Применение сложных эфиров гидроксибензойной кислоты для получения лекарственного средства для предупреждения и лечения папилломавирусной инфекции человека

Номер патента: 16576

Опубликовано: 30.06.2012

Автор: Кин Вейхуа

Есть еще 2 страницы.

Смотреть все страницы или скачать PDF файл.

Формула / Реферат

1. Применение сложного эфира гидроксибензойной кислоты формулы (I) в получении лекарственного средства для предупреждения и лечения вирусной инфекции HPV у человека или животного, где R представляет собой C1-11алкильную группу; R1, R2, R3, R4 и R5 независимо являются OH или H; причем по меньшей мере два из R1, R2, R3, R4 и R5 являются OH; при этом сложный эфир формулы (I) не является эфиром салициловой кислоты

Рисунок 1

2. Применение по п.1, где вирусной инфекцией является остроконечная кондилома, вагинит, цервицит или цервикальная эрозия.

3. Применение по п.1 или 2, где лекарственное средство для предупреждения и лечения вирусной инфекции применяется при лечении рака шейки матки.

4. Применение по любому из пп.1-3, где R является C1-8 алкильной группой.

5. Применение по любому из пп.1-4, где R является C1-3 алкильной группой.

6. Применение по любому из пп.1-5, где по меньшей мере три из указанных R1, R2, R3, R4 и R5 представляют собой OH.

7. Применение по любому из пп.1-6, где сложный эфир гидроксибензойной кислоты выбран из группы, состоящей из сложного эфира 2,4-дигидроксибензойной кислоты, сложного эфира 3,4-дигидроксибензойной кислоты, сложного эфира 2,3,4-тригидроксибензойной кислоты и сложного эфира 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты.

8. Применение по любому из пп.1-7, где сложный эфир гидроксибензойной кислоты выбран из группы, состоящей из сложного эфира 2,3,4-тригидроксибензойной кислоты и сложного эфира 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты.

9. Применение по любому из пп.1-8, где сложным эфиром гидроксибензойной кислоты является сложный эфир 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты.

10. Применение по любому из пп.1-9, где лекарственное средство выполнено в форме порошка, раствора, таблетки, капсулы, гранулы или жидкости с различными адъювантами для инъекции или пероральной формы введения или выполнено в форме мази, геля, лосьона, таблетки, суппозитория или спрея.

Текст

Смотреть все

ПРИМЕНЕНИЕ СЛОЖНЫХ ЭФИРОВ ГИДРОКСИБЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И ЛЕЧЕНИЯ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ ЧЕЛОВЕКА Применение сложного эфира гидроксибензойной кислоты, имеющего формулу (I) для получения лекарственного средства для предупреждения и лечения вирусной инфекции,а именно для предупреждения у людей и животных инфекций HPV, где вирусная инфекция включает остроконечную кондилому, вагинит, цервицит и цервикальную эрозию. Иными словами,предусмотрены различные виды лекарственного средства, которые получены с применением сложного эфира гидроксибензойной кислоты и фармацевтического адъюванта.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ШЕНГХУА (ГУАНЧЖОУ) ФАРМАСЬЮТИКАЛ САЕНС ЭНД ТЕКНОЛОДЖИ КО., ЛТД. (CN) 016576 Область техники Данное изобретение касается применения сложных эфиров гидроксибензойной кислоты для получения лекарственного средства для предупреждения и лечения вирусной инфекции. Особенно, данное изобретение касается применения сложных эфиров гидроксибензойной кислоты для получения лекарственного средства для лечения болезней, связанных с вирусом папилломы человека у людей и животных(таких как остроконечная кондилома, вагинит, цервицит и цервикальная эрозия), и применения такого лекарственного средства для обеспечения лечения рака шейки матки. Технические предпосылки Среди сложных эфиров гидроксибензойной кислоты и их аналогов сложные эфиры пгидроксибензойной кислоты часто используют как консерванты продуктов питания и лекарств. Сложный эфир галловой кислоты ("сложный эфир 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты") может ингибировать синтез тромбоксана A2 (TXA2). Он обладает более сильным и более быстрым эффектом на агрегацию тромбоцитов, чем аспирин (ASP), и применяется в растворе для инъекций. Доказано, что галловая кислота ингибирует репликацию вируса гепатита В (см. Journals of Guangzhou Liberation Army High SpecializedSchool, 1998, 26 (2):5-7). До сих пор нет сообщений о применении сложных эфиров гидроксибензойной кислоты, включая сложные эфиры 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты, для лечения вирусной инфекции у человека, например гепатита В или вирусной инфекции кожи и слизистой. В патенте Китая 1411339 А и патенте США 6294186 раскрыта противомикробная композиция. Композиция включает безопасное и эффективное количество аналогов бензойной кислоты, которые имеют следующее строение (II): где R1, R2, R4 и R5 независимо представляют собой H, OH, F, I, Br, Cl, SH, NH2, CN, алкил, алкокси,NR2, OR, NO2, COR, CONR2, CO2R или SO3R, где R независимо представляет собой H, алкил или алкокси; R3 независимо представляет собой H, OH, F, I, Br, Cl, SH CN, алкил, алкокси, OR, NO2, COR, CONR2,CO2R или SO3R, где R независимо представляет собой H, алкил или алкокси. Вышеупомянутые ссылки на патенты указывают также на наиболее предпочтительный вариант осуществления, такой как салициловая кислота ("2-гидроксибензойная кислота"), бензойная кислота или их комбинация; они также ограничивают диапазон pH, в котором эти соединения могут использоваться, до 1-7. Хотя вирусы являются мельчайшими известными патогенными микроорганизмами, они наиболее широко распространены. На сегодня почти три четверти контагиозных болезней в мире вызываются вирусами. В клинической диагностике многие болезни относятся к вирусной инфекции. Остроконечная кондилома, также называемая половыми бородавками или венерическими бородавками, является доброкачественным ростом кожи и слизистой, индуцированным вирусом папилломы человека (HPV). Это - одна из наиболее часто наблюдаемых болезней, передающихся половым путем, тесно связанная с воспалением и раком половых органов. В настоящее время подофиллотоксин является одним из лекарств для лечения половых бородавок. Его преимущество заключается в коротком времени лечения, а недостаток - в раздражении кожи и серьезных побочных эффектах, включая боль, отек, эрозию и т.д. Гель рекомбинантного интерферона -2 признают эффективным наружным лекарством для лечения половых бородавок. Последние исследования показали, что 29,3% пациентов с цервикальной эрозией оказались HPV(вирус папилломы человека) положительными, тогда как процент позитивных среди нормальной популяции составляет только 11,1% (Fuqiang Chen, Tumor Prevention Magazine, 2001, 8 (4) 342-344; ChenkangXu, Journal of Zhongshan Medical University, 1998, 19 (3): 223-226). Сообщалось, что высокий риск HPV16 и HPV18 ожидали у около 69% пациентов с хроническим цервицитом и обнаружили, что процент этих подтипов увеличился, поскольку увеличилась степень цервикальной эрозии (Ahm W.S. et al., J. Cell. Biochem. Suppl., 1997; 28-29: 133-139). Различие определенных процентов HPV16 и HPV18 между гранулярной или папиллярной эрозией и нормальной шейкой матки было значительным. Положительный процентHPV16 и HPV18 в раке шейки матки мог бы достигать 83,33% при определении с помощью PCR (полимеразная цепная реакция). ДНК высокого риска HPV можно вставить в хромосомы клеток хозяина, а затем продуцировать опухолевые белки E6 и E7. E6 и E7 могли бы соответственно ингибировать противораковые гены p53 и Rb. В результате, клетки утратили бы контроль над p53 и Rb. Это заставило бы клетки в стабильном состоянии активно расти, и они могли бы стать раковыми. Если HPV16 остается в клетках, это может превратить патологические изменения шейки матки в рак. Отличная от инфекции-1 016576 женских половых органов HPV инфекция шейки матки главным образом включает HPV 16/18 и обычно не вызывает бородавки. Она существует как скрытая инфекция в течение длительного времени и сначала индуцирует атипичную гиперплазию и становится раковой, когда появляются другие факторы. Таким образом, всегда исследуются и разрабатываются новые лекарства для предотвращения и лечения HPV. Описание изобретения Основной целью данного изобретения является обеспечение применения сложных эфиров гидроксибензойной кислоты для получения лекарственного средства для предупреждения и лечения вирусной инфекции, а именно для получения лекарственного средства для предупреждения и лечения болезней,связанных с HPV у человека и животных. Данное изобретение касается сложных эфиров гидроксибензойной кислоты, имеющих следующую общую формулу (I): где R представляет собой C1-11 алкил; R1, R2, R3, R4, R5 независимо являются OH или H и по меньшей мере два из R1, R2, R3, R4 и R5 являются OH, за исключением салицилата. Предпочтительно R представляет собой C1-8 алкил, т.е. CH3, C2H5, C3H7, C4H9, C5H11, C6H13, C7H15,C8H17; наиболее предпочтительным числом атомов углерода является 1-3, т.е. CH3, C2H5 и C3H7.R1, R2, R3, R4, R5 вместе содержат предпочтительно две или более группы OH и более предпочтительно содержат три или более группы OH. В определенных предпочтительных вариантах осуществления сложные эфиры гидроксибензойной кислоты, имеющие формулу (I), включают следующие соединения: сложный эфир 4-гидроксибензойной кислоты; сложный эфир 2,4-дигидроксибензойной кислоты; сложный эфир 3,4-дигидроксибензойной кислоты; сложный эфир 2,3,4-тригидроксибензойной кислоты; сложный эфир 3,4,5 тригидроксибензойной кислоты или сложный эфир 3,4,6-тригидроксибензойной кислоты. В предпочтительном варианте осуществления соединения по данному изобретению включают сложный эфир 2,3,4 тригидроксибензойной кислоты, сложный эфир 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты и сложный эфир 3,4,6-тригидроксибензойной кислоты. В наиболее предпочтительном варианте осуществления соединения по данному изобретению включают сложный эфир 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты. Соединения по данному изобретению и/или композиции, содержащие такие соединения как активные ингредиенты, можно использовать для получения лекарственных средств для лечения связанных с вирусом болезней у человека и животных, а именно для лечения болезней, связанных с HPV, включая,без ограничения, остроконечную кондилому, вагинит, цервицит, цервикальную эрозию и цервикальный рак. Как терапевтические лекарства, соединения по данному изобретению и/или композиции, содержащие эффективное количество таких соединений как активные ингредиенты, являются основными компонентами продуктов для предотвращения и лечения вирусной инфекции в организме и на коже человека. Их не используют как вспомогательные ингредиенты, такие как консерванты, антиоксиданты и так далее. Если противовирусный эффект продукта снижается при снижении концентрации соединений и/или композиций, содержащих такие соединения как активные ингредиенты, он должен действовать как эффективный ингредиент для предупреждения и лечения болезней кожи и слизистой, связанных с вирусом. Вышеупомянутое эффективное количество означает дозу, при которой такие соединения или композиции могут эффективно устранить или предотвратить вирусную инфекцию. Большинство соединений данного изобретения являются известными соединениями. Некоторые из них использовались для создания пищевых добавок, некоторые являются фармацевтическими адъювантами, а некоторые являются фармацевтическими промежуточными соединениями, которые можно приобрести на рынке, экстрагировать из растений или получить известными способами. Соединения по данному изобретению и/или композиции, содержащие такие соединения вместе с различными адъювантами для инъекции или пероральных составов, можно выполнить в форме порошка,раствора, таблеток, капсул, гранул, жидкостей или других фармацевтически приемлемых препаратов. Соединения по данному изобретению и/или композиции, содержащие такие соединения вместе с различными адъювантами для кожных и слизистых составов, можно выполнить в форме различных препаратов, таких как мази, гели, жидкости для промывания, таблетки, суппозитории, диафрагмы, спреи или другие фармацевтически приемлемые препараты. Отдельное соединение или комбинацию более чем одного соединения по данному изобретению-2 016576 можно применять для получения лекарственных средств по данному изобретению. Соединение(я) можно скомбинировать с различными фармацевтически приемлемыми носителями для обеспечения образования фармацевтически приемлемого состава. Такие носители включают, но не ограничиваются, крахмал,декстрин, Tween-80, карбомер, целлюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, альгинат натрия, глицерин, пропандиол, полиэтиленгликоль, лаурокапрам, изопропанол, троламин и Span 60 (сорбитана моностеарат). Составы по данному изобретению можно получить традиционными способами, известными в данной области. Соединения и/или композиции, содержащие такие соединения, могут эффективно уничтожать или предупреждать вирусы HPV 6/11, 16/18, могут применяться для получения лекарственных средств для лечения вирусной инфекции HPV, для лечения остроконечной кондиломы, вагинита, цервицита, цервикальной эрозии и помощи при лечении цервикального рака. В данном изобретении используют количественную флуоресцентную PCR реального времени для определения количества HPV в образце для обследования соединений и их лечебных эффектов. Об этом способе сообщают в некоторых публикациях(Youling, Cai, Prevention of Chinese venereal disease and cancer, 2002, 8:2, 108; Yuansheng, Wu, Ruiqiang,Qu, Practical Chinese and western medicine clinics, 2003, 3: 2, 1). Линия 2.2.15 клеток опухоли печени, которую можно культивировать in vitro в течение длительного времени, является наиболее часто применяемой опытной моделью клеток для гепатита B. Ее используют в данном изобретении для исследования эффекта соединений по данному изобретению на клеточную секрецию HBsAg и HBeAg. Результаты показывают, что эффект сложных эфиров гидроксибензойной кислоты по данному изобретению сильнее, чем эффект гидроксибензойной кислоты и ее аналогов. Некоторые из соединений данного изобретения являются пищевыми добавками, которые не токсичны в диапазоне их дозы. Клиническое обследование пациентов, инфицированных HPV, показало, что сложные эфиры гидроксибензойной кислоты обладают более сильным лечебным эффектом на вирусную инфекцию, чем гидроксибензойная кислота и ее аналоги. Сложные эфиры гидроксибензойной кислоты более стабильны, чем гидроксибензойная кислота. Эксперименты показали, что пропилгаллат был более стабильным, чем галловая кислота, особенно, когда он находится в слабой щелочной среде организма человека (pH 7,4) или кишечной щелочной среде(pH 8,6). Раствор гидроксибензойной кислоты менялся от бесцветного до желтого за более короткий период времени, чем сложный эфир гидроксибензойной кислоты при условии pH 6,8-8,6, как показала спектрофотометрия. При этом противовирусная активность сложного эфира гидроксибензойной кислоты выше, чем активность соответствующей ему кислоты. Например, противовирусная активность пропилгаллата более чем на один порядок выше, чем активность галловой кислоты. Данные, показанные в примерах данной заявки, продемонстрировали, что сложные эфиры гидроксибензойной кислоты не воздействуют как пролекарства гидроксибензойных кислот. Поэтому из соединений по данному изобретению можно сделать противовирусные лекарства с преимуществами контролированного качества и значительного лечебного эффекта. Примеры Следующие примеры обеспечивают дополнительное иллюстрирование данного изобретения и не предназначены для ограничения объема данного изобретения. Материалы (99% содержания), применяемые в данном изобретении, и их поставщики являются следующими: Пример 1. Получение анти-HPV микроэмульсии. Смешивают вместе 20 мл 1,2-пропиленгликоля, 15 мл Tween-80 и 5 мл азона, добавляют необходимое количество стерильной дистиллированной воды для получения 100 мл раствора для наружного применения. По 10 г каждого из бензойной кислоты, салициловой кислоты, комбинации бензойной кислоты и салициловой кислоты, п-гидроксибензойной кислоты, 2,3-дигидроксибензойной кислоты, 2,4 дигидроксибензойной кислоты, 3,4-дигидроксибензойной кислоты, этил п-гидроксибензоата, метил 3,4 дигидробензоата, галловой кислоты, додецилгаллата, октилгаллата, пропилгаллата, этилгаллата, метилгаллата, метил 2,4-дигидробензоата добавляют в 50 мл раствора для наружного применения соответственно. Значение pH раствора регулируют до 5,5. Затем соответствующее количество раствора для наружного применения добавляют для получения 100 мл микроэмульсии, содержащей 10% соединений по данному изобретению или контрольную группу. Пример 2. Получение анти-HBV инъекционного раствора, содержащего пропилгаллат. Смешивают 10 г пропилгаллата, 8,5 г хлорида натрия, 10 мл 1,2-пропиленгликоля и 10 мл Tween-80 и растворяют в стерильной дистиллированной воде до окончательного объема 100 мл. Значение pH раствора регулируют до 7,4. Затем раствор фильтруют, инкапсулируют и стерилизуют при 100C в течение 30 мин для получения раствора для инъекции пропилгаллата. Пример 3. Получение шипучих таблеток, содержащих этилгаллат. 0,25 г этилгаллата, 0,01 г полиинозиновой кислоты и 0,45 г винной кислоты просеивают через сито 80 меш отдельно, превращают в мягкие материалы с 95% этанолом, затем просеивают через сито 12 меш. Полученные влажные частицы сушат при 50C. 0,65 г натрия гидрокарбоната, 0,02 г декстрина и стерильную дистиллированную воду смешивают вместе для образования мягкого материала, который затем просеивают сквозь сито 12 меш и сушат при 50C. Полученные материалы смешивают с сухими частицами, полученными первоначально. Окончательно к смеси добавляют стерильную дистиллированную воду, нагревают, смешивают с 0,01 г PEG6000 (полиэтиленгликоль 6000) и изготавливают из нее шипучие таблетки. Пример 4. Исследование лекарства с помощью количественного флуоресцентного PCR анализа. Образцы. Микроэмульсию, полученную в примере 1, используют как опытные образцы, а в качестве контроля используют соленую воду. Образцы HPV: образцы остроконечной кондиломы отбирают у клинических пациентов. Образцы промывают соленой водой от крови. Затем их измельчают в стерильных условиях, смешивают с тремя объемами соленой воды, гомогенизируют и хранят при -40C до дальнейшего использования.-4 016576 Таблица 1 Результаты опыта по исследованию количественным флуоресцентным PCR анализом HPV Экспериментальные способы. К 50 мкл гомогената образца HPV добавляют 50 мкл микроэмульсии каждого опытного соединения или 50 мкл соленой воды. Смесь инкубируют в тепловой ванне при 37C на протяжении 24 ч. Затем количество ДНК HPV 6/11 и HPV 16/18 определяют с помощью диагностического набора FQ-PCR (количественная флуоресцентная полимеразная цепная реакция), приобретенного от Da An Gene Diagnostics Center. 0,2 мл ДНК экстрагируют из каждого образца традиционным способом щелочного расщепления и помещают в тонкостенную пробирку. В пробирку добавляют необходимое количество праймеров, FPROBE, DNTP (деоксинуклеозидтрифосфат), ДНК полимеразу и буферные растворы. Используют аппарат количественного флуоресцентного PCR ABI PRISM 7700. Реакцию проводят при следующих условиях: начальная денатурация при 93C на протяжении 2 мин; дальнейшая денатурация и отжиг при 93C на протяжении 45 с и 55C на протяжении 120 с, цикл повторяют 40 раз. Окончательно результат анализируют, рассчитывают на компьютере и представляют в табл. 1. Результаты эксперимента. Через 24 ч после добавления опытного соединения ни HPV 6/11, ни HPV 16/18 не обнаруживают с помощью FQ-PCR при исследовании октилгаллата, пропилгаллата, этилгаллата, метилгаллата, галловой кислоты. Для группы этил п-гидроксибензоата HPV 16/18 также не определяют. Но HPV 16/18 определяют в опыте с п-гидроксибензойной кислотой. Небольшое количество HPV 16/18 определяют в опытах с метил 2,4-дигидроксибензоатом и метил 3,4-дигидроксибензоатом. Напротив, большие количества HPV 6/11 и HPV 16/18 обнаруживают в контрольной группе и опытах с бензойной кислотой, салициловой кислотой и смесью бензойной кислоты и салициловой кислоты, додецилгалатом и 3,4 дигидроксибензойной кислотой. Результаты показывают, что соединения по данному изобретению могут элиминировать HPV эффективно и быстро in vitro. Количество атомов углерода сложного эфира гидроксибензойной кислоты и алкилового спирта должно быть меньше двенадцати. Пример 5. Клиническое применение сложного эфира гидроксибензойной кислоты при лечении остроконечной кондиломы. Диагностические стандарты. Следующие стандарты взяли из справочника по предупреждению и лечению венерических заболеваний, второе издание, опубликовано Бюро Здравоохранения и предупреждения эпидемии Министерства Здравоохранения республики Китая. Мягкую гиперплазию или с бугорком в форме цветной капусты, или с бугорками другой формы обнаруживают на коже вокруг женских половых органов или ануса. Результат опыта с 5% уксусной кислотой по обнаружению белых участков был положительным.-5 016576 Стандарты отбора пациентов. Пациенты, выбранные для клинического исследования, должны соответствовать вышеописанным стандартам. К тому же, диаметр их кожных повреждений должен быть равен или быть менее 1 см. Кроме того, пациенты не должны принимать лечение от болезни в течение двух недели перед обследованием. Не выбирают пациентов, имеющих грибок, трихомоноз, бактериальную инфекцию или другие осложнения, хронические болезни, серьезные болезни печени и почек, беременных женщин или женщин в период лактации. Лечения женщин не проводили в их период менструации. Экспериментальные способы. Отбирают 50 подходящих пациентов и произвольно распределяют их на пять групп для опыта с пгидроксибензойной кислотой, галловой кислотой, этил п-гидроксибензоатом, пропилгаллатом и гелем рекомбинантного интерферона -2 человека соответственно. Образцы п-гидроксибензойной кислоты,галловой кислоты, этил п-гидроксибензоата и пропилгаллата получают, как описано в примере 1. Пораженные области пациентов обрабатывают опытным образцом три раза в день, утром, днем и вечером. Образцы наносят на бугорки, и пациенты должны оставить обработанные области открытыми и не двигаться в течение 20 мин. Критерий эффекта лечения. Время обследования: 8 дней. Пациенты, которые не излечились за 8 дней, продолжают применять опытные образцы еще 12 недель, а их прогноз продолжается в течение 12-недельного периода. Предметы обследования: расположение, форма, размер и число бугорков осторожно обследуют и отмечают перед лечением."Излечение": все повреждения кожи исчезли."Отсутствие эффекта": менее чем 30% повреждений кожи исчезли или первоначальные повреждения кожи не изменились или даже увеличились. Результаты показали, что гель рекомбинантного интерферона -2 человека, который считается лучшим лекарственным средством при лечении остроконечной кондиломы, необходимо применять по меньшей мере 4 недели, чтобы удалить бугорки. Статистический анализ показал, что эффект этил пгидроксибензоата и пропилгаллата был значительно выше, чем эффект п-гидроксибензойной кислоты и галловой кислоты. При сравнении с гелем рекомбинантного интерферона -2 человека этил пгидроксибензоат и пропилгаллат проявляют более явный эффект. Кроме того, соединения по данному изобретению не вызывают никаких очевидных раздражений кожи. Единственный побочный эффект заключался только в том, что некоторые пациенты могут эпизодически испытывать ощущение жжения при применении соединений. Таблица 2 Результаты клинического применения соединений для лечения остроконечной кондиломы Пример 6. Эффект ингибирования аналога сложного эфира гидроксибензойной кислоты на секрецию HBsAg с помощью линии клеток гепатита B 2.2.15. Материалы эксперимента. Линия клеток гепатита В 2.2.15, трансфецированная посредством HBV ДНК (полученная от InstituteScreening) и используемая как модель клетки для изучения анти-HBV лекарственных соединений (см.Chinese Journal Of Integrated Traditional and Western Medicine on Liver Diseases, 2004, 14(3): 158). Среда культивирования клеток DMEM (GIBCO Company), эмбриональная сыворотка быка (Hangzhou Siji Qingengineering Co., Ltd.). Экспериментальные способы. Согласно результатам исследований токсичности аналоги сложного эфира гидроксибензойной кислоты, изложенным в табл. 3 ниже, растворяют в смеси, содержащей 20 мл 1,2-пропиленгликоля и 15 млTween-80, и разбавляют стерильной соленой водой до 2 мкмоль/мл опытного соединения. Затем его смешивают со средой культивирования клеток в равном объеме для получения раствора, содержащего 1 мкмоль/мл исследуемого соединения. Клетки при концентрации 1105 клеток на 1 мл инокулируют в 24 луночный планшет при 1 мл/лунка. Супернатант из смеси клеточной культуры собирают через три дня для опыта. Результаты степеней ингибирования HBsAg и HBeAg изложены в табл. 3. Результаты эксперимента. Галловая кислота, пропилгаллат, 3,4-дигидроксибензойная кислота, этил 3,4-дигидроксибензоат проявляли ингибирующий эффект на секрецию HBsAg и HBeAg по клеткам линии 2.2.15. Ингибирование пропилгаллатом и этил 3,4-дигидроксибензоатом было более эффективным, чем галловой кислотой и 3,4-дигидроксибензойной кислотой. Таблица 3 Эффект гидроксибензойной кислоты и ее сложного эфира на секрецию HBsAg и HBeAg по клеткам линии 2.2.15 Пример 7. Наружное лечение инфекции HSV в клинических опытах. Двадцать два пациента, у которых клинически диагностировали инфекцию HSV, произвольно отобрали и распределили на две группы. Мазь ацикловира и микроэмульсию, содержащую пропилгаллат,которые получены, как описано в примере 1, наносят двум группам пациентов соответственно на пораженные участки три раза в день. Результаты показали, что среднее время для восстановления с применением пропилгаллата составило три дня, в то время как среднее время для восстановления при лечении мазью ацикловира составило 5,5 дня. Микроэмульсия пропилгаллата была более эффективной, чем мазь ацикловира при лечении инфекции HSV. Пример 8. Получение жидкого очищающего средства для рук. Миристилсульфат натрия, 1,2-пропиленгликоль, 4-хлор-3,5-диметилфенол, триклозан и ароматизирующий материал смешивают вместе согласно соотношению, изложенному в табл. 4 ниже, и добавляют воду к смеси до 5%. Затем смесь нагревают до 80C с перемешиванием до полного растворения ингредиентов. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры. Добавляют этил п-гидроксибензоат и растворяют в растворе с перемешиванием. Значение pH раствора регулируют до 5,0 при помощи NaOH или HCl. Затем добавляют стерильную дистиллированную воду для получения продукта.-7 016576 Таблица 4 Получение жидкого очищающего средства для рук Пример 9. Опыт устойчивости пропилгаллата и галловой кислоты. 20 мл 1,2-пропиленгликоля, 15 мл Tween-80 и 5 мл азона смешивают вместе и добавляют стерильную дистиллированную воду, чтобы довести объем до 100 мл. Значение pH раствора регулируют до pH 6,8 при помощи NaOH или HCl для получения микроэмульсии. 10 г пропилгаллата и 10 г галловой кислоты растворяют в микроэмульсии соответственно и хорошо смешивают. 10 мл каждой микроэмульсии добавляют в прозрачную стеклянную пробирку с колпачком. Оба раствора бесцветные. Абсорбцию двух растворов измеряют спектрофотометрически при 400-500 нм, их абсорбция ниже 0,15. Затем оба раствора хранят при комнатной температуре 30 дней, раствор галловой кислоты становится светлокоричневым, тогда как раствор пропилгаллата остается бесцветным. Вновь спектрофотометрически измеренная абсорбция раствора галловой кислоты составляет 1,2, а у раствора пропилгаллата составляет 0,4. Это означает, что пропилгаллат более устойчивый в растворе, чем галловая кислота. Промышленная применимость. Сложные эфиры гидроксибензойной кислоты по данному изобретению могут применяться для получения фармацевтических композиций для предупреждения и лечения вирусной инфекции, а именно для болезней, связанных с HPV у людей и животных, таких как остроконечная кондилома, вагинит, цервицит и цервикальная эрозия. Сложные эфиры гидроксибензойной кислоты, раскрытые в данном изобретении, являются более эффективными и устойчивыми, чем известная гидроксибензойная кислота. Сложные эфиры гидроксибензойной кислоты могут быть выполнены в форме различных лекарственных средств при получении вместе с фармацевтическими адъювантами. Данное изобретение было описано выше подробно основной терминологией и специфическими примерами. Специалист данной области может легко выполнить некоторые модификации и улучшения на основании описания в данной заявке. Таким образом, релевантные модификации и улучшения на основании данного изобретения находятся в рамках данного изобретения. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение сложного эфира гидроксибензойной кислоты формулы (I) в получении лекарственного средства для предупреждения и лечения вирусной инфекции HPV у человека или животного, где R представляет собой C1-11 алкильную группу; R1, R2, R3, R4 и R5 независимо являются OH или H; причем по меньшей мере два из R1, R2, R3, R4 и R5 являются OH; при этом сложный эфир формулы (I) не является эфиром салициловой кислоты 2. Применение по п.1, где вирусной инфекцией является остроконечная кондилома, вагинит, цервицит или цервикальная эрозия. 3. Применение по п.1 или 2, где лекарственное средство для предупреждения и лечения вирусной инфекции применяется при лечении рака шейки матки. 4. Применение по любому из пп.1-3, где R является C1-8 алкильной группой. 5. Применение по любому из пп.1-4, где R является C1-3 алкильной группой.-8 016576 6. Применение по любому из пп.1-5, где по меньшей мере три из указанных R1, R2, R3, R4 и R5 представляют собой OH. 7. Применение по любому из пп.1-6, где сложный эфир гидроксибензойной кислоты выбран из группы, состоящей из сложного эфира 2,4-дигидроксибензойной кислоты, сложного эфира 3,4 дигидроксибензойной кислоты, сложного эфира 2,3,4-тригидроксибензойной кислоты и сложного эфира 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты. 8. Применение по любому из пп.1-7, где сложный эфир гидроксибензойной кислоты выбран из группы, состоящей из сложного эфира 2,3,4-тригидроксибензойной кислоты и сложного эфира 3,4,5 тригидроксибензойной кислоты. 9. Применение по любому из пп.1-8, где сложным эфиром гидроксибензойной кислоты является сложный эфир 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты. 10. Применение по любому из пп.1-9, где лекарственное средство выполнено в форме порошка, раствора, таблетки, капсулы, гранулы или жидкости с различными адъювантами для инъекции или пероральной формы введения или выполнено в форме мази, геля, лосьона, таблетки, суппозитория или спрея.

МПК / Метки

МПК: A61K 9/12, A61P 31/12, A61K 9/02, A61K 31/215, A61K 9/08, A61K 9/06, A61P 31/22

Метки: человека, кислоты, эфиров, средства, лечения, применение, получения, папилломавирусной, сложных, гидроксибензойной, предупреждения, лекарственного, инфекции

Код ссылки

<a href="http://easpatents.com/10-16576-primenenie-slozhnyh-efirov-gidroksibenzojjnojj-kisloty-dlya-polucheniya-lekarstvennogo-sredstva-dlya-preduprezhdeniya-i-lecheniya-papillomavirusnojj-infekcii-cheloveka.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Применение сложных эфиров гидроксибензойной кислоты для получения лекарственного средства для предупреждения и лечения папилломавирусной инфекции человека</a>

Похожие патенты