает глубокие изменения в функциях эндокринной, нервной и иммунной систем. КРФ, как полагают, является основным физиологическим регулятором базального уровня и выделяющихся при стрессе адренокортикотропного гормона ("АКТГ"), -эндорфина и других производных проопиомеланокортиновых("ПОМК") пептидов передней доли гипофиза(Vale et al., Science 213: 1394-1397, 1981). Короче говоря, считают, что КРФ инициирует свои биологические эффекты путем связывания с мембранными рецепторами в плазме, которые,как было обнаружено, распределены в головном мозге (DeSouza et al., Science 221: 1449-1451,1984), гипофизе (DeSouza et al., Methods Enzymol. 124:560, 1986; Wynn et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 110: 602-608, 1983), надпочечниках (Udelsman et al., Nature 319:147-150, 1986) и селезенке (Webster E.L., and E.B. DeSouza,Endocrinology 122:609-617, 1968). Рецепторы КРФ соединяются со связывающим ГТФ белком(Perrin et al., Endocrinology 118: 1171-1179,1986), который опосредует стимулируемое КРФ повышение внутриклеточной продукции цАМФ(Bilezikjian L.M., and W.W. Vale, Endocrinology 113: 657 - 662, 1983). В дополнение к их роли в стимуляции продукции АКТГ и ПОМК КРФ, как полагают,координирует множество эндокринных автономных и поведенческих реакций на стресс и может участвовать в патофизиологии психических расстройств. Кроме того, КРФ, как полагают, является ключевым промежуточным соединением в связях между иммунной, центральной нервной, эндокринной и сердечнососудистой системами (Crofford et al., J. Clin.Invest. 90: 2555-2564, 1992; Sapolsky et al., Science 238:522-524, 1987; Tilders et al., Regul. Peptides 5:77-84, 1982). В основном, КРФ, повидимому, является одним из главных нейромедиаторов центральной нервной системы и игра 000803 2 ет решающую роль в интеграции общей реакции организма на стресс. Введение КРФ непосредственно в мозг вызывает поведенческие, физиологические и эндокринные реакции, идентичные реакциям, наблюдаемым у животного, попавшего в стрессовое положение. Например, инъекция КРФ в желудочек мозга приводит к активации поведения(Sutton et al., Nature 297:331, 1982), персистирующую активацию на электроэнцефалограмме(Ehlers et al., Brain Res. 2/8332, 1983), стимуляцию симпатоадреномедуллярных метаболических путей (Brown et al., Endocrinology 110:928,1982), усиление сердцебиений и повышение давления крови (Fisher et al., Endocrinology 110:2222, 1982), повышение потребления кислорода (Brown et al., Life Sciences 30:207, 1982),изменение активности желудочно-кишечного тракта (Williams et al., Am. J. Physiol. 253:G582,1987), угнетение стремления к потреблению пищи (Levine et al., Neuropharmacology 22:337,1983), изменение сексуального поведения (Sirinathsinghji et al., Nature 305:232, 1983) и нарушение функционирования иммунной системы(Irwin et al., Am. J. Physiol. 255:R744, 1988). Кроме того, клинические данные дают возможность предположить, что может быть гиперсекреция КРФ в мозгу при депрессии, расстройствах, связанных с повышенной возбужденностью,и нервно-психической анорексии.(DeSouza, Ann. Reports in Med. Chem. 25:215223, 1990). Соответственно, клинические данные дают возможность предположить, что антагонисты рецепторов КРФ могут быть представлены новыми антидепрессантами и/или анксиолитическими препаратами, которые могут быть полезны при лечении нейропсихических расстройств,проявляющихся гиперсекрецией КРФ. Об антагонистах рецепторов КРФ сообщалось, например, в патенте США 5063245, в котором раскрываются замещенные производные 4-тио-5-оксо-3-пиразолиновые производные, и Австралийском патентеAU-A41399/93, в котором раскрываются замещенные 2-ами-нотиазольные производные. В WO92/18504 и JP-32/04877 раскрыты пиразол[1,5 а]-пиримидины в качестве противовоспалительных средств. А также в WO-94/13676, WO94/13677 и WO-95/33750 раскрыты пирролпиримидины, пиразол[3,4-d]пиримидины и замещенные пурины в качестве антагонистов рецепторов КРФ. Арилпиразол[1,5 а]пиримидины были описаны в качестве ингибиторов ксантиноксидазы (Robins et al., J. Heterocyclic Chem. 22:601-634, 1985). В JP-42/011753 раскрыты 7 метиламино-пиразол[1,5-а]пиримидиновые производные, применимые в качестве седативных и жаропонижающих средств. В JP-61/057587 раскрыты пиразоло[1,5-а]-пиримидиновые производные, применимые в качестве противоязвенных средств. 3 Из-за физиологического значения КРФ разработки по другим биологически активным небольшим молекулам, обладающим значительной активностью по связыванию с рецепторами КРФ, и которые способны к антагонизму в отношении рецепторов КРФ, остаются желанной целью. Такие антагонисты рецепторов КРФ должны быть применимы при лечении эндокринных, психиатрических и неврологических состояний или заболеваний, включая в основном, связанные со стрессом расстройства. Описание изобретения Данное изобретение относится к соединениям - антагонистам КРФ формулы (I) включая его стереоизомеры и фармацевтически приемлемые соли с присоединением кислоты,где R1 представляет собой NR4R5 или OR5;(С 3-6-циклоалкил)метил, Ar1CH2, С 1-6-алкилоксиС 1-6-алкил, гидрокси-С 1-6-алкил, С 3-6-алкенил,тиенилметил, фуранилметил, С 1-6-алкилтио-С 1-6 алкил, морфолинил, моно- или ди (C1-6 алкил)амино-С 1-6-алкил,ди(С 1-6-алкил)амино,С 1-6-алкилкарбонил-С 1-6-алкил, C1-6-алкил, замещенный имидазолилом; или радикал формулы -Alk-O-CO-Ar1; или R4 и R5 вместе с атомом азота, с которым они соединяются, могут образовывать пирролидиниловую, пиперидиниловую, гомопиперидиниловую или морфолиниловую группу,необязательно замещенную C1-6-алкилом или С 1-6-алкилокси-С 1-6-алкилом; а Аг представляет собой фенил; фенил,имеющий 1, 2 или 3 заместителя, независимо выбираемые из галогена, C1-6-алкила, трифторметила, гидроксила, циано, C1-6-алкилокси,бензилокси, C1-6-алкилтио, нитро, амино и моноили ди(C1-6-алкил)амино; пиридинил; пиридинил, имеющий 1, 2 или 3 заместителя,независимо выбираемые из галогена, C1-6 алкила, трифторметила, гидроксила, циано, C1-6 алкилокси, бензилокси, C1-6-алкилтио, нитро,амино, моно- или ди (C1-6-алкил) амино; и пиперидинил; причем указанный замещенный фенил может быть необязательно дополнительно замещенным одним или более атомами галогена; 4 Аr1 представляет собой фенил; фенил,имеющий 1, 2 или 3 заместителя, каждый из которых независимо выбран из галогена, C1-6 алкила, C1-6-алкилокси, ди (C1-6-алкил) аминоС 1-6-алкила, трифторметила и C1-6-алкила, замещенного морфолинилом; или пиридинил; иAlk представляет собой C1-6-алкандиил. В дополнительном аспекте это изобретение относится к соединениям формулы (I), которым дано определение выше, при условии,что не включаются 5-метил-3-фенил-7(фенилметокси)пиразол-[2,3-а]пиримидин и 2,5 диметил-7-(метиламино)-3-фенилпиразол-[2,3 а]пиримидин. Это условие предназначено для того, чтобы исключить соединения, раскрытые в JP61/057587 и JP-42/011753. Так как он использован в предшествующих определениях и здесь далее галоген является общим обозначением для фтора, хлора, брома и йода; C1-6-алкандиил обозначает бивалентные радикалы насыщенных углеводородов с прямой и разветвленной цепью, имеющие от 1 до 6 атомов углерода, такие как, например, метилен,1,2-этандиил, 1,3-пропандиил, 1,4-бутандиил,1,5-пентандиил, 1,6-гександиил и их разветвленные изомеры; C1-2-алкил обозначает радикалы насыщенных углеводородов с прямой цепью,имеющие 1-2 атома углерода, такие как метил и этил; С 2-4-алкил обозначает радикалы насыщенных углеводородов с прямой и разветвленной цепью, имеющие от 2 до 4 атомов углерода, такие как этил, пропил, бутил, 1-метилэтил и тому подобное; С 3-4-алкил обозначает радикалы насыщенных углеводородов с прямой или разветвленной цепью, имеющие от 3 до 4 атомов углерода, такие как пропил, бутил, 1-метилэтил и тому подобное; C1-6-алкил включает C1-2 алкильные и С 3-4-алкильные радикалы, которым дано определение здесь ранее, и их более высокие гомологи, имеющие от 5 до 6 атомов углерода, такие как пентил и изомеры пентила, гексил и изомеры гексила;C1-8-алкил включает C1-6-алкил и его более высокие гомологи, имеющие от 7 до 8 атомов углерода, такие как, например, гептил, октил и тому подобное; С 3-6-алкенил обозначает углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, содержащие одну двойную связь и имеющие от 3 до 6 атомов углерода, такие как,например, 2-пропенил, 3-бутенил, 2-пентенил,3-пентенил, З-метил-2-бутенил и тому подобное; и где указанный С 3-6-алкенил связан с азотом или кислородом, причем атом углерода,осуществляющий эту связь, предпочтительно является насыщенным. С 3-6-циклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Гидрокси-C1-6-алкил относится кC1-6-алкилу, замещенному гидроксильной группой. Гомопиперидинил относится к 7-членному насыщенному кольцу, содержащему один атом азота. 5 В зависимости от природы некоторых заместителей соединения формулы (I) могут содержать один или более асимметричных центров, которые могут быть обозначены с помощью обычно используемой номенклатуры R и S. Соединения данного изобретения содержат атомы азота с основными свойствами, и в этом качестве они могут быть представлены как в виде свободного основания или в виде солей с присоединением кислоты, причем обе формы являются частью этого изобретения. Соли с присоединением кислоты могут быть получены известными методами и могут быть образованы как органическими, так и неорганическими кислотами. Подходящие органические кислоты включают малеиновую, фумаровую, бензойную,аскорбиновую, янтарную, метансульфоновую,уксусную, щавелевую, пропионовую, виннокаменную, салициловую, лимонную, глюконовую,молочную, миндальную, коричную, аспарагиновую, стеариновую, пальмитиновую, гликолевую, глютаминовую и бензолсульфоновую кислоты. Подходящие неорганические кислоты включают соляную, бромистоводородную, серную, фосфорную и азотную кислоты. Конкретные группы соединений в рамках этого изобретения являются теми соединениями формулы (I), в которых применяются одно или более из следующих ограничений:e) Аr представляет собой фенил, имеющий 1, 2 или 3 заместителя, каждый из которых независимо выбирается из C1-6-алкила, C1-6 алкилокси или галогена; причем фенильная часть, предпочтительно, имеет заместители в 3-,4-, 6-, 2, 4- или 2,4,6-положениях; или Аr представляет собой пиридинил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбирается из галогена, амино, нитро, трифторметила, моно- или ди(C1-6-алкил)амино, пиперидинила или C1-6-алкила; причем пиридинильная часть предпочтительно соединяется через 2 или 3 положение с остальной молекулой. Другой конкретной группой соединений являются такие соединения формулы (I), у кото 000803 6 рых R1 представляет собой NR4R5, a R4 и R5 вместе с атомом азота, с которым они соединены, образуют пирролидинильную, пиперидинильную, гомопиперидинильную или морфолинильную группы, произвольно замещенные C1-6 алкилом или C1-6-алкилокси-С 1-6-алкилом. Предпочтительными соединениями являются такие соединения формулы (I), в которыхR1 представляет собой NR4R5, a R4 является С 3-4 алкилом или аллилом, предпочтительно пропилом; R5 представляет собой С 2-4-алкил, аллил или циклопропилметил, предпочтительно пропил; R2 является метилом; R3 представляет собой водород, метил или метилтио, предпочтительно пропил; и Аr является фенилом, замещенным 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбирается из галогена,метила или метокси; а Аr в частности является пиридинилом, замещенным 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбирается из галогена, метила или диметиламино. Более предпочтительно, чтобы Аг являлся 3-пиридинилом, замещенным в 4- и/или 6 положении метилом или диметиламино. Наиболее предпочтительными являются соединения, выбираемые из: 3-(2,4-дихлорфенил)-5-метил-7-(N-пропилN-циклопропанметиламино)пиразол[2,3-а] пиримидина; 3-(2,4-дихлорфенил)-5-метил-7-(N-аллилN-циклопропанметиламино)пиразол[2,3-а] пиримидина; 2-метилтио-3-(2,4-дихлорфенил)-5-метил 7-(N,N-диаллиламино)пиразол[2,3-а]пиримидина; 2-метилтио-3-(2,4-дихлорфенил)-5-метил 7-(N-бутил-N-циклопропанметиламино)пиразол[2,3-а]пиримидина; 2-метилтио-3-(2,4-дихлорфенил)-5-метил 7-(N-пропил-N-циклопропанметиламино)пиразол[2,3-а]пиримидина; 2-метил-3-(4-хлорфенил)-5-метил-7-(N,Nдипропиламино)пиразол [2,3-а]пиримидина; 3-[6-(диметиламино)-3-пиридинил]-2,5 диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а]пиримидин-7-амина или 3-[6-(диметиламино)-4-метил-3-пиридинил]-2,5-диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а] пиримидин-7-амина или 3-(2,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-7-(Nпропил-N-метокси-этиламино)пиразол[2,3-а] пиримидина; стереоизомерных форм и их фармацевтически приемлемых солей с присоединением кислоты. Соединения данного изобретения можно обычно получить путем алкилирования пиразолпиримидина формулы (II) с помощью промежуточного соединения формулы (III). В промежуточном соединении (II) W является подходящей удаляемой группой, такой как галоген,например, хлор, бром или сульфонилоксигруп 7 пой, например, мезилоксигруппой или тозилоксигруппой. Вышеприведенная реакция обычно проводится в подходящем растворителе, например,апротонном растворителе, таком как ДМФ или ацетонитрил, простой эфир, например тетрагидрофуран, предпочтительно при повышенной температуре и, когда промежуточные соединения формулы (III) являются летучими соединениями, в плотно закрытом реакционном сосуде. К тому же, соединения формулы (I), где R1 представляет собой OR5, указанные соединения представлены формулой (I-а), могут быть получены путем O-алкилирования промежуточного соединения формулы (VI) с помощью промежуточного соединения формулы (VII), где W имеет то же значение, что и выше. Указанная реакция получения соединений формулы (I-а) может быть осуществлена в инертном в отношении реакции растворителе,таком как, например, N,N-диметилформамид, и в присутствии подходящего основания, такого,например, как гидрид натрия, предпочтительно при температуре в интервале от комнатной температуры до температуры кипения. Соединения формулы (I), где R1 является 4 5NR R , представленные формулой (I-с), могут быть получены из соединений формулы (VIII) или (IX) путем соответствующих реакций Nалкилирования, которые представлены здесь ниже, где W имеет то же значение, что и выше. Эти реакции N-алкилирования проводятся в инертном в отношении реакции растворителе,таком как, например, простой эфир, например,тетрагидрофуран, и предпочтительно в присутствии сильного основания, например NaH. В некоторых случаях эта реакция может давать образование побочных продуктов, в которых R2 алкилируется (R4 или R5)-W, в частности, где R2 является метилом и R4 или R5 является C1-6-алкилом. Как изложено ниже, соединения формулы(I) могут превращаться друг в друга по известным методикам превращения. Соединения формулы (I), где R3 является 8 сульфонилом или C1-6-алкилсульфоксилом, с помощью реакции окисления, например, путем обработки пероксидом, таким как 3-хлорпербензойная кислота в реакционно-инертном растворителе, например, дихлорметане. С помощью регулирования количества окислителя и других параметров реакции могут быть получены или соединения формулы (I), где R3 являетсяC1-6-алкилсульфонилом или C1-6-алкилсульфоксилом, или смесь обоих веществ, которую затем можно разделить обычными способами,например, колоночной хроматографией. Соединения формулы (I) могут превращаться друг в друга путем известных специалистам реакций или трансформаций функциональных групп. Например, соединения формулы (I),имеющие гидрокси-С 1-6-алкильную группу, могут превращаться в соединения формулы (I),имеющие С 1-6-алкилкарбонилокси-С 1-6-алкильную группу, например, путем обработки ангидридом кислоты в реакционно-инертном растворителе, таком как, например, дихлорметан, и не обязательно в присутствии основания, такого как, например, пиридин. Соединения формулы (I), имеющие нитрогруппу, могут быть превращены в соединения формулы (I), имеющие аминогруппу, и затем соединения формулы (I), имеющие моно- или ди(С 1-6-алкил)аминогруппу. А также аминогруппа может быть превращена с использованием реакции диазотирования в галогеновый заместитель. Кроме того, Аr группа соединений формулы (I) может быть галогенирована с использованием галогенирующего вещества, такого как,например, хлор или бром, в подходящем растворителе, например уксусной кислоте, и необязательно реакция может проводиться при температуре в интервале между комнатной температурой и температурой кипения реакционной смеси. Промежуточные соединения формулы (II) могут быть получены по методике, которая описана у Robins et al., J. Heterocyclic Chem. 22:601634, 1985. Аминопиразольные производные (IV) подвергают взаимодействию с -кетоэфиром (V),предпочтительно в условиях нагревания до кипения с обратным холодильником и в подходящем инертном в условиях реакции растворителе, таком как простой эфир, например ТГФ, с получением гидроксипиразолпиримидинов (VI),которые превращают в промежуточные соединения формулы (II) путем превращения гидроксильной группы промежуточного соединения(VI) в удаляемую группу W, например с помощью обработки (VI) метансульфонилоксихлори 9 дом или галогенирующим реактивом, таким как,например POCl3. Промежуточные соединения формулы(VIII) получают путем взаимодействия промежуточных соединений формулы (II) с аммиаком. При одном из осуществлений это изобретение также представляет промежуточные соединения формулы (II'), где W представляет собой гидроксил, мезилокси или тозилокси; при условии, что Аr не является фенилом или 4 хлорфенилом, 4-фторфенилом или 3-метилфенилом, когда W представляет собой гидроксил или хлор. Указанные промежуточные соединения формулы (II') могут быть получены по методикам, использованным для получения промежуточных соединений формулы (II), с получением таким образом соединений формулы (II'-а), которым дано определение как соединениям формулы (II'), где W является гидроксилом; и необязательно превращением соединений формулы (II'-а) в соединения формулы (II'-b), которым дано определение как соединениям формулы(II'), где W не является гидроксилом. Стереоизомеры могут быть получены путем выделения конечных продуктов формулы (I) известными специалистам способами, например, путем приведения во взаимодействие с оптически активной кислотой и разделения полученных таким образом диастереоизомерных солей путем селективной кристаллизации или колоночной хроматографии. Или стереоизомеры могут быть получены с помощью использования стереоизомерных исходных материалов в любой из вышеприведенных схем реакции или при получении промежуточных соединений, описанном здесь далее. Эффективность соединения в качестве антагониста рецепторов КРФ можно определить с помощью различных методов исследования. Соответствующие антагонисты КРФ этого изобретения способны подавлять специфическое связывание КРФ с этими рецепторами и антагонистическую активность, связанную с КРФ. Соединение со строением (I) может быть оценено на активность как антагониста КРФ с помощью одного или более обычно применяемых с этой целью исследований, включая (но не ограничиваясь ими) исследования, описанные DeSouza et(Synapse 1:572, 1987). Как упомянуто выше, соответствующие антагонисты КРФ включают соединения, которые проявляют сродство к рецепторам КРФ. Сродство к рецепторам КРФ можно определить с помощью исследований по связыванию, при которых измеряются соединения подавлять связывание радиоактивно меченного КРФ (например, [125I]тирозин-КРФ) с ре 000803 10 цептором (например, рецепторами, полученными из мембран коры головного мозга крыс). Исследование со связыванием радиоактивно меченного лиганда, описанное DeSouza et al. (выше, 1987), представляет исследование для определения сродства соединения к рецепторам КРФ. Такая активность обычно рассчитывается исходя из IC50 как концентрация соединения,необходимая для замещения 50% радиоактивно меченного лиганда на рецепторах и представляется как значение Ki, рассчитываемое по следующему уравнению:Ki=,1+L/KD где L - радиоактивно меченный лиганд, а КD сродство радиоактивно меченного лиганда к рецептору (Cheng and Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22:3099, 1973). В дополнение к подавлению связывания с рецепторами КРФ активность соединений антагонистов рецепторов КРФ может быть установлена по способности соединения проявлять антагонизм в отношении активности, связанной с КРФ. Например, известно, что КРФ стимулирует различные биохимические процессы, включая аденилатциклазную активность. Поэтому соединения могут быть оценены как антагонисты КРФ по их способности противодействовать стимулируемой активности аденилатциклазы путем, например, измерения уровней цАМФ. Исследование по стимулируемой КРФ аденилатциклазной активности, описанное Battaglia et аl. (выше, 1987), представляет метод определения способности соединения проявлять антагонизм в отношении активности КРФ. Соответственно антагонистическая активность в отношении рецепторов КРФ может быть определена с помощью методик исследования, которые обычно включают определение первоначального связывания (так, как описано DeSouza (выше,1987 с последующим применением метода скрининга на цАМФ (так, как описано Battaglia(выше, 1987. В сравнении со сродством к связыванию с рецепторами КРФ антагонисты рецепторов КРФ этого изобретения имеют Ki менее 10 мкМ. При предпочтительном осуществлении этого изобретения антагонист рецепторов КРФ имеет Ki менее 1 мкМ и более предпочтительно менее 0,25 мкМ (т.е. 250 нМ). Антагонисты рецепторов КРФ данного изобретения проявляют активность в сайте к рецептору КРФ и могут использоваться в качестве терапевтических средств для лечения широкого ряда расстройств или заболеваний,включая эндокринные, психиатрические и неврологические расстройства или заболевания. Более конкретно, антагонисты рецепторов КРФ данного изобретения могут быть полезны при лечении физиологических состояний или расстройств, возникающих в результате гиперсекреции КРФ. Так как КРФ, как полагают, являет 11 ся одним из основных нейромедиаторов, которые активируют и координируют эндокринные,поведенческие и непроизвольные реакции на стресс, антагонисты рецепторов КРФ данного изобретения могут использоваться для лечения нервно-психических расстройств. Нервнопсихические расстройства, которые можно лечить с помощью антагонистов рецепторов КРФ этого изобретения включают аффективные расстройства, такие как депрессия; расстройства,связанные с тревогой и страхом, такое как расстройство с генерализованной тревогой, паническое расстройство, расстройство навязчивого невроза, ненормальная агрессивность, сердечнососудистые нарушения, такие как нестабильная стенокардия и реактивная гипертензия; расстройства питания, такого как нервное истощение, булимия и синдром раздраженной толстой кишки. Антагонисты КРФ могут также использоваться при лечении вызываемой стрессом иммуносупрессии, связанной с различными болезненными состояниями, а также внезапного мозгового удара. Другое применение антагонистов КРФ этого изобретения включает лечение воспалительных заболеваний (таких как ревматоидный артрит, увеит, астма, воспалительное заболевание кишечника и двигательную активность желудка и перистальтику кишечника),болезни Кушинга, спазма у детей младшего возраста, эпилепсии и других приступов как у детей, так и у взрослых и пристрастия к различным веществам и абстиненции (включая алкоголизм). В другом осуществлении этого изобретения фармацевтические раскрываются композиции, содержащие один или более антагонистов рецепторов КРФ. Для целей введения соединения данного изобретения могут изготавливаться в виде фармацевтических композиций. Фармацевтические композиции данного изобретения включают антагонист рецепторов КРФ данного изобретения (т.е. соединение со строением (I) и фармацевтически приемлемый носитель и/или растворитель). Антагонист рецепторов КРФ присутствует в композиции в количестве, которое эффективно для лечения конкретного заболевания, т.е. в количестве, достаточном для достижения антагонистической активности в отношении рецепторов КРФ, и предпочтительно с приемлемой для пациента токсичностью. Предпочтительно, фармацевтические композиции данного изобретения могут включать антагонист рецепторов КРФ в количестве от 0,1 до 250 мг на дозу в зависимости от способа введения, и более предпочтительно от 1 до 60 мг. Соответствующие концентрации и дозировки могут быть легко определены опытным специалистом. Фармацевтически приемлемые носители и/или растворители знакомы опытным специалистам. Для композиций, создаваемых в виде растворов в жидкостях, приемлемые носители и/или растворители включают физиологический 12 раствор и стерильную воду и могут, по желанию, включать антиоксиданты, буферы, бактериостатики и обычные добавки. Композиции могут быть также в форме пилюль, капсул, гранул или таблеток, которые содержат, в дополнение к антагонисту рецепторов КРФ, растворители (разбавители), диспергирующие вещества и поверхностно-активные вещества, связывающие средства и смазывающие вещества. Опытный специалист может также изготовить соответствующую лекарственную форму антагониста рецепторов КРФ соответствующим образом и в соответствии с общепринятой практикой, как описано в Remington's Pharmaceutical Sciences,Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, USA,1990. В другом воплощении данное изобретение представляет способ лечения ряда расстройств или заболеваний, включая эндокринные, психиатрические и неврологические расстройства или заболевания. Такие способы включают введение соединения данного изобретения теплокровному животному в количестве, достаточном для лечения расстройства или заболевания. Такие способы включают системное введение антагониста рецепторов КРФ этого изобретения, предпочтительно в виде фармацевтической композиции. Как он использован здесь, термин "системное введение" включает пероральный и парентеральные способы введения. Для перорального введения подходящие фармацевтические композиции антагонистов рецепторов КРФ включают порошки, гранулы, пилюли, таблетки и капсулы, а также жидкости, сиропы, суспензии и эмульсии. Эти композиции могут также включать корригенты, консернанты, суспендирующие, загущающие и эмульгирующие вещества и другие фармацевтически приемлемые добавки. Для парентерального введения соединения данного изобретения можно получать в виде водных инъекционных растворов, которые могут содержать в дополнение к антагонисту рецепторов КРФ буферы, антиоксиданты, бактериостатики и другие добавки, обычно используемые в таких растворах. Как упомянуто выше, введение соединения данного изобретения может применяться для лечения широкого ряда расстройств или заболеваний. В частности, соединения данного изобретения можно вводить теплокровным животным для лечения депрессии, состояния тревоги и страха, панического состояния, заболевания навязчивого невроза, ненормальной агрессии,нестабильной стенокардии, реактивной гипертензии, нервно-психической анорексии, булимии, синдрома воспаленного кишечника, вызванной стрессом иммуносупрессии, внезапного мозгового удара, воспаления, болезни Кушинга, спазма у детей младшего возраста, эпилепсии и пристрастия к различным веществам или абстиненции. 13 Отсюда следует, что это изобретение представляет использование соединений формулы (I) для производства лекарства для лечения физиологических состояний или расстройств, возникающих в результате гиперсекреции рилизингфактора кортикотропина; и в дополнительном воплощении представлено использование новых соединений формулы (I) в качестве лекарственного средства. Следующие примеры представлены с целью иллюстрации, не ограничивая при этом настоящее изобретение. Экспериментальная часть Здесь и далее "ТГФ" означает тетрагидрофуран, а "ДХМ" означает дихлорметан. А. Получение промежуточных соединений. Пример A.1. а) 3-Амино-4-(2,4-дихлорфенил)пиразол и этилацетоацетат (2 эквивалента) растворяли в диоксане и нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и разбавляли этилацетатом. Не совсем белое твердое вещество, образовавшееся после 2 дней стояния собирали путем вакуумного фильтрования, получая 3-(2,4-дихлорфенил)-5-метил-7-гидроксипиразол[2,3-а]пиримидин (промежуточное соединение 1). б) Промежуточное соединение 1 (300 мг) смешивали с РОСl3 (1,5 мл) и нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 1 ч. Полученный пурпурный раствор осторожно переносили в ледяную воду. Продукт экстрагировали этилацетатом, промывали бикарбонатом натрия и насыщенным раствором соли, сушили над МgSO4 и концентрировали в вакууме с получением 3-(2,4-дихлорфенил-5 метил-7-хлорпиразол[2,3-а]пиримидина(промежуточное соединение 2) в виде коричневого твердого вещества (260 мг, 82%). Пример А.2. а) К перемешиваемому раствору гидрида натрия (60%, 25 ммоль) в ТГФ (10 мл) по каплям добавляли 6-(диметиламино)-3 пиридинацетонитрил (10 ммоль) в ТГФ (10 мл). Раствор оставляли перемешиваться в течение 10 мин перед тем, как медленно добавляли этилацетат (30 ммоль). Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение еще одного часа. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и растворяли в этилацетате/метаноле (1:1) и фильтровали через кремнезем. Фильтрат концентрировали, получая(промежуточное соединение 7). б) Смесь промежуточного соединения 7 и гидразина гидробромид (100 ммоль) растворяли в этаноле/воде (9:1, всего 100 мл) и нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток разделяли между этилацетатом и раствором бикарбоната натрия. Объединенные экстракты сушили над сульфатом 14 натрия, фильтровали и концентрировали до сухости. Остаток растворяли в 1,4-диоксане (200 мл) и нагревали до кипения с обратным холодильникам в течение 16 ч в присутствии этилацетацетата. Реакционную смесь охлаждали, и осаждалось не совсем белое твердое вещество. Чтобы помочь кристаллизации добавляли диэтиловый эфир и осадок фильтровали и сушили,получая 3-[2-(диметиламино)-5-пиридинил]-2,5 диметил-7-гидроксипиразол[2,3-а]пиримидин(промежуточное соединение 8). в) Промежуточное соединение 8 растворяли в РОС 13 (2 мл) и нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали и выливали на лед. Раствор делали щелочным (рН 9) путем добавления твердого карбоната натрия и экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия,фильтровали и концентрировали, получая 3-[6(диметиламино)-3-пиридинил]-2,5-диметил-7 хлор-пиразол[2,3-а]пиримидин (промежуточное соединение 9). В табл. 1 перечислены промежуточные соединения, которые были получены в соответствии с одним из вышеприведенных примеров. Таблица 1 Б. Получение конечных продуктов. Пример В.1. Смесь промежуточного продукта 2 (21 мг) и N-пропил-N-циклопропанметиламина (75 мг) нагревали в герметичном реакционном сосуде при 100 С в течение ночи. Хроматография на препаративной пластине для ТСХ с помощью 1:5 этилацетата-гексана давала 3-(2,4 дихлорфенил)-5-метил-7-(N-пропил-N-циклопропанметиламино)-пиразол[2,3-а]пиримидин(1 мг). Сходным образом, исходя из промежуточного соединения 2 и (S)-(-)-леуцинола и, соответственно, (R)-(+)-леуцинола, получали (S)23-(2,4-дихлорфенил)-5-метил-7-пиразол[2,3 а]пиримидинил]-амино]-4-метил-1-пентанол(соединение 11) и его R-аналог (соединение 12). Пример В.2. Раствор промежуточного соединения 10 (8 г) и ди-н-пропиламина (13 г) в ацетонитриле (50 мл) нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 ч. Смесь фильтровали через невысокий слой силикагеля с этилацетатом и фильтрат концентрировали в вакууме с получением легкого желтого твердого вещества, которое перекристаллизовывали из эфира-гексана с получением 8,9 г (93%) 3[6(диметиламино)-4-метил-3-пиридинил]-2,5 диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а]пиримидин-7-амина (соединение 53). Соединение 53 также превращали в его соль с присоединением соляной кислоты путем растворения соединения 53 (8,1 г) в смеси диэтилового эфира (150 мл) и ДХМ (50 мл) и взаимодействия "указанной смеси с НСl в диэтиловом эфире (1 М, 21,3 мл) при добавлении по каплям при перемешивании. Получающееся не совсем белое вещество собирали путем фильтрации с получением 8,7 г (98%) моногидрохлорида 3-[6-(диметиламино)-4-метил 3-пиридинил]-2,5-диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а]пиримидин-7-амина. Пример В.3. Промежуточное соединение 3 (15 мг) растворяли в этаноле (0,5 мл) и перемешивали в присутствии этоксида натрия (12 мг) в течение 1 ч. Хроматография на силикагеле давала 3-(2,4 дихлорфенил)-7-(этокси)-5-метил-2-метилтиопиразол[2,3-а]пиримидин (соединение 50). Пример В.4. Раствор соединения 6 (14 мг) в ТГФ (3 мл) приводили во взаимодействие с гидридом натрия (60 мг, избыток) при комнатной температуре в течение 5 мин, а затем с йодпропаном(0,3 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и реакцию гасили метанолом (0,5 мл). Полученную смесь загружали на пластину для препаративной ТСХ и проявляли с помощью этилацетатагексана 1:5 с получением 3-(2,4-дихлорфенил)5-метил-7-[N-(3-метоксипропил)-N-пропиламино]-пиразол[2,3-а]пиримидина (соединение 45) 16 ангидридом (0,1 мл) и пиридином (0,1 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли этилацетатом и фильтровали через невысокую колонку силикагеля. Концентрирование фильтрата давало 3(2,4-дихлорфенил)-5-метил-7-[N-(2-ацетоксиэтил)-N-бензиламино]-пиразол[2,3-а]пиримидин (соединение 27) (8,6 мг) в виде бесцветного масла. Пример В.6. Раствор соединения 40 (20 мг) в ДХМ (3 мл) подвергали взаимодействию с 3 хлорпербензойной кислотой (19 мг). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Хроматография на пластинке силикагеля с этилацетатом-гексаном (1:1) давала соединение 43 и соединение 44. Пример В.7. Смесь соединения 55 палладия на активированном угле (100 мг) в безводном этаноле(100 мл) помещали в установку для гидрогенизации и гидрогенизацию проводили при 2,7-105 Па (40 фунт/дюйм 2) в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в диэтиловом эфире и концентрировали, получая 1,49 г 3-(5-амино-3-метил-2 пиридинил)-2,5-диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а]пиримидин-7-амина (соединение 56). Пример В.8. К перемешиваемому раствору соединения 56 (1,39 г) и водного формальдегида (6,4 г) в АЦН (20 мл) добавляли натрия цианоборогидрид (743 мг) при 0 С. Добавляли ледяную уксусную кислоту (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали до сухости и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии на силикагеле(СН 2 Сl2/СН 3 ОН/NН 4OН 150:10:1). Желаемую фракцию выделяли, получая 1,30 г 3-[5(диметиламино)-3-метил-2-пиридинил]-2,5 диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а]пиримидин-7-амина (соединение 57). Пример В.9. К раствору соединения 56 (100 мг) в смеси концентрированной НСl (1 мл) и воды (1 мл),охлаждаемому на ледяной бане, добавляли раствор нитрита натрия (21 мг) в воде (1 мл). Раствор добавляли в смесь хлорида меди (1) (281 мг) в концентрированной НСl при перемешивании на ледяной бане. Твердое вещество отделяли и смесь нагревали до 60 С и получали прозрачный раствор. Реакционную смесь делали щелочной с помощью NaOH, экстрагировали этилацетатом, промывали насыщенным раствором соли и концентрировали. Очистка с помо 17 щью препаративной ТСХ давала 16 мг соединения 98. Пример В.10. Соединение 56 (100 мг) добавляли к раствору фторборной кислоты (48 вес.% в воде, 2 мл), охлаждали на ледяной бане с последующим добавлением раствора нитрита натрия (20 мг) в воде (1 мл). Температуру поддерживали на уровне до 10 С. Твердое вещество собирали с помощью фильтрации, сушили и разделяли между водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, концентрировали и остаток очищали с помощью препаративной ТСХ, получая 20 мг соединения 100. В табл. 2-5 перечислены соединения, которые были получены в соответствии с одним из вышеприведенных примеров, а в табл. 6 и 7 представлены данные анализа этих соединений. Таблица 2 С. Фармакологические примеры. Пример С.1. Представители соединений,обладающих активностью связывания рецепторов КРФ. Соединения оценивали на активность связывания с рецепторами КРФ с помощью стандартного исследования связывания радиолиган 26 да, которое в основном описано DeSouza et al.(J. Neurosci. 7:88-100, 1987). Путем использования разных радиоактивно меченных лиганд КРФ исследование может использоваться для оценки активности соединений данного изобретения по связыванию с каким-либо подтипом рецепторов КРФ. Кратко излагая, исследование по связыванию включает вытеснение радиоактивно меченного лиганда КРФ с рецептора КРФ. Более конкретно, исследование по связыванию выполняли в 1,5 мл пробирках Эппендорфа с использованием примерно 1106 клеток на пробирку, стабильно трансфицированных человеческими рецепторами КРФ. В каждую пробирку помещали 0,1 мл буфера для исследования (например, физиологический раствор Дулбекко на фосфатном буфере, 10 мМ хлорида магния, 20 мкМ бацитрацина) с немеченным саувагином или без него, уротензин 1 или КРФ(конечная концентрация 1 мкМ), чтобы определить неспецифическое связывание, 0,1 мл [125I] тирозин-овечий КРФ (конечная концентрация 200 пМ или примерно КD, который определяли путем анализа Скэтчарда) и 0,1 мл суспензии мембран клеток, содержащих рецепторы КРФ. Смесь инкубировали в течение 2 ч при 22 С с последующим разделением связанных и свободных радиоактивно меченных лиганд с помощью центрифугирования. После двух промываний осадка пробирки обрезали непосредственно над осадком и проводили дозиметрический контроль на радиоактивность на гаммасчетчике при примерно 80% эффективности. Все данные по связыванию радиоактивно меченного лиганда анализировали с использованием нелинейной программы аппроксимации кривой по точкам методом наименьших квадратов. Активность по связыванию соответствует концентрации (нМ) соединения, необходимой для вытеснения 50% радиоактивно меченного лиганда с рецепторов. Следующие соединения имеют Кi250 нМ: 5, 10, 12, 15-17, 19, 23, 24,26, 27, 29, 31-33, 36-43, 48, 49, 51-54 и 57-130,которые перечислены в табл. 2-5. Соединения 17, 29, 38, 41, 42, 48, 49, 51-54, 57, 58, 70, 71, 8185, 90-92, 101, 103-105, 115, 118, 121-123 и 125,как было обнаружено, получили наивысшие оценки в этом испытании. Пример С.2. Стимулируемая КРФ активность аденилатциклазы. Соединения данного изобретения можно также оценить с помощью различных функциональных испытаний. Например, соединения данного изобретения можно отсортировать по стимулируемой КРФ аденилатциклазной активности. Испытание по определению стимулируемой КРФ аденилатциклазной активности может выполняться в основном, как описано Battaglia 27 того, чтобы адаптировать испытание к целым клеточным препаратам. Более конкретно, стандартная смесь для испытания может содержать следующее в конечном объеме, равном 0,5 мл: 2 мМ глютамина, 20 мМ HEPES и 1 мМ IMBX в буфереDMEM. В исследованиях по стимуляции целые клетки с трансфицированными рецепторами высевали в 24-ячеечные платы и инкубировали в течение 1 ч при 37 С с разными концентрациями связанных с КРФ и несвязанных пептидов, чтобы установить фармакологичесхую характеристику распределения (классификации) конкретного подтипа рецепторов. После инкубации среду удаляли путем аспирации, ячейки один раз осторожно промывали свежей средой и среду удаляли с помощью аспирации. Чтобы определить количество внутриклеточного цАМФ в каждую ячейку добавляли 300 мкл раствора 95% этанола и 20 мМ водного раствора соляной кислоты и полученные суспензии инкубировали при 20 С в течение 16-18 ч. Раствор переносили в 1,5 мл пробирки Эппендорфа и ячейки промывали дополнительно 200 мкл этанола/водного раствора соляной кислоты, которые объединяли с первой фракцией. Образцы лиофилизировали и повторно суспендировали в 500 мкл натрий-ацетатного буфера. Количественное определение цДМФ в образцах выполняли с использованием одного набора антител. Для функциональной оценки соединений одну концентрацию КРФ или родственных пептидов,вызывающую 80%-ную стимуляцию продукции цДМФ, инкубировали с разными концентрациями конкурентных соединений (10-12-10-6 М). Пример С.3. Варианты испытания в крестообразном лабиринте и устойчивого отказа являются скоррелированными способами оценки определяемой активности, чувствительными к анксиогенным и анксиолитическим эффектам экспериментального лечения. Эти модели на животных использовали для определения анксиолитического и антистрессового действия соединений данного изобретения. Пример С.3-а. Вариант испытания в приподнятом крестообразном лабиринте. Это испытание предсказывает, как животные реагируют на ситуацию приближенияуклонения, включающей ярко освещенное пространство в противопоставлении темной "безопасной области". Оба пространства приподняты над почвой и образуют две дорожки, пересекающиеся в форме знака плюс. Этот тип ситуации приближения-уклонения является классическим тестом "эмоциональности" и реактивности и он очень чувствителен к лечению, которое создает растормаживание (такому как седативные/снотворные лекарства), и стрессу. Нет необходимости ни в каком мотивационном принуждении, и животному предоставляется свобода оставаться в темноте или рискнуть на откры 000803 28 тых частях. Крестообразный аппарат имеет четыре коридора (1050 см) под прямым углом друг к другу и приподнят над полом (50 см). Два коридора закрыты стенками (40 см высотой), и два коридора не имеют стенок (открытые дорожки). Субъектов помещали по отдельности в центр лабиринта и давали свободный доступ ко всем четырем коридорам в течение 5 мин. За субъектами наблюдают через окно в двери и с помощью дисплея по линии нахождения крысы на мониторе компьютера. Время, проведенное в каждом коридоре, регистрируется автоматически с помощью лучей фотоустройств и компьютерной программы. Лабиринт чисто протирают влажной тканью перед каждым испытанием. Мерой поведения в состоянии стимуляции страха при этом задании является снижение времени, проведенного в открытых коридорах, тогда как мерой антистрессового действия является дополнительное увеличение времени, проведенного в открытых коридорах. Подтверждение ценности испытания в крестообразном лабиринте с использованием КРФ пептидов: Центральное введение КРФ и воздействие любого из некоторых экспериментальных стресс-факторов подавляет эксплорацию на модели страха в приподнятом крестообразном лабиринте. При оценке поведенческой реакции на социальное поражение центральное введение антагониста КРФ с альфа-спиралью (9-41) после стресса [25 мкг ICV] или перед стрессом [1 мкгICV] дает обратный ход анксиогенному эффекту социального поражения. Это антистрессовое действие антагониста КРФ также проявляется после интрацеребрального введения в центральное ядро миндалевидного тела [250 нг IC]. Крысам вводили испытуемые соединения перорально за один час - пять минут перед испытанием. Некоторые группы помещали в наполненный водой бассейн на девяносто секунд непосредственно перед помещением в крестообразный лабиринт (группа стресса), тогда как контрольных субъектов переносили непосредственно из жилой клетки (группа без стресса). В группе животных, не получавших лечения, наблюдали значительное снижение процента среднего времени, проведенного в открытых коридорах (с примерно 36 до примерно 16%). В ответ на введение 2,5-20 мг/кг соединения 53 время, проведенное в открытых коридорах, возвращалось к уровню, равному, в пределах ошибки, времени для групп, не получавших лечения. Пример С.3-b. Вариант испытания по методу устойчивого отказа. Испытание происходит на открытом поле из органического стекла размером (1069277 см), имеющем гальванизированную стальную камеру с размерами: глубина 17,1 см и диаметр 10,2 см. Камера открыта на одном конце и рас 29 положена вдоль стенки открытого поля, проходящей по длине и в 15 см от угла открытого поля. Открытый конец обращен в угол. Открытое поле освещено флуоресцентным светом с потолка. Для испытания животных помещают в незнакомое окружение, заключая их в небольшую камеру. Продолжительность испытания составляет 5 мин, и аппарат чистят слабым раствором уксусной кислоты после каждого испытания. Испытуемое вещество вводят перорально за один час перед 5-минутным испытанием. Поведение животных контролируется и регистрируется с помощью видеокамеры. Латентность нахождения в камере будет измеряться и определяться по помещению всех четырех лап на открытое поле. Также измеряется число произошедших проходов, между камерой и открытым полем и средняя продолжительность времени в камере на выход. Мерой анксиолитической эффективности является снижение среднего времени, проведенного в закрытой камере. Соединение 53 снижало среднее время в камере с примерно 80 с до примерно 20-40 с, когда его вводили крысам перорально в дозах 0,63, 2,5 и 20 мг/кг. Подтверждение ценности испытания со стойким отказом при использовании пептидов КРФ При интрацеребральной инъекции как КРФ с альфа-спиралью (9-41), так и КРФ модифицируют поведение в варианте испытания со стойким отказом. В частности, ICV введение КРФ животным, предварительно ознакомленным с аппаратом повышает как латентность появления из маленькой камеры, так и среднее время, проведенное в камере в течение пятнадцатиминутного сеанса. Подобным же образом вливание КРФ в синее тело давало сходные изменения в поведении со стойким отказом, что наводит на мысль о том, что взаимодействие КРФ с норадренэргическими нейронами участвует в поведении стойкого отказа у крыс. И наоборот, ICV введение КРФ с альфа-спиралью (914) или d-Phe КРФ (12-41), конкурентных антагонистов рецепторов КРФ, полностью изменяет КРФ-подобный эффект умеренного стрессфактора в условиях знакомого окружения и значительно снижает показатели латентности появления и среднего времени в камере у животных,не знакомых с аппаратом.D. Примеры композиций. Следующие лекарственные формы являются примерами типичных фармацевтических композиций в дозированной форме для системного и местного введения теплокровным животным в соответствии с данным изобретением. Термин "активный ингредиент" (А.И.), как он используется в этих примерах, относится к соединению формулы (I), N-оксидной форме,соли с присоединением фармацевтически приемлемых кислоты или основания или его стереохимической изомерной форме. 30 Пример D.1. Пероральные растворы. 9 г метил-4-гидроксибензоата и 1 г пропил 4-гидроксибензоата растворяют в 4 л кипящей очищенной воды. В 3 л этого раствора растворяют 10 г 2,3-дигидроксибутандикарбоновой кислоты, а затем 20 г А.И. Последний раствор объединяют с оставшейся частью первого раствора и к этому добавляют 12 л 1,2,3-пропантриола и 3 л 70% раствора сорбита. 40 г сахарида натрия растворяют в 0,5 л воды и добавляют 2 мл эссенции малины и 2 мл эссенции крыжовника. Последний раствор объединяют с первым, добавляют воду, сколько нужно до объема 20 л, получая раствор для перорального приема, содержащий 5 мг А.И. на чайную ложку(5 мл). Полученный раствор разливают в подходящие контейнеры. Пример D.2. Капсулы. 20 г А.И., 6 г лаурилсульфата натрия, 56 г крахмала, 56 г лактозы, 0,8 г коллоидной двуокиси кремния и 1,2 г стеарата магния вместе энергично перемешивают. Затем полученной смесью заполняют 1000 подходящих твердых желатиновых капсул, каждая из которых заключает 20 мг А.И. Пример D.3. Таблетки с пленочным покрытием. Получение ядер таблеток. Смесь 100 г А.И., 570 г лактозы и 200 г крахмала хорошо перемешивают и затем увлажняют раствором 5 г додецилсульфата натрия и 10 г поливинилпирролидона в примерно 200 мл воды. Влажный порошок просеивают, сушат и снова просеивают. Затем добавляют 100 г микрокристаллической целлюлозы и 15 гидрогенизированного растительного масла. Все хорошо перемешивают и прессуют в таблетки, получая 10000 таблеток, причем каждая содержит 10 мг активного ингредиента. Покрытие. К раствору 10 г метил целлюлозы в 75 мл денатурированного спирта добавляют раствор 5 г этилцеллюлозы в 150 мл дихлорметана. Затем добавляют 75 мл дихлорметана и 2,5 мл 1,2,3 пропантриола. 10 г полиэтиленгликоля расплавляют и растворяют в 75 мл дихлорметана. Последний раствор добавляют в первый и затем добавляют 2,5 г октадеканоата магния, 5 г поливинилпирролидона и 30 мл концентрированной суспензии красящего вещества и все гомогенизируют. Ядра таблеток покрывают полученной таким образом смесью в аппарате для нанесения покрытия. Пример D.4. Инъекционный раствор. 1,8 г метил-4-гидроксибензоата и 0,2 г пропил-4-гидроксибензоата растворяли в примерно 0,5 л кипящей воды для инъекций. После охлаждения до примерно 50 С добавляли при перемешивании 4 г молочной кислоты, 0,05 г пропиленгликоля и 4 г А.И. Раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли воды для инъекций сколько нужно до объема 1 л, по 31 лучая раствор с концентрацией А.И. 4 мг/мл. Раствор стерилизовали путем фильтрации и разливали в стерильные контейнеры. Пример D.5. Суппозитории. 3 г А.И. растворяли в растворе 3 г 2,3 дигидроксибутандикарбоновой кислоты в 25 мл полиэтиленгликоля 400. Сплавляли вместе 12 г поверхностно-активного вещества и 300 г триглицеридов. Последнюю смесь хорошо перемешивали с первым раствором. Полученную таким образом смесь выливали в формочки при температуре 37-38 С с формированием 100 суппозиториев, каждый из которых содержит 30 мг/мл А.И. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение формулы I включая его стереоизомерные формы и фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, гдеR5 представляет C1-8-алкил, моно- или ди(С 3-6-циклоалкил) метил, ArlCH2, С 3-6-алкенил,С 1-6-алкилокси-С 1-6-алкил, гидрокси-С 1-6-алкил,тиенилметил, фуранилметил, С 1-6-алкилтио-С 1-6 алкил, морфолинил, моно- или ди(C1-6 алкил)амино-С 1-6-алкил,ди(C1-6-алкил)амино,С 1-6-алкилкарбонил-С 1-6-алкил, C1-6-алкил, замещенный имидазолилом; или радикал формулы -Alk-O-CO-Ar1; или R4 и R5 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать пирролидинил, пиперидинил, гомопиперидинил или морфолинил, необязательно замещенныйC1-6-алкилом или C1-6-алкилокси-С 1-6-алкилом; и Аr представляет собой фенил; фенил,имеющий 1, 2 или 3 заместителя, независимо выбираемые из галогена, C1-6-алкила, трифторметила, гидрокси, циано, C1-6-алкилокси, бензилокси, C1-6-алкилтио, нитро, амино и моно- или ди(C1-6-алкил)амино; пиридинил; пиридинил,имеющий 1, 2 или 3 заместителя, независимо выбираемые из галогена, C1-6-алкила, трифторметила, гидроксила, циано, C1-6-алкилокси, бензилокси, C1-6-алкилтио, нитро, амино, моно- или ди(C1-6-алкил)амино, и пиперидинила; и где за 000803 32 мещенный фенил может быть необязательно дополнительно замещен одним или более атомами галогена; Аr1 представляет собой фенил; фенил,имеющий 1, 2 или 3 заместителя, каждый из которых независимо выбран из галогена, C1-6 алкила, C1-6-алкилокси, ди(C1-6-алкил)амино-С 16-алкила, трифторметила и C1-6-алкила, замещенного морфолинилом; или пиридинил; иAlk представляет собой C1-6-алкандиил; при условии, что сюда не входят 5-метил 3-фенил-7-(фенилметокси)пиразол[2,3-а]пиримидин и 2,5-диметил-7-(метиламино)-3 фенилпиразол[2,3-а]пиримидин. 2. Соединение по п.1, где R1 представляет 5C1-6-алкилтио; и Аr представляет собой фенил,замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, C1-6 алкила или C1-6-алкилокси; или Аr представляет пиридинил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, амино, нитро, трифторметила, моноили ди(С 1-6-алкил) амино, пиперидинила или C16-алкила. 3. Соединение по любому из пп.1 или 2,где R1 представляет собой NR4R5 и R4 представляет C2-4-алкил, гидрокси-С 1-2-алкил, С 3-4 алкенил или С 1-2-алкилкарбонилокси-С 2-4-алкил;R5 представляет C2-4-алкил, С 3-4-алкенил, гидрокси-С 2-4-алкил или циклопропилметил; R2 представляет C1-2-алкил; R3 представляет водород,C1-2-алкил или C1-2-алкилтио. 4. Соединение по любому из пп.1-3, где R1 представляет собой NR4R5 и R4 представляет С 35 4-алкил или аллил; R представляет С 2-4-алкил,аллил или циклопропилметил; R2 представляет метил; R3 представляет метил и Аr представляет фенил, замещенный в 3-, 4-, 6-, 2,4- или 2,4,6 положениях галогеном, C1-6-алкилом или C1-6 алкилокси. 5. Соединение по любому из пп.1-3, где R1 представляет собой NR4R5 и R4 представляет С 35 4-алкил или аллил; R представляет С 3-4-алкил,аллил или циклопропилметил; R2 представляет метил; R3 представляет метил и Аr - 3 пиридинил, замещенный в 4- и/или 6-ом положении метилом или диметиламино. 6. Соединение по п.1, которое представляет собой 33 3-[6-(диметиламино)-3-пиридинил]-2,5 диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а]пиримидин-7-амин или 3-[6-(диметиламино)-4-метил-3-пиридинил]-2,5-диметил-N,N-дипропилпиразол[2,3-а] пиримидин-7-амин,его стереохимически изомерные формы или фармацевтически приемлемые кислотноаддитивные соли. 7. Композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-6. 8. Способ получения композиции по п.7,отличающийся тем, что терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-6 смешивают до получения однородной смеси с фармацевтически приемлемым носителем. 9. Соединение по любому из пп.1-6 для применения в качестве лекарственного средства. 10. Применение соединения формулы I включая его стереоизомеры и фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, где R1,R2, R3 и Аr имеют значения, определенные в п.1,включая соединения 5-метил-3-фенил-7(фенилметокси)пиразол[2,3-а]пиримидин и 2,5 диметил-7-(метиламино)-3-фенилпиразол[2,3-а] пиримидин, для получения лекарственного средства для лечения физиологических состояний или расстройств, возникающих в результате гиперсекреции рилизинг-фактора кортикотропина (КРФ). 11. Соединение формулы (II'), где радикалы R2, R3 и Аr имеют те же значения, определенные в пп.1-5, а радикал W' представляет собой гидроксил, галоген, мезилокси или тозилокси; его стереохимическая форма или кислотноаддитивная соль, при условии, что сюда не входят соединения, где Аr представляет незамещенный фенил, и соединения, где Аr представляет 4-хлорфенил, 4-фторфенил или 3 метилфенил, когда W' представляет гидрокси или хлор 12. Способ получения соединения по п.1,отличающийся тем, что включает а) взаимодействие промежуточного соединения формулы (II) с промежуточным соедине 000803b) O-алкилирование промежуточного соединения формулы (VI) с помощью промежуточного соединения формулы (VII) в реакционно-инертном растворителе и в присутствии подходящего основания с получением соединений формулы (I-а), определенных как соединения формулы (I), где R1 представляет собой OR5, где в вышеперечисленных схемах радикалы R1,R2, R3, R5 и Аr имеют значения, определенные в п.1, a W представляет собой соответствующую уходящую группу; или, при желании, превращение соединений формулы (I) друг в друга с помощью известных реакций; и, дополнительно, при желании, превращение соединений формулы (I) в кислотно-аддитивные соли путем обработки кислотой или, наоборот, превращение кислотноаддитивной соли в свободное основание путем обработки щелочью; и, при желании, получение его стереохимически изомерных форм. 13. Способ получения соединения формулы (II') по п.11, отличающийся тем, что включает взаимодействие промежуточного соединения формулы (IV) с -кетоэфиром (V) в реакционноинертном растворителе с получением в результате соединений формулы (II'-а), определенных как соединения формулы (II'), где W' представляет гидрокси и, необязательно, превращение соединений формулы (II'-а) в соединения формулы (II'-b),определенные как соединения формулы (II'), гдеW' не является гидрокси; и где в вышеприведенных схемах реакции радикалы R2, R3 и Аr определены в п.1 и W' представляет гидрокси, галоген, мезилокси или тозилокси; или, при желании, превращение соединений формулы (II') друг в друга с помощью известных реакций; и, дополнительно, при желании, превращение соединений формулы (II') в кислотноаддитивную соль путем обработки кислотой или,наоборот,превращение кислотноаддитивной соли в свободное основание путем 36 его стереохимически изомерных форм.

МПК / Метки

МПК: A61K 31/495, C07D 487/04

Метки: рецепторов, крф, пиразолпиримидины, антагонисты

Код ссылки

<a href="http://easpatents.com/19-803-pirazolpirimidiny-kak-antagonisty-krf-receptorov.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Пиразолпиримидины как антагонисты крф рецепторов.</a>

Похожие патенты