Номер патента: 5310

Опубликовано: 30.12.2004

Авторы: Сузуки Фумияки, Мураками Казуо, Исида Юити

Есть еще 8 страниц.

Смотреть все страницы или скачать PDF файл.

Формула / Реферат

1. Способ селекции вещества, способного контролировать активацию проренина, при осуществлении которого в качестве индикатора служит способность модифицировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры.

2. Способ селекции вещества, способного контролировать активацию проренина, при осуществлении которого в качестве индикатора служит способность модифицировать активацию проренина антителом к области профрагмента проренина.

3. Способ селекции по п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации, как минимум, по 3 отрезкам аминокислотной последовательности в области профрагмента проренина.

4. Способ селекции по п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации, как минимум, по 3 отрезкам аминокислотной последовательности в районе остатков 1-19 или 27-41 в N-концевом участке области профрагмента проренина.

5. Способ селекции по п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации, как минимум, по 3 отрезкам аминокислотной последовательности в районе остатков 5-19 в N-концевом участке области профрагмента проренина.

6. Способ селекции по любому из пп.3-5, в котором вещество для селекции представляет собой пептид.

7. Способ селекции по любому из пп.3-5, в котором вещество для селекции представляет собой низкомолекулярное соединение.

8. Способ селекции по любому из пп.1-7, в котором проренин является проренином человека.

9. Способ селекции по любому из пп.1-7, в котором проренин является проренином крыс.

10. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью регулировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид.

11. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью регулировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем это вещество получено любым из способов селекции согласно предыдущим пп.1-9, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид.

12. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид.

13. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, и не обладающее свойствами ингибитора ренина, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид.

14. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем это вещество получено любым из способов селекции по пп.1-9, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид.

15. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, и не обладающее свойствами ингибитора ренина, которое получено любым из способов селекции по пп.1-9, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид.

16. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью из области профрагмента проренина или эквивалентный ему, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры.

17. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-10 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры.

18. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-8 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры.

19. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-6 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры.

20. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее один из пептидов от SEQ ID No. 7 до SEQ ID No. 14 в перечне последовательностей, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры.

21. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее один из пептидов из числа SEQ ID No. 3, SEQ ID No. 4 и от SEQ ID No. 15 до SEQ ID No. 20 в перечне последовательностей, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры.

22. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, при этом вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, разработанное на основе информации по аминокислотной последовательности области профрагмента проренина.

23. Контролирующее активацию проренина вещество по любому из пп.16-22, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, при этом вещество не обладает свойствами ингибитора ренина.

24. Контролирующее активацию проренина вещество по любому из пп.12-23, у которого ингибирование активации проренина обусловлено антагонистическим действием на белок-белковые взаимодействия в области профрагмента проренина, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид.

25. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее антитело к частичной последовательности области профрагмента проренина, где последовательность выбрана из SEQ ID No. 22-26 перечня последовательностей, которое способно ингибировать активацию проренина in vivo путем удаления проренина в реакции между антигеном и антителом к области профрагмента проренина.

26. Гипотензивное средство, содержащее по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из пп.12-25 в качестве активного ингредиента.

27. Гипотензивное средство по п.26, у которого эффективность гипотензивного действия составляет около 10% или больше по меньшей мере на 12-й ч после введения in vivo.

28. Гипотензивное средство по п.26, у которого гипотензивное действие избирательно проявляется только у больных, страдающих гипертензией.

29. Супрессор гипертрофии органов, содержащий по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из пп.12-25 в качестве активного ингредиента.

30. Супрессор гипертрофии органов по п.29, обладающий способностью подавлять гипертрофию сердца и/или почек.

31. Супрессор утолщения артерий, содержащий по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из пп.12-25 в качестве активного ингредиента.

32. Способ лечения гипертензии с помощью любого из гипотензивных средств по пп.26-28.

33. Способ лечения сердечной недостаточности или почечной недостаточности с помощью супрессора гипертрофии органов по п.29 или 30.

34. Способ лечения заболеваний, сопровождающихся утолщением кровеносных сосудов, с помощью супрессора утолщения артерий по п.31.

35. Способ селекции вещества, способного контролировать активацию проренина человека без изменения первичной структуры, который осуществляют с использованием системы активации проренина, происходящей из животного, не являющегося человеком, причем система разработана на основании информации о частичной последовательности аминокислотной последовательности проренина животного, не являющегося человеком, соответствующей частичной последовательности аминокислотной последовательности проренина человека, которая вовлечена в активацию проренина человека.

 

Текст

Смотреть все

1 Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение касается гипотензивных средств, супрессоров гипертрофии органов и супрессоров утолщения артериальных стенок, а также способа их селекции. Уровень техники Известно,что ренин-ангиотензинальдостероновая система участвует в повышении кровяного давления (Tokyo Joshi Idai Zasshi,60 (4): 342-350, 1999). Так, ангиотензиноген,секретируемый печенью, превращается в ангиотензин I (в дальнейшем именуется AI) под действием ренина, происходящего из почек, а затем превращается в ангиотензин II (в дальнейшем именуется AII) под действием ангиотензинконвертирующего фермента (АСЕ). AII непосредственно действует на кровеносные сосуды,вызывая их сужение, а также действует на кору надпочечников, усиливая биосинтез и секрецию альдостерона и вызывая удерживание Na и воды, что ведет к гипертензии. Поэтому в качестве способа лечения гипертензии предлагались фармацевтические агенты, действующие на ренин-ангиотензиновую систему, как гипотензивные средства новейшего типа, причем ингибиторы АСЕ уже применялись на практике. В то же время изучались ингибиторы ренина как гипотензивные средства, однако из-за их побочных эффектов эти разработки были прекращены. Ингибиторы АСЕ являются специфическими ингибиторами фермента, конвертирующего ангиотензин, из них хорошо известен каптоприл (общее название). Однако ингибиторы АСЕ оказывают побочные эффекты, такие как сухой кашель, и не проявляют такой же клинической эффективности, как ингибирование активности фермента invitro, поэтому предпринимались попытки комбинационной терапии с применением ингибиторов ренин-ангиотензиновой системы, обладающих различным механизмом действия. Соответственно, существует большая потребность в высокоэффективных гипотензивных средствах,супрессорах утолщения стенок кровеносных сосудов и супрессорах гипертрофии органов,отличных от уже известных или применяющихся. Ренин в основном синтезируется в почках в виде своего предшественника - препроренина,состоящего из 406 аминокислот, у которого 23 аминокислотных остатка на N-конце отщепляются с образованием проренина, после чего отщепляется еще 41 аминокислотный остаток и образуется ренин, состоящий из 340 аминокислот. Ренин является протеиназой, которая специфически гидролизует ангиотензиноген, образуя AI. Однако предшественник ренина - проренин - обычно не проявляет такой ферментативной активности. Поэтому, хотя в крови находится примерно в 10 раз больше проренина, чем ренина, активным началом ренин-ангиотен 005310 2 зиновой системы считается именно ренин или тот ренин, что образуется при гидролизе проренина. Авторы настоящего изобретения ранее обнаружили, что неактивный предшественник ренина - проренин - образует иммунный комплексin vitro при связывании с антителом, специфически распознающим фрагмент из 43 аминокислот (в дальнейшем именуется "профрагмент" или "pf) на N-конце, который отщепляется в момент образования ренина из проренина, при этом функция белка, то есть ферментативная активность (активность ренина) проявляется неферментативным образом в физиологических условиях без изменения первичной структурыPatent . 5945512), с помощью антитела к фрагменту pf проренина человека. Что касается способа активации проренина, то известен метод его превращения в ренин с помощью протеазы, в котором активация проводится без изменения первичной структуры в кислой среде и при низкой температуре (Nature, 288, 702-705,1980; J. Biol. Chem, 262, 2472-2477, 1987; Clin.Chem., 37, 1811-1819, 1991; J. Biol. Chem., 267,11753-11759, 1992), а также метод, в котором низкомолекулярный ингибитор ренина соединяется с ферментативно активной частью, скрытой в глубоком углублении трехмерной структуры проренина (J. Biol. Chem., 267, 22837-22842,1992), и превращает е в структуру открытого типа, и т.д. Однако механизм активации проренина in vivo и его функционирование все еще недостаточно изучены. Сущность изобретения Учитывая вышеуказанные обстоятельства,авторы настоящего изобретения провели исследование и установили, что при моделировании гипертензии на животных введение антитела кpf, способного активировать проренин, или частичного пептида из профрагмента проренина,являющегося антигеном этого антитела, достигается гипотензивное действие, подавление гипертрофии органов и подавление утолщения артерий. Таким образом, было обнаружено, что ингибирование белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина подавляет активацию проренина in vivo и тем самым было впервые доказано, что активация проренина происходит in vivo. На основании этих данных было установлено, что применение веществ,ингибирующих активацию проренина in vivo,позволяет получить гипотензивные средства,супрессоры гипертрофии органов и супрессоры утолщения артерий, а также способ их селекции, на чем основано настоящее изобретение. Итак, имеются следующие воплощения настоящего изобретения. 1) Способ селекции вещества, способного контролировать активацию проренина, при осуществлении которого в качестве индикатора служит способность модифицировать актива 3 цию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 2) Способ селекции вещества, способного контролировать активацию проренина, при осуществлении которого в качестве индикатора служит способность модифицировать активацию проренина антителом к области профрагмента проренина. 3) Способ селекции по предыдущему п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации по, как минимум, 3 отрезкам аминокислотной последовательности в области профрагмента проренина. 4) Способ селекции по предыдущему п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации по, как минимум, 3 отрезкам аминокислотной последовательности в районе остатков 1-19 или 27-41 в Nконцевом участке области профрагмента проренина. 5) Способ селекции по предыдущему п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации по, как минимум, 3 отрезкам аминокислотной последовательности в районе остатков 5-19 в N-концевом участке области профрагмента проренина. 6) Способ селекции по любому из предыдущих пп.3-5, в котором вещество для селекции представляет собой пептид. 7) Способ селекции по любому из предыдущих пп.3-5, в котором вещество для селекции представляет собой низкомолекулярное соединение. 8) Способ селекции по любому из предыдущих пп.1-7, в котором проренин является проренином человека. 9) Способ селекции по любому из предыдущих пп.1-7, в котором проренин является проренином крыс. 10) Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью регулировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 11) Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью регулировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем это вещество получено любым из способов селекции согласно предыдущим пп.1-9. 12) Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 4 13) Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, при этом вещество не обладает свойствами ингибитора ренина. 14) Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем это вещество получено любым из способов селекции согласно предыдущим пп.1-9. 15) Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, при этом вещество не обладает свойствами ингибитора ренина и получено любым из способов селекции согласно предыдущим пп.1-9. 16) Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью из области профрагмента проренина или эквивалентный ему, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белокбелковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 17) Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-10 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина,происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 18) Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-8 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина,происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 19) Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-6 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина,происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 20) Контролирующее активацию проренина вещество, включающее один из пептидов отSEQ ID7 до SEQ ID14 в Перечне последовательностей, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происхо 5 дящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 21) Контролирующее активацию проренина вещество, включающее один из пептидов из числа SEQ ID3, SEQ ID . 4 и от SEQ ID15 до SEQ ID20 в Перечне последовательностей, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 22) Вещество, контролирующее активацию проренина, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, при этом вещество представляет собой низкомолекулярное соединение,разработанное на основе информации об аминокислотной последовательности в области профрагмента проренина. 23) Вещество по любому из предыдущих пп.16-22, контролирующее активацию проренина, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, при этом вещество не обладает свойствами ингибитора ренина. 24) Контролирующее активацию проренина вещество по любому из предыдущих пп.1223, у которого ингибирование активации проренина обусловлено антагонистическим действием на белок-белковые взаимодействия в области профрагмента проренина. 25) Контролирующее активацию проренина вещество, отличающееся тем, что активация проренина ингибируется in vivo путем удаления проренина в реакции между антигеном и антителом в области профрагмента проренина. 26) Контролирующее активацию проренина вещество, включающее антитело к области профрагмента проренина, которое способно ингибировать активацию проренина in vivo путем удаления проренина в реакции между антигеном и антителом в области профрагмента проренина. 27) Гипотензивное средство, содержащее по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из предыдущих пп.12-26 в качестве эффективного ингредиента. 28) Гипотензивное средство по п.27, у которого эффективность гипотензивного действия составляет около 10% или больше по меньшей мере на 12-й час после введения in vivo. 29) Гипотензивное средство по п.27, у которого гипотензивное действие избирательно проявляется только у больных, страдающих гипертензией. 6 30) Супрессор гипертрофии органов, содержащий по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из предыдущих пп.12-26. 31) Супрессор гипертрофии органов по п.30, обладающий способностью подавлять гипертрофию сердца и/или почек. 32) Супрессор утолщения артерий, содержащий по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из предыдущих пп.12-26 в качестве активного ингредиента. 33) Способ лечения гипертензии с помощью любого из гипотензивных средств по предыдущим пп.27-29. 34) Способ лечения сердечной недостаточности или почечной недостаточности с помощью супрессора гипертрофии органов по п.30 или 31. 35) Способ лечения заболеваний, сопровождающихся утолщением кровеносных сосудов,с помощью супрессора утолщения артерий по п.32. Подробное описание предпочтительных вариантов изобретения Далее настоящее изобретение будет раскрыто подробно с применением терминов, понятных любому специалисту в той области, к которой относится настоящее изобретение, если не указано иначе. В настоящем описании приводятся ссылки на различные методики, известные специалистам в этой области. Документы(публикации), в которых изложены эти известные методики, на которые приведены ссылки,включены в виде ссылок во всей полноте, как если бы они излагались полностью. Ингибирование активации проренина in vivo Авторы настоящего изобретения ранее обнаружили с помощью антитела к фрагменту pf проренина человека, что проренин может активироваться in vitro до структуры открытого типа, проявляющей ферментативную активность без изменения первичной структуры, специфическим антителом к отрезку аминокислот из области pf проренина (Japanese Patent Laid-OpenH10-279600; U.S. Patent5945512). На основании этих данных было получено антитело(антитело к pf крыс), которое специфически распознает пептид pf крыс, находящийся в том же месте, что и пептид (пептид pf человека) из области pf проренина человека в соответствии с порядком аминокислотной последовательности в первичной структуре проренина крыс, и это антитело вводили спонтанно гипертензивным крысам (SHR), которые служат моделью патологической гипертензии. При этом, хотя антитело к pf крыс способно активировать проренин крыс in vitro без изменения первичной структуры, оно проявляло постоянный гипотензивный эффект in vivo, как показано в Экспериментальных примерах. В общем, антитело образует комплекс антиген-антитело при встрече с анти 7 геном в крови, после чего образовавшийся комплекс антиген-антитело удаляется из крови иммунной системой. Таким образом, можно полагать, что гипотензивный эффект достигается за счет устранения проренина или активированного проренина при связывании с антителом против pf. С другой стороны, возможно, что гипотензивный эффект достигается за счет ингибирования связывания проренина или активированного проренина с его местом действия в результате связывания антител против pf с проренином или активированным проренином в крови. Кроме того, авторы настоящего изобретения синтезировали частичный пептид, происходящий из профрагмента проренина крыс, который служит антигеном для указанного выше антитела к pf крыс, способного активировать проренин крыс in vitro, и вводили его крысамSHR. Такой пептид может конкурентно ингибировать активацию проренина крыс in vitro антителом против pf крыс, также как пептид pf человека ингибирует активацию проренина человекаin vitro антителом против pf человека. Следовательно, такой пептид способен ингибировать активацию проренина крыс, вызванную белокбелковыми взаимодействиями, которые не сопровождаются изменениями первичной структуры, но сопровождаются изменениями структур более высокого порядка. Когда такой пептид вводили крысам SHR, на 12-й час после введения наступал значительный гипотензивный эффект, как будет описано далее. Однако,когда такой пептид вводили нормальным крысам, давление крови не изменялось. Как показано в примерах, приведенных ниже, поведение такого пептида в отношении времени отличалось от поведения ингибитора ренина Н 6137(фирмы Sigma) или нейтрализующего ренин антитела, и его гипотензивный эффект продолжался длительное время, а это означает, что гипотензивное действие такого пептида не обусловлено ингибированием ренина. Кроме того,было показано, что при непрерывном введении такого пептида крысам SHR на протяжении 14 дней подавлялась гипертрофия сердца и почек, а также подавлялось утолщение артерий, то есть перестройка кровеносных сосудов. Предполагается, что эти эффекты, вызванные введением вышеуказанного пептида, обусловлены тем, что пептид ингибирует активацию проренина крыс,сопровождаемую изменением структуры при белок-белковых взаимодействиях in vivo, либо ингибирует связывание проренина крыс или активированного проренина крыс с местом его действия. Из этих результатов можно заключить, что ферментативная активность проренина у крысSHR проявляется при взаимодействии с проренин-связывающим белком, когда активируется ренин-ангиотензиновая система, которая вызывает гипертензию, а это означает, что пептид pf 8 и антитело против pf проявляют гипотензивное действие при гипертензии, которая вызывается активацией ренин-ангиотензиновой системы. Так было впервые подтверждено участие проренина в гипертензии и сама активация проренина in vivo посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина. Также было обнаружено, что вещества, контролирующие активацию проренина, которые способны ингибировать активацию проренина, вызванную изменением структуры при белокбелковых взаимодействиях in vivo, и белокбелковое взаимодействие проренина или активированного проренина с местом его действия,могут быть полезными в качестве гипотензивных средств, супрессоров гипертрофии органов,супрессоров утолщения артерий и т.п. Число аминокислотных остатков в пептидеpf проренина крыс такое же, как у пептида pf проренина человека, но составляющие их аминокислоты отличаются. Несмотря на это, как описано выше, в соответствии с порядком аминокислотной последовательности в первичной структуре пептид pf проренина крыс находится в том же месте, что и пептид pf человека, представляющий собой пептидный эпитоп антитела к pf человека, способного активировать проренин человека in vitro, а специфичное к этому pfпептиду антитело проявляло гипотензивный эффект на крысах, служащих моделью патологической гипертензии. Следовательно, между этими видами не существует отличий в фармакологическом действии проренина при гипертензии, в структуре сайта активации проренина и механизме активации. Таким образом, хотя гипотензивный эффект вышеуказанного пептида наблюдался на крысах, служащих моделью патологической гипертензии, само собой разумеется, что такого же эффекта можно ожидать при гипертензии у человека, если выбрать соответствующий пептид с учетом аминокислотной последовательности пептида pf проренина человека. Кроме того, как описано выше, когда при взаимодействии неактивного предшественника фермента со специфичным к его pf-пептиду антителом in vitro проявляется ферментативная активность или, другими словами, функция белка, то при этом механизм консервативен у разных видов, так что пептид pf, антитело к этомуpf-пептиду, животные патологической модели и т.п. могут применяться при скринировании для отбора медикаментов для лечения симптомов,вызванных проявлением этой функции белка. Способ селекции веществ, контролирующих активацию проренина Способ селекции веществ, способных контролировать активацию проренина согласно настоящему изобретению, заключается в том,что в качестве индикатора служит способность модифицировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимо 9 действий в области профрагмента проренина. При этом активация проренина посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина означает открывание ферментативно активного сайта проренина, которое не сопровождается изменением первичной структуры, но сопровождается изменением структур более высокого порядка вследствие белок-белковых взаимодействий в области pf. Соответственно, хотя проренин, активируемый посредством этих белок-белковых взаимодействий, сохраняет ту же аминокислотную последовательность, что и первичная структура проренина до активации, он обретает способность проявлять рениноподобную ферментативную активность. Примеры белков, осуществляющих белок-белковые взаимодействия в области pf: антитела, которые активируются при распознавании пептида pf; белки, являющиеся местом действия проренина или активированного проренина in vivo; белки крови, способные активировать проренин при связывании с ним. Вышеуказанный способ селекции контролирующих активацию проренина веществ может состоять в применении уже известной по сути системы скринирования фармацевтических средств. Например, когда для измерения связывания проренина с антителом к pf применяют проренин и антитело к pf, способное активировать проренин, то это дает возможность отбирать вещества, ингибирующие активацию проренина. Далее, к примеру, когда для измерения ферментативной активности активированного проренина применяют проренин и антитело к pf,способное активировать проренин, то это дает возможность отбирать вещества, ингибирующие ферментативную активность проренина. Не стоит и говорить, что способы селекции этим не ограничиваются. Кроме того, как указано выше,составляющие аминокислотную последовательность области pf проренина аминокислоты могут варьировать в зависимости от вида, поэтому при селекции веществ, контролирующих активацию проренина человека, в одном из предпочтительных воплощений применяют проренин человека и антитело к пептиду pf проренина человека. В качестве конкретного примера можно привести систему скринирования, состоящую в применении проренина человека и антитела,способного активировать проренин человека при специфическом узнавании пептида pf проренина человека, полученного согласно описанию в Japanese Patent Laid-OpenН 10-279600 и U.S. Patent5945512. Что касается веществ, являющихся объектами селекции в вышеуказанном способе селекции контролирующих активацию проренина веществ, то кандидатами на это могут служить вещества, обычно применяемые в известных по сути фармацевтических системах скринирования, как-то: низко молекулярные соединения, 005310 10 соединения, происходящие из природных веществ, пептиды и т.д. Также в качестве объектов селекции можно использовать низкомолекулярные соединения и пептиды, разработанные на основе информации об аминокислотной последовательности области pf проренина или, в частности, проренина человека. Аминокислотная последовательность области pf проренина человека уже известна, она состоит из 43 аминокислот (SEQ ID . 1 в Перечне последовательностей), как показано вJapanese Patent Laid-Open8-285852. Аминокислотная последовательность пептида pf проренина дает полезную инфомацию для разработки веществ, являющихся объектами селекции контролирующих активацию проренина веществ. В частности, при разработке контролирующих активацию проренина веществ полезна информация по, как минимум, 3 последовательным или, что более предпочтительно,как минимум, 4 последовательным аминокислотным последовательностям из первых 19 аминокислот (pf 1-19) N-концевого участка области pf проренина, особенно с 5 по 19 (pf 5-19) и с 27 по 41 (pf 27-41). Аминокислотные последовательности pf 1-19 человека, pf 5-19 человека, pf 27-41 человека, pf 1-19 крыс, pf 5-19 крыс и pf 27-41 крыс приведены в SEQ ID2,3, 4,6,7 и 8, соответственно. В дальнейшем пептиды, состоящие из остатков от М до N в N-концевом участке области pf, будут обозначаться как "pf M-N" Как указано выше, в аминокислотной последовательности области pf проренина составляющие аминокислоты различны, хотя число аминокислотных остатков одинаково даже у разных видов. В экспериментальных примерах в качестве образца, полезного при разработке веществ, являющихся объектами для селекции контролирующих активацию проренина веществ, служит аминокислотная последовательность пептида pf проренина крыс (SEQ ID5 в перечне последовательностей). В примерах представлены синтезированные фрагменты аминокислотной последовательности области pf проренина крыс, как-то: pf 1-11 (SEQ ID9),pf5-19 (SEQ ID7), pf 1-4 (SEQ ID10), pf 17 (SEQ ID11), pf5-l1 (SEQ ID12), pf 12-19(SEQ ID13), pf 11-15 (SEQ ID14) и pf 2741 (SEQ ID8), а также их гипотензивные эффекты, подавление гипертрофии органов и подавление утолщения артерий вследствие подавления ими активации проренина. Однако такие последовательности ими не ограничиваются. Любой специалист в этой области сможет правильно синтезировать, как минимум, 3 пептида известным по сути способом и на основе этих синтезированных пептидов разработать и синтезировать вещество, которое может быть объектом селекции. 11 Далее, как указано выше, антитело, специфичное к пептиду pf крыс, который в соответствии с порядком аминокислотной последовательности в первичной структуре находится в том же месте, что и пептид pf человека, служащий эпитопом для антитела к pf человека, которое способно активировать проренин человекаin vitro, проявляло гипотензивное действие на крыс в модели патологической гипертензии,следовательно, можно предположить, что пептид pf проренина человека, у которого порядок аминокислотной последовательности в первичной структуре такой же, как у пептида pf крыс,тоже будет оказывать гипотензивный эффект на человека. В одном из предпочтительных воплощений информация о пептиде pf проренина человека используется при разработке вещества,служащего объектом селекции. Вещество, служащее объектом селекции,если оно представлено пептидом, можно разработать надлежащим образом на основе информации об аминокислотной последовательности области pf проренина, как указано выше, и подвергнуть селекции. Составляющие этот пептид аминокислоты не обязательно должны быть такими же, как в аминокислотной последовательности этой области проренина, наоборот, в аминокислотную последовательность этого пептида можно вводить мутации: делеции, замены, добавления и вставки, если при этом сохраняется функция пептида (который в дальнейшем иногда именуется "эквивалентным пептидом"). Вещество, служащее объектом селекции,также может быть низкомолекулярным соединением, которое можно получить методами разработки лекарств по принципу комплементарности структуры на основе информации о вторичной и/или третичной структуре аминокислотной последовательности области pf. Вышеуказанный способ позволяет получить вещества, обладающие способностью ингибировать активацию проренина человека антителом к пептиду pf человека. Из полученных веществ можно отобрать вещества, обладающие гипотензивным действием, подавляющие гипертрофию органов и подавляющие утолщение артерий, основываясь на собранной информации о пептидах с последовательностью, частично соответствующей аминокислотной последовательности области pf, известных гипотензивных средствах и т.п., или проводя эксперименты на модельных животных и т.д. Контролирующие активацию проренина вещества Таким образом, настоящее изобретение также предусматривает контролирующие активацию проренина вещества, способные контролировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области pf проренина. В одном из воплощений настоящего изобретения предусматривается контролирующее 12 активацию проренина вещество, способное контролировать активацию проренина человека. Контролирующее активацию проренина вещество по настоящему изобретению может быть веществом, конкурентно ингибирующим белок-белковые взаимодействия, ведущие к активации проренина; веществом, антагонистически ингибирующим связывание проренина или активированного проренина с местом его действия; веществом, проявляющим реакцию антиген-антитело с проренином или активированным проренином; веществом, действующим на то же место, на которое действует проренин или активированный проренин, ингибируя действие проренина или активированного проренина и т.п. В одном из предпочтительных воплощений предусматривается, что вышеуказанное контролирующее активацию проренина вещество обладает свойством ингибирования активации проренина, происходящей посредством белок-белковых взаимодействий в области pf проренина, но не обладает активностью ингибирования ренина. Таким образом, прямое ингибирование ренина не является механизмом действия вещества, контролирующего активацию проренина. Следовательно, в отличие от ингибиторов ренина, оно ингибирует активность проренина, который активируется при патологических состояниях без ингибирования ренинангиотензиновой системы, играющей важную роль в механизме гомеостаза организма. Это является важной характеристикой контролирующих активацию проренина веществ согласно настоящему изобретению. Конкретными примерами могут служить пептиды с частичной последовательностью области pf проренина, эквивалентные им пептиды,низкомолекулярные вещества, разработанные на основе информации об аминокислотной последовательности области pf проренина, антитела к области pf проренина и т.п., но не ограничиваются ими. В одном из предпочтительных воплощений вышеуказанным пептидом является пептид с частичной последовательностью области pf проренина или эквивалентный ему пептид. Так,примерами пептида, происходящего из аминокислотной последовательности области pf проренина человека, могут служить следующие пептиды:hp8: pf 27-41 проренина человека (SEQ ID4). Для контролирования активации проренина можно использовать один из этих пептидов или смесь из двух или нескольких пептидов. 13 В одном из предпочтительных воплощений вышеуказанным антителом является антитело к области pf проренина человека. Так, примерами антител к области pf человека могут служить антитела, полученные с применением следующих пептидов, происходящих из аминокислотной последовательности области pf проренина человека, в качестве антигенов:hp11: pf 30-41 проренина человека (SEQ ID 23). Для контролирования активации проренина можно использовать один вид антител или смесь из двух или нескольких видов. При применении вышеуказанных антител в фармацевтических препаратах в качестве контролирующих активацию проренина веществ предпочтительно используют моноклональные антитела,которые можно получить известными методами,а также предпочтительно используют гуманизованные антитела. Для получения гуманизованных антител можно воспользоваться уже известным методом (J. Immunol. Methods, 100, 540, 1987). Гипотензивные средства В одном из воплощений настоящее изобретение предусматривает гипотензивное средство, содержащее по меньшей мере один вид контролирующих активацию проренина веществ в качестве активного ингредиента. Гипотензивное средство отличается тем, что даже через 12 ч после введения в организм оно все еще оказывает достаточное гипотензивное действие, а продолжительность эффекта весьма большая. Например, в эксперименте на модели патологической гипертензии у крыс эффективность гипотензивного действия через 12 ч после введения составила не менее 10% по систолическому давлению крови (SBP в %). Хотя эта величина не очень высока для гипотензивного средства, специалист в этой области легко сможет получить более сильный эффект путем увеличения дозы, продолжительности введения и/или способа введения и т.д. С другой стороны,эффекты ингибиторов ренина in vivo, которые на данный момент доступны как гипотензивные средства, наступают немедленно после введения, но после этого исчезают в течение нескольких минут. Далее, эффекты ингибиторов АСЕ invivo продолжаются в течение 6-8 ч после введения, однако исчезают после этого. Следовательно, продолжительное гипотензивное действие гипотензивных средств настоящего изобретения в течение длительного времени является очень важной характеристикой в отношении лечения гипертензии. Кроме того, гипотензивные средства настоящего изобретения отличаются по механизму действия от тех лекарств против гипертензии, что доступны на данный момент, таких как ингибиторы АСЕ и ингибиторы ренина, и могут применяться при лечении гипертензии вместе с 14 теми лекарствами против гипертензии, что уже имеются в наличии. Более того, вышеуказанные гипотензивные средства способны оказывать гипотензивное действие избирательно, только на больных,страдающих гипертензией. В эксперименте по сравнению нормальных крыс с крысами модели патологической гипертензии было установлено,что указанные гипотензивные средства действуют только на крыс модели патологической гипертензии. Таким образом, гипотензивные средства настоящего изобретения полезны для лечения гипертензии. Супрессоры гипертрофии органов Настоящее изобретение также предусматривает новые супрессоры гипертрофии органов,содержащие по меньшей мере один вид вышеуказанных контролирующих активацию проренина веществ в качестве активного ингредиента. Супрессоры гипертрофии органов настоящего изобретения способны подавлять гипертрофию таких органов, как сердце и/или почки. Следовательно, можно ожидать, что эти супрессоры гипертрофии органов будут эффективными при сердечной недостаточности и почечной недостаточности. Супрессоры утолщения артерий Настоящее изобретение предусматривает новые супрессоры утолщения артерий, содержащие по меньшей мере один вид вышеуказанных контролирующих активацию проренина веществ в качестве активного ингредиента. Супрессоры утолщения артерий настоящего изобретения способны подавлять утолщение, то есть перестройку кровеносных сосудов - легочной артерии, бедренной артерии и т.д. Следовательно, эти супрессоры утолщения артерий будут эффективными при таких заболеваниях,сопровождающихся утолщением, то есть перестройкой кровеносных сосудов, как артериосклероз. Приготовление фармацевтических препаратов При приготовлении фармацевтических препаратов из вышеуказанных гипотензивных средств, супрессоров гипертрофии органов и супрессоров утолщения артерий можно воспользоваться известными методами в зависимости от физических свойств соответствующего пептида или низкомолекулярного соединения. Например, можно воспользоваться методами изготовления таблеток, капсул, водных растворов, спиртовых растворов, липосом, жировых эмульсий, соединений-аддуктов с циклодекстрином и другими веществами, и т.д. При изготовлении порошков, пилюль, капсул и таблеток можно применять наполнители лактозу, глюкозу, сахарозу, маннитол; дезинтегрирующие средства - крахмал, альгинат натрия; смазочные вещества - стеарат магния, тальк; связующие вещества - поливиниловый спирт,гидроксипропилцеллюлозу, желатин; поверхностно-активные средства типа эфиров жирных 15 кислот; пластификаторы типа глицерина; и др. При изготовлении таблеток и капсул применяются твердые фармацевтические носители. При изготовлении суспензий можно применять воду, такие сахариды, как сахароза, сорбитол, фруктоза, гликолы типа ПЭГ и масла. Растворы для инъекций готовят с применением носителей из числа растворов соли, растворов глюкозы и смесей из растворов соли и глюкозы. Изготовление липосомных препаратов может проводиться, к примеру, таким образом,что раствор данного вещества в растворителе типа этанола добавляют в раствор фосфолипида в органическом растворителе типа хлороформа,растворители удаляют выпариванием, а затем добавляют фосфатный буфер и подвергают перемешиванию, обработке ультразвуком и центрифугированию, получая липосомы после фильтрования супернатанта. Изготовление жировых эмульсий может проводиться, к примеру, таким образом, что данное вещество и жировой компонент (соевое масло, кунжутное масло, оливковое масло, растительное масло, МСТ и др.) смешивают с эмульгатором (типа фосфолипида), нагревают,добавляют необходимое количество воды, после чего подвергают эмульгированию/гомогенизации в эмульсификаторе (типа гомогенизатора высокого давления или ультразвукового гомогенизатора). Продукт можно и лиофилизировать. При получении жировых эмульсий можно использовать вещества, способствующие эмульгированию, примерами которых являются глицерин и такие сахариды, как глюкоза, сорбитол,фруктоза и др. Приготовление соединений-аддуктов с циклодекстрином может проводиться, к примеру, таким образом, что циклодекстрин растворяют в воде или другом растворителе при нагревании и вносят в раствор данного вещества в растворителе типа этанола, смесь охлаждают до выпадения осадка, после чего фильтруют и высушивают со стерилизацией. При этом соответствующий циклодекстрин выбирают из циклодекстринов с различным размером пор (разновидности ,и ) в зависимости от размера данного вещества. Дозы вышеуказанных гипотензивных средств, супрессоров гипертрофии органов и супрессоров утолщения артерий выбирают в зависимости от симптома, пола, возраста и веса пациента. Способ введения - либо внутрь, либо парентерально. В одном из предпочтительных воплощений получают препарат для приема внутрь и вводят per os. Примерные дозы - от 1 до 1000 мкг в день. Примеры Далее настоящее изобретение будет раскрыто более конкретно на следующих примерах, однако настоящее изобретение не ограни 005310 16 чивается ими, а может подвергаться разнообразным модификациям, не выходящим за рамки технической идеи настоящего изобретения. Пример 1. Получение антител, распознающих пептиды, происходящие из области pf проренина крыс. Пептиды pf проренина крыс - pf 1-15 (SEQ(SEQ ID26) - получали твердофазовым методом по стандартной методике, а затем получали к ним антитела - Аb 1, Аb 2 и Аb 3, используя эти олигопептиды в качестве антигенов в соответствии с описанием в примерах, приведенных в Japanese Patent Laid-OpenH10-279600 иU.S. Patent5945512. В частности, указанные олигопептиды, служащие антигенами, вместе с адъювантом использовали для иммунизации кроликов породы New Zealand white и получали антисыворотки. Антисыворотки очищали в соответствии с методом, указанным в патентах. Аb 1: антитело, специфически распознающее pf 1-15Ab 3: антитело, специфически распознающее pf 30-41. Затем получали смесь Аb, смешивая эти антитела в равных количествах. Кроме того,исследовали активацию проренина этими антителами in vitro методами, указанными в патентах, и подтвердили, что они обладают способностью активировать проренин. Пример 2. Получение пептидов, происходящие из области pf проренина крыс. Следующие пептиды, происходящие из области pf проренина крыс, синтезировали твердофазным методом по стандартной методике:p2b: pf 11-15 (SEQ ID14). Затем получали смесь P, смешивая р 1, р 2 и р 3 в равных количествах. Экспериментальный пример 1. Исследование гипотензивного действия антител к пептидуpf и пептида pf. Использовали самцов крыс линии SHR (по 3 в группе, возрастом 12-14 недель, весом 258310 г), служащих моделью патологической гипертензии. Им вводили смесь Ab, полученную в примере 1, смесь P, полученную в примере 2 и растворенную в физрастворе, а также нейтрализующее ренин антитело и каптоприл для сравнения, внутривенно в дозах 0,44 мг/кг, 0,6 мг/кг,0,12 мг/кг и 100 мг/кг, соответственно. Измерения кровяного давления проводили следующим образом: вставляли канюлю в общую сонную 17 артерию и наружную сонную артерию, прикрепляли датчик давления (P23XL, Gould Electronics) и подсоединяли к процессору с преобразователем сигналов давления (Gould Electronics),после чего проводили измерения через каждые 10 мин на протяжении 1 ч после введения исследуемых веществ, а затем через каждый час, и записывали данные на самописце с терморегистрацией (RS 3400, Gould Electronics). Нейтрализующее ренин антитело, представляющее препарат для сравнения, проявляло гипотензивный эффект только через 6 ч после введения, причем уровень гипотензии через 6 и 24 ч составил 11 и 14%, соответственно. Смесь Р и смесь Аb оказывали непрерывный гипотензивный эффект на максимальном уровне 9 и 7%,соответственно, с момента введения до окончания эксперимента. В случае каптоприла, служившего положительным контролем, максимальный гипотензивный эффект (31%) наступал через 6 ч после введения, а в момент окончания эксперимента через 24 ч гипотензивного действия не наблюдалось. Эти результаты показывают, что гипотензивное действие смеси Р и смеси Аb имеет другую зависимость от времени, чем нейтрализующее ренин антитело и каптоприл, который является ингибитором АСЕ. Таким образом, оказалось, что смесь Р и смесь Аb обладают продолжительным гипотензивным действием сразу после введения на очень длительное время. Кроме того, из этого можно сделать вывод, что гипотензивный эффект смеси Р и смеси Аb не обусловлен ингибированием активности ренина. Экспериментальный пример 2. Исходя из данных, полученных в экспериментальном примере 1, был проведен опыт при увеличенной дозе смеси Р (2 мг/кг) на 5 крысахSHR по той же методике, что в экспериментальном примере 1. В контрольной группе использовали физраствор. При этом отмечался временный гипотензивный эффект на 11% сразу после введения. Хотя он и исчезал через 5 мин после введения, однако затем гипотензивное действие постепенно возобновилось до максимального уровня в 9%, после чего отмечалось значительное отличие от контрольной группы через 1-6 ч после введения. Таким образом, оказалось, что смесь Р обладает двухфазным гипотензивным действием. Экспериментальный пример 3. Проводили опыт с пептидами р 1 (pf 1-11),р 2 (pf 5-19) и р 3 (pf 27-41), полученными в примере 2, по той же методике, что в экспериментальном примере 1, используя по 2 или 4 крысыSHR. Результатом было то, что при введении р 1 в дозе 2 мг/кг наблюдался временный гипотензивный эффект примерно на 6% сразу после введения, который исчезал через 5 мин после введения, но затем гипотензивное действие постепенно возобновилось до максимального уровня в 6% и оставалось вплоть до 24 ч. При 18 введении 10 мг/кг отмечался гипотензивный эффект примерно на 7% через 6 ч после введения и вплоть до 24 ч отмечался продолжительный гипотензивный эффект с максимумом в 10%. При введении р 2 в дозе 2 мг/кг наблюдался временный гипотензивный эффект примерно на 35% сразу после введения, который исчезал через 5 мин после введения, но после этого гипотензивное действие возобновилось вплоть до 24 ч до максимального уровня в 6%. При введении р 3 в дозе 2 мг/кг отмечался временный гипотензивный эффект примерно на 14% сразу после введения, который исчезал через 5 мин после введения и больше не возобновился. При введении 10 мг/кг наблюдался гипотензивный эффект на 7% через 2 ч и вплоть до 24 ч оставался продолжительный гипотензивный эффект с максимумом в 11%. Таким образом, обнаружилось, что продолжительным гипотензивным действием обладают пептиды с аминокислотной последовательностью отрезка 1-11 или 5-19 из Nконцевого участка области pf проренина крыс и пептид с аминокислотной последовательностью отрезка 27-41 из С-концевого участка области pf проренина крыс. Полученные результаты также показывают, что временный гипотензивный эффект сразу после введения смеси Р обусловлен действием пептида р 2, а продолжительный гипотензивный эффект после этого обусловлен совместным действием р 1, р 2 и р 3. Экспериментальный пример 4. Для сравнения проводили такой же опыт,как в примере 2, используя 5 крыс с нормальным кровяным давлением (крысы WKY) такого же возраста вместо крыс SHR. За исключением временного гипотензивного эффекта сразу после введения, смесь Р вообще не проявляла гипотензивного действия. Таким образом, подтверждается, что смесь Р не оказывает продолжительного гипотензивного действия на нормальных крыс. Экспериментальный пример 5. Проводили такой же опыт, как в экспериментальном примере 1, используя по 2 крысы(pf 1-7), р 1 с (pf 5-11), р 2 а (pf 12-19) и р 2b (pf 1115), полученными в примере 2, в дозах 1 мг/кг для р 2 а (pf 12-19) и р 2b (pf 11-15) и 10 мг/кг для всех остальных пептидов. При этом пептид р 1 проявлял продолжительный гипотензивный эффект с максимальным уровнем в 14% вплоть до 24 ч после введения. Пептид р 1 а оказывал временный гипотензивный эффект в 13% сразу после введения,однако затем он оказывал продолжительное гипотензивное действие с максимумом в 13% вплоть до 24 ч. Пептид р 1b оказывал временный гипотензивный эффект в 17% сразу после введения, однако затем он оказывал продолжительное гипотензивное действие с максимумом в 19 13% вплоть до 24 ч. Пептид р 1 с оказывал временный гипотензивный эффект в 21% сразу после введения, однако затем он оказывал продолжительное гипотензивное действие с максимумом в 16% вплоть до 24 ч. Пептид р 2 а оказывал временный гипотензивный эффект в 6% сразу после введения, однако затем он оказывал продолжительное гипотензивное действие с максимумом в 14% вплоть до 24 ч. Такой же эффект оказывало и применение пептида р 2b. Таким образом, обнаружилось, что продолжительным гипотензивным действием обладают пептиды с аминокислотной последовательностью отрезка 1-19 из N-концевого участка области рf проренина крыс. Экспериментальный пример 6. Использовали пептид р 2 а (pf 12-19), полученный в примере 2, и препарат Н 6137, являющийся ингибитором ренина (D-His-Pro-Phe-HisLeu[CH2NH]-Leu-Val-Tyr; Sigma), которые вводили в дозе 1 мг/кг через канюлю в наружной сонной артерии и измеряли изменения кровяного давления в зависимости от времени методом, указанным в примере 1. При этом пептид р 2 а проявлял продолжительный гипотензивный эффект с максимумом в 11% через 5-8 ч после введения и этот эффект длился не менее 12 ч после введения. С другой стороны, хотя Н 6137 и проявлял продолжительный гипотензивный эффект с максимумом в 9% через 3-8 ч после введения, наблюдалась тенденция к исчезновению эффекта через 6 ч после введения и впоследствии. Выяснилось, что пептид р 2 а требует длительного времени для проявления своего эффекта, однако он обладает продолжительным действием, тогда как в случае Н 6137 эффект наступает быстро, но срок действия его короток. Из этих различий в зависимости гипотензивного эффекта от времени можно сделать вывод, что гипотензивное действие контролирующего активацию проренина вещества, представленного р 2 а, не обусловлено ингибированием ренина. Экспериментальный пример 7. Пептид р 1 с (pf 5-l1), полученный в примере 2, вводили внутривенно один раз в день на протяжении 14 дней в дозе 1,6 мг/кг группе из 4 крыс SHR. На 14-день крыс забивали путем обескровливания, а затем выделяли сердце и почки и взвешивали. Результаты представлены в табл. 1 как вес органа в пересчете на 100 г веса тела. Как видно из табл. 1, у получавших р 1 с крыс SHR вес сердца и почек был меньше, чем в контрольной группе, получавшей физраствор,из чего следует, что р 1 с подавляет гипертрофию сердца и почек. Экспериментальный пример 8. Выделяли легочные артерии, верхние брыжеечные артерии и бедренные артерии у крыс, исследованных в экспериментальном примере 7, и взвешивали. Вес артерий выражали в пересчете на площадь поверхности, а затем пересчитывали это значение на вес тела крысы. В табл. 2 представлены результаты после сравнения. Как видно из табл. 2, у получавших р 1 с крыс SHR вес артерий был заметно меньше, чем в контрольной группе, из чего сделан вывод, что р 1 с подавляет утолщение артерий, то есть перестройку кровеносных сосудов. Таблица 2 Пример 3. Была разработана система скринирования с применением проренина человека, полученного согласно описанию в Japanese Patent LaidOpenH10-279600 и U.S. Patent5945512, и антитела, способного активировать проренин человека при специфическом узнавании пептидаpf проренина человека. С помощью разработанной системы скринирования проводили испытания искомых соединений для проверки их действия на активацию проренина человека антителом к пептиду pf. Этим методом можно получить вещества, способные ингибировать активацию проренина человека антителом к пептидуpf человека. Кроме того, собранная информация о пептидах из области профрагмента проренина,известных гипотензивных средствах и т.п., а также результаты экспериментов на модельных животных дают возможность отбора веществ,обладающих гипотензивным действием, супрессоров гипертрофии органов и супрессоров утолщения артерий из числа полученных веществ. Промышленное применение Настоящее изобретение предусматривает способ селекции веществ, способных контролировать активацию проренина, в котором в качестве индикатора служит способность модифицировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина, а также предусматривает контролирующие активацию проренина вещества, обладающие способностью 21 регулировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина. Кроме того, применение указанных контролирующих активацию проренина веществ дает возможность получить гипотензивные средства,супрессоры гипертрофии органов и супрессоры утолщения артерий с новым механизмом. Такие фармацевтические средства могут эффективно применяться, сами или вместе с уже известными средствами, для лечения гипертензии, сердечной недостаточности, почечной недостаточности, артериосклероза, заболеваний, сопровождающихся перестройкой кровеносных сосудов и т.д. Перечень последовательностей ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ селекции вещества, способного контролировать активацию проренина, при осуществлении которого в качестве индикатора служит способность модифицировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 2. Способ селекции вещества, способного контролировать активацию проренина, при осуществлении которого в качестве индикатора служит способность модифицировать активацию проренина антителом к области профрагмента проренина. 3. Способ селекции по п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации по, как минимум, 3 отрезкам аминокислотной последовательности в области профрагмента проренина. 4. Способ селекции по п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации по, как минимум, 3 отрезкам аминокислотной последовательности в районе остатков 1-19 или 27-41 в N-концевом участке области профрагмента проренина. 5. Способ селекции по п.1 или 2, в котором вещество для селекции разрабатывают на основе информации, как минимум, по 3 отрезкам аминокислотной последовательности в районе 26 остатков 5-19 в N-концевом участке области профрагмента проренина. 6. Способ селекции по любому из пп.3-5, в котором вещество для селекции представляет собой пептид. 7. Способ селекции по любому из пп.3-5, в котором вещество для селекции представляет собой низкомолекулярное соединение. 8. Способ селекции по любому из пп.1-7, в котором проренин является проренином человека. 9. Способ селекции по любому из пп.1-7, в котором проренин является проренином крыс. 10. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью регулировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид. 11. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью регулировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем это вещество получено любым из способов селекции согласно предыдущим пп.1-9, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид. 12. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид. 13. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, и не обладающее свойствами ингибитора ренина, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид. 14. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, причем это вещество получено любым из способов селекции по пп.1-9,причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, 27 происходящее из природных веществ, или пептид. 15. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, и не обладающее свойствами ингибитора ренина, которое получено любым из способов селекции по пп.1-9, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид. 16. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью из области профрагмента проренина или эквивалентный ему, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белокбелковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 17. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-10 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина,происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 18. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-8 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина,происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 19. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее пептид с частичной последовательностью отрезка 3-6 из области профрагмента проренина, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина,происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 20. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее один из пептидов отSEQ ID No. 7 до SEQ ID No. 14 в перечне последовательностей, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 21. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее один из пептидов из числа SEQ ID No. 3, SEQ ID No. 4 и от SEQ IDNo. 15 до SEQ ID No. 20 в перечне последовательностей, которое обладает способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимо 005310 28 действий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры. 22. Контролирующее активацию проренина вещество, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белок-белковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, при этом вещество представляет собой низкомолекулярное соединение,разработанное на основе информации по аминокислотной последовательности области профрагмента проренина. 23. Контролирующее активацию проренина вещество по любому из пп.16-22, обладающее способностью ингибировать активацию проренина, происходящую посредством белокбелковых взаимодействий в области профрагмента проренина без изменения первичной структуры, при этом вещество не обладает свойствами ингибитора ренина. 24. Контролирующее активацию проренина вещество по любому из пп.12-23, у которого ингибирование активации проренина обусловлено антагонистическим действием на белокбелковые взаимодействия в области профрагмента проренина, причем указанное вещество представляет собой низкомолекулярное соединение, соединение, происходящее из природных веществ, или пептид. 25. Контролирующее активацию проренина вещество, включающее антитело к частичной последовательности области профрагмента проренина, где последовательность выбрана из SEQID No. 22-26 перечня последовательностей, которое способно ингибировать активацию проренина in vivo путем удаления проренина в реакции между антигеном и антителом к области профрагмента проренина. 26. Гипотензивное средство, содержащее по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из пп.12-25 в качестве активного ингредиента. 27. Гипотензивное средство по п.26, у которого эффективность гипотензивного действия составляет около 10% или больше по меньшей мере на 12-й ч после введения in vivo. 28. Гипотензивное средство по п.26, у которого гипотензивное действие избирательно проявляется только у больных, страдающих гипертензией. 29. Супрессор гипертрофии органов, содержащий по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из пп.12-25 в качестве активного ингредиента. 30. Супрессор гипертрофии органов по п.29, обладающий способностью подавлять гипертрофию сердца и/или почек. 31. Супрессор утолщения артерий, содержащий по меньшей мере одно из контролирующих активацию проренина веществ по любому из пп.12-25 в качестве активного ингредиента. 32. Способ лечения гипертензии с помощью любого из гипотензивных средств по пп.26-28. 33. Способ лечения сердечной недостаточности или почечной недостаточности с помощью супрессора гипертрофии органов по п.29 или 30. 34. Способ лечения заболеваний, сопровождающихся утолщением кровеносных сосудов,с помощью супрессора утолщения артерий по п.31. 35. Способ селекции вещества, способного контролировать активацию проренина человека 30 без изменения первичной структуры, который осуществляют с использованием системы активации проренина, происходящей из животного,не являющегося человеком, причем система разработана на основании информации о частичной последовательности аминокислотной последовательности проренина животного, не являющегося человеком, соответствующей частичной последовательности аминокислотной последовательности проренина человека, которая вовлечена в активацию проренина человека.

МПК / Метки

МПК: A61P 9/12, C07K 5/08, A61K 38/04, G01N 33/50

Метки: гипотензивные, средства

Код ссылки

<a href="http://easpatents.com/16-5310-gipotenzivnye-sredstva.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Гипотензивные средства</a>

Похожие патенты